單元檢測(九)生物技術與工程(考試用時:90分鐘滿分:100分)一、選擇題(本大題共25小題,每小題2分,共50分。每小題列出的四個備選項中只有一個是符合題目要求的,不選、多選、錯選均不得分)1.高等哺乳動物的胚胎發育一般都要閱歷“受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體形成”等階段。下列有關敘述錯誤的是()A.受精卵通過有絲分裂不斷增加體細胞數目B.卵裂期細胞與受精卵所含的核酸種類和數量相同C.原腸胚細胞通過增殖分化形成幼體的各種組織和器官D.幼體形成后照舊保留著少數具有分裂和分化實力的細胞2.某雜種植株的獲得過程如圖所示,下列有關分析正確的是()A.清洗培育基密度小于原生質體密度B.圖示①過程可用聚乙二醇調整滲透壓C.葉片經消毒后需用蒸餾水多次沖洗D.原生質體融合勝利的標記是再生細胞壁3.生物武器素來令人談虎色變,下列敘述錯誤的是()A.生物武器不同于常規武器的是有些具有傳染性B.歷史上生物武器對人類造成了嚴峻的威逼與損害C.隨著醫學技術發展,生物武器造成的威逼不斷降低D.我國對生物武器及其技術和設備的擴散持反對看法4.下列關于生物技術與倫理問題的敘述,正確的是()A.生物戰劑的病原體有細菌類和病毒類兩大類B.轉基因食品的平安性是不容置疑的C.試管嬰兒技術已經成熟,可對植入前胚胎進行遺傳學診斷和基因改造D.治療性克隆是利用克隆技術產生特定的細胞來修復或替代受損的細胞5.科研人員通過干預優良經濟動物的早期胚胎發育過程,以達到經濟動物的大規模生產,從而獲得經濟效益。下列敘述錯誤的是()A.體外受精之前須要對精子進行獲能處理B.超數排卵可以為體外受精供應足夠的卵細胞C.胚胎分割技術可以提高胚胎的利用率D.代孕母體必需是同期發情的優良經濟動物6.棉酚是棉花植株中一種對動物有危害的毒性物質,探討人員試圖從棉花田的土壤中分別篩選出高效分解棉酚的菌株。下列敘述錯誤的是()A.篩選培育基需以棉酚為唯一的養分物質B.試驗過程中需嚴格遵循無菌操作原則C.稀釋涂布平板法或平板劃線法均可用來分別純化棉酚分解菌D.棉酚分解菌可分解棉酚的根本緣由是含有能分解棉酚相應酶的基因7.2024年3月,中國首塊100%雞細胞肉在杭州一家生物公司研制勝利,這是一塊完全不含植物支架的動物細胞培育肉產品。培育細胞取自杭州的一種本土雞,培育肉經多種烹飪方式后的口感與傳統雞肉幾乎無差別。下列關于該技術的敘述,正確的是()A.原理是細胞的全能性B.培育須要無毒、無菌和合適配比的養分和氣體條件C.培育的材料可取分化程度較高的肌肉干細胞,經消化分散后培育D.所需的成本低,且細胞肉的質量可控,很有發展前景8.從目標生物中提取分別DNA,是進行基因工程操作的基礎。某愛好小組嘗試從簇新香蕉果肉中進行DNA的粗提取及分別,下列有關敘述錯誤的是()A.可用蛋白酶對濾液中的DNA進行純化B.酵母或菜花可以作為替代香蕉果肉的材料C.加入冷酒精后快速研磨以析出絮狀物D.設置只加二苯胺試劑的空白比照組,目的是與試驗組進行顏色比照9.探討者發覺金黃色葡萄球菌的培育基中長出了青霉菌落,青霉四周出現透亮圈(如圖),最終發覺青霉素。抗生素能夠抑制細菌的生長與繁殖,因此在抗生素環境四周出現了透亮的抑菌圈。下列敘述錯誤的是()金黃色葡萄球菌和青霉菌落間出現透亮圈的現象A.依據是否有抑菌圈可推斷抗生素對細菌是否有抑制效果B.抑菌圈直徑與菌落直徑比值的大小可推斷抗生素對細菌抑制效果強弱C.要選擇能抗青霉素的細菌應從抑菌圈邊緣獲得目的菌D.抑菌圈邊緣存活的細菌確定產生了耐藥性10.將山核桃miRNA169基因轉入擬南芥中,可促進擬南芥提前開花,部分流程如下圖。下列敘述錯誤的是()A.過程①通常須要逆轉錄酶催化B.過程②中可利用PCR技術擴增并篩選出目的基因C.過程中轉化農桿菌一般須要農桿菌的Ti質粒作為表達載體D.過程④收獲轉化的種子需經植物組織培育才能獲得提前開花的植株11.某同學選用簇新成熟的葡萄制作果酒和果醋,下列相關敘述正確的是()A.果酒發酵時,每日快速打開瓶蓋放氣,避開空氣回流進入發酵容器B.果酒發酵時,用本尼迪特試劑檢測還原糖的含量,紅黃色沉淀逐日增多C.果醋發酵時,發酵液產生的氣泡量明顯少于果酒發酵產生的氣泡量D.果醋發酵時,重鉻酸鉀測定醋酸含量變更時,溶液灰綠色逐日加深12.動物細胞工程包括細胞培育、細胞融合、核移植等技術。下列敘述正確的是()A.體外培育白細胞到確定階段時,會出現貼壁生長和接觸抑制現象B.用生物方法誘導動物細胞融合時,接受的仙臺病毒已進行滅活處理C.骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合后,經誘導融合的細胞即為雜交瘤細胞D.通過核移植和體外受精所獲得的胚胎都須移植給特定受體才能獲得后代13.下列關于植物細胞工程應用的敘述,錯誤的是()A.誘變處理愈傷組織可獲得基因重組的新品種B.人工種子可以解決某些作物品種繁殖實力差、結籽困難等問題C.以植物根尖、莖尖為外植體進行組織培育,可培育脫毒植株D.植物細胞培育技術可實現藥物、食品添加劑等的工業化生產14.下圖是白菜與甘藍體細胞雜交技術的流程,下列分析錯誤的是()A.該過程發生了染色體變異B.過程①②均應置于較高滲透壓溶液中C.經過程②③獲得的均為雜種細胞D.過程④⑤通常須要相宜的植物生長調整劑的配比15.有一些細菌能分泌脲酶將尿素水解為NH3和CO2,吸取后可作為自身含氮物質合成的原料,該過程在生態系統的氮平衡中起到重要作用,通過配制尿素固體培育基可篩選出這類細菌。下列有關敘述正確的是()A.尿素是這類細菌利用的干脆氮源B.分泌脲酶的細菌在生態系統中屬于次級生產者C.配制尿素固體培育基時要用無菌水,不能用蒸餾水D.以尿素為唯一氮源的液體培育基也能篩選出分泌脲酶的細菌閱讀以下材料,回答第16、17題。枯草芽孢桿菌分泌的蛋白酶在生物醫藥和日用化工等生產領域具有重要的經濟價值,為篩選高產蛋白酶的枯草芽孢桿菌,將分別浸過不同菌株(a~e)分泌物提取液的圓紙片置于含某種高濃度蛋白質的平板培育基表面,在37℃恒溫箱中放置2~3d,結果如圖1。檢測枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其他酶的熱穩定性數據(即酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其酶活性),結果如圖2。圖1圖216.下列有關敘述正確的是()A.運用高濃度蛋白質的目的之一是使培育基呈現不透亮的狀態B.為使試驗數據更加可信,應增設浸過蒸餾水的圓紙片進行比照試驗C.菌株b提取液四周沒有形成明顯透亮圈的緣由確定是不能合成蛋白酶D.蛋白酶制備時需研磨裂開枯草芽孢桿菌17.在工業化生產過程中,制備該蛋白酶制劑前,枯草芽孢桿菌發酵液需在確定的溫度下保溫確定時間,下列溫度區間中最合適的是()A.30~40℃ B.40~50℃C.50~60℃ D.60~70℃18.下列關于細胞工程和胚胎工程的敘述,正確的是()A.動物細胞培育時,須要供應95%的O2和5%CO2的氣體環境B.靈長類動物克隆試驗中,動物體細胞核移植勝利率低于胚胎細胞C.“克隆羊”“試管羊”的培育過程,都用到了核移植技術和胚胎移植技術D.克隆高產奶牛時,將重構胚(重組胚胎)進行胚胎移植后,需用化學或物理方法“激活”19.某愛好小組對土壤中細菌進行分別并計數,利用選擇培育基篩選某種細菌,以下敘述正確的是()A.可配制以(NH4)2SO4為唯一氮源的培育基用于篩選硝化細菌B.全部培育基的成分均需進行高壓蒸汽滅菌C.脲酶將尿素分解成氨,使培育基的pH降低,加入酚紅指示劑后變紅D.本試驗可接受稀釋涂布平板法或平板劃線法的接種方法閱讀下列材料,回答第20、21題。解偶聯蛋白1(UCP1)是一種線粒體內膜蛋白,具有消退線粒體內膜兩側的H+濃度差、削減ATP合成、增加耗氧量、增加產熱的功能。我國科學家通過CRISPR/Cas9技術將小鼠的UCP1基因置換到豬的體內,并使鼠UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達,獲得了脂肪沉積少的“瘦肉豬”,下圖是“瘦肉豬”的主要培育過程。20.下列關于UCP1的相關分析與推想,錯誤的是()A.UCP1可能主要影響需氧呼吸的第三階段ATP的生成量B.寒冷刺激可能會提高恒溫動物UCP1的活性或表達量C.脂肪組織細胞中UCP1基因表達效率低的豬,瘦肉產率更高D.甲狀腺激素可能具有提高UCP1基因表達的作用21.下列關于“瘦肉豬”培育過程的敘述,錯誤的是()A.CRISPR/Cas9技術育種的主要原理是基因重組B.b過程中,進行有限稀釋培育的目的是獲得陽性單克隆細胞系C.d過程中,受體細胞選擇去核的豬卵母細胞效果最好D.e過程中,需對代孕豬進行超數排卵及同期發情處理22.生物技術與工程實踐中常利用特別的化學試劑或確定的物理刺激進行“激活”操作。下列敘述錯誤的是()A.將果酒用于果醋發酵時,降低溫度是“激活”醋酸菌的重要條件之一B.在PCR反應過程中,耐高溫的DNA聚合酶須要Mg2+“激活”C.克隆高產奶牛時,獲得的重構胚須要在胚胎移植前用電脈沖等方法“激活”D.制備單克隆抗體時,應先利用抗原“激活”小鼠相應的B淋巴細胞23.人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白,可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得,流程如下。下列相關敘述正確的是()A.過程①用雌激素處理以獲得更多卵母細胞B.過程②在雌鼠a的輸卵管內完成受精C.過程③需將表達載體通過顯微注射到子宮中D.過程④前需對胚胎進行性別鑒定24.疣粒野生稻對白葉枯病有較高抗性,但與栽培稻雜交后代高度不育,限制了野生稻的抗病基因向栽培稻轉移。為解決該問題,科研人員通過施加大劑量的X射線(隨機破壞染色體結構,使細胞不再分裂)和碘乙酰胺(使細胞質中的某些酶失活,細胞不再分裂)等措施獲得抗病品系,該過程如圖所示。下列敘述正確的是()A.疣粒野生稻和栽培稻間不存在生殖隔離B.過程①應通過選擇培育基篩選得到原生質體CC.過程②發生脫分化,過程③中可能發生基因重組D.此方法得到的再生植株不確定具有抗病性25.科研人員將目的基因J與質粒構建重組表達載體,該質粒的部分結構如圖所示,下列敘述錯誤的是()A.除圖中標出的結構外,質粒還需具備的結構有復制起點、標記基因、限制酶切位點等B.與圖中啟動子結合的酶是RNA聚合酶C.用PCR檢測J基因連接到質粒中且方向正確可選用的一對引物是F1和R2D.若J基因轉錄的鏈位于b鏈,可知引物F1與基因J的b鏈相應部分序列相同二、非選擇題(本大題共3小題,共50分)26.(16分)探討人員欲將嗜鹽微生物中的某種抗鹽基因導入單子葉水稻,從而培育抗鹽水稻新品種,回答下列問題。(1)獲得抗鹽基因。若抗鹽基因的序列已知,為獲得大量該基因,可將其連接到上,通過大腸桿菌培育實現擴增;也可通過PCR技術進行擴增,擴增過程中兩種特異性引物會與靠近模板鏈端的堿基序列配對結合,為削減反應中因引物和模板不完全配對而產生的非特異條帶數量,下列哪一項措施最有效?(A.增加模板數量B.延長熱變性時間C.延長延長時間D.提高復性溫度)。若抗鹽基因的序列未知,可將該種嗜鹽微生物的全部DNA提取、切割后與載體連接,再導入受體菌的群體中儲存,該群體稱為,然后從中篩選得到所需抗鹽基因。

(2)制備原生質體。植物細胞壁對外源基因的導入造成確定阻礙,因此可接受酶去除而得到原生質體。在制備葉片原生質體的酶混合液中,一般含較高濃度的甘露醇,可使細胞處于微弱的狀態,從而有利于完整原生質體的釋放,制得的原生質體呈形。

(3)將抗鹽基因導入原生質體。可通過方法,干脆將抗鹽基因導入原生質體的細胞核也可將抗鹽基因通過載體導入處于的農桿菌,再進一步完成轉化。農桿菌主要侵染雙子葉植物,雙子葉植物受傷時,其傷口處產生的酚類化合物會吸引農桿菌并激活Ti質粒相關基因的表達,因此接受的方法可提高轉化效率。導入后的原生質體經培育重新長出細胞壁,則在接著培育的過程中需對培育基進行的調整是,以利于細胞的接著分裂。

(4)檢測篩選轉基因植株。可利用帶有標記的抗鹽基因片段作為,與從轉基因植株提取的DNA進行雜交,雜交前需通過處理使提取的DNA;也可通過含有的培育基,依據生長狀況初步篩選出抗鹽植株。

(5)抗鹽性狀的優化。探討人員基于已有的探討成果推想,將上述抗鹽蛋白中的第38位氨基酸甲變更為氨基酸乙可能會顯著提高其作用效果,他們因此通過新的氨基酸序列合成了新的基因序列,并最終獲得了效果更優的抗鹽蛋白,該過程是通過工程來實現的。

27.(14分)為獲得純合的轉K基因植株,某同學設計了一個試驗流程,其主要內容如圖所示。回答下列問題。(1)自然的目的基因不滿意生產需求,探討人員設想通過易錯PCR技術引入隨機突變,再進行定向篩選,獲得滿意需求的K基因。易錯PCR與一般PCR相像,每次循環也包括變性、退火、三步,但可以通過變更PCR反應條件來提高堿基錯配的概率。探討發覺Mg2+可以提高已發生錯配區域的穩定性,Mn2+可以降低DNA聚合酶對底物的專一性,因此與一般PCR相比,易錯PCR反應體系中應適當。

A.提高Mg2+和Mn2+濃度B.降低Mg2+和Mn2+濃度C.提高Mg2+降低Mn2+濃度D.降低Mg2+和提高Mn2+濃度(2)農桿菌廣泛分布在土壤中,若從土壤中分別農桿菌,應取(填“表層”或“深層”)土壤。圖中A感染愈傷組織的過程中,K基因隨整合到植物細胞染色體上。(3)組織培育過程中無菌操作是特別重要的。花粉在培育前需進行消毒處理,不同物種、不同外植體對消毒試劑的反應不同,所以應恰當選擇消毒試劑的、和處理時間。培育基滅菌后應放置3~5d后運用,目的是使培育器皿內的揮發,并視察培育基的以保證外植體接種在無菌的培育基上。

(4)B過程將愈傷組織浸入高壓滅菌的溶液中處理,再用清洗后,接種于分化培育基上,再生植株。

(5)獲得二倍體植株后,若需檢測K基因是否存在于植株的不同組織細胞中,某同學用PCR方法進行鑒定,在鑒定時應以不同組織細胞中的(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。若要進一步檢測K基因是否正確表達,應檢測此植株中K基因的,假如檢測結果呈陽性,再在田間試驗中檢測植株的是否得到變更。

28.(20分)紫杉醇是寶貴的抗癌藥物,但目前資源短缺,紫杉醇產量低,為了獲得更多的紫杉醇,很多科學家進行了多方面的嘗試與探討。(1)快速培育紅豆杉植株:選取合適的外植體作為起始材料,為提高組培勝利率,常選擇幼嫩莖段,緣由是。接種前還需對其進行處理。愈傷組織經過程形成組培苗,組培苗移栽至特別基質并檢驗后作為生產用苗。移栽時,用洗掉根部殘留的培育基,防止瓊脂發霉引起爛根。

(2)紅豆杉細胞懸浮培育:對紅豆杉的愈傷組織進行液體懸浮培育獲得的細胞,通過繼代培育,獲得能產生紫杉醇的。但紫杉醇本身是一種細胞生長的毒性物質,在培育基中的積累量越多,對細胞增殖的抑制越強。為了減弱其抑制作用,可實行的措施有哪幾項?。

A.定時更換培育基B.剛好提取紫杉醇C.接受莖尖來培育以獲得脫毒苗D.篩選耐紫杉醇的細胞培育物(3)探討發覺表達來自原核細胞的MET1基因的紅豆杉的紫杉醇的含量顯著提高。圖1、2表示為構建基因表達載體時所需的關鍵條件。圖1圖2試驗思路如下。①設計引物擴增MET1基因序列:為使擴增出的序列中編碼起始密碼子(GUG)的序列由原核生物偏好的GTG轉變為真核生物偏好的ATG,且能通過雙酶切確保目的基因以正確方向插入質粒,需設計引物1和2。其中引物1的5'端序列應如何設計?、。

②構建重組DNA分子并導入受體細胞:將上述PCR產物和質粒重組,導入農桿菌后與紅豆杉細胞共培育以實現。重組Ti質粒上有,所以能在農桿菌中擴增。培育農桿菌時需在培育基中添加進行篩選。

③MET1基因的檢測與表達分析:可提取并分別受體細胞的,利用RT-PCR技術(逆轉錄-聚合酶鏈式反應)檢測,該過程須要用到的酶是。若要分別MET1基因的表達產物可用法,其原理是蛋白質分子的電荷、大小及形態不同,在電場中的移動速度不同而實現分別。

答案：1.B2.D原生質體在略微高滲溶液中比在等滲溶液中更為穩定,清洗培育基密度大于原生質體密度,A項錯誤;圖示①過程調整滲透壓用的是滲透壓穩定劑,B項錯誤;葉片經消毒后需用無菌水沖洗,C項錯誤;原生質體融合勝利的標記是再生細胞壁,即原生質體活性正常,D項正確。3.C生物武器不同于常規武器,其致病力強、攻擊范圍廣,有些具有傳染性,且危害難以限制,對于未知的生物武器難以防范,A項正確;歷史上生物武器曾對人類造成了嚴峻的威逼與損害,為防止生物武器的危害,要發展生物平安前瞻科技、儲備生物防衛技術,以保證人民的生命平安,B項正確;隨著醫學技術發展,生物技術也在發展,且可能會被別有專心的人用于研制生物武器,因此生物武器造成的威逼不會降低,C項錯誤;中國在《禁止生物武器公約》中重申在任何狀況下不發展、不生產、不儲存生物武器,且我國對生物武器及其技術和設備的擴散持反對看法,D項正確。4.D依據生物戰劑的形態和病理可將生物戰劑分為細菌類生物戰劑、病毒類生物戰劑、立克次體類生物戰劑、衣原體類生物戰劑、毒素類生物戰劑、真菌類生物戰劑,A項錯誤;目前轉基因生物的平安性是存在爭辯的,主要是食物平安和環境平安,另外還有生物平安問題,B項錯誤;試管嬰兒技術已經成熟,可對植入前胚胎進行遺傳學診斷,推斷其是否含有遺傳病基因或者異樣染色體,但是不能進行定向基因改造,C項錯誤;生殖性克隆的目的是產生人類個體,任何狀況下都是禁止的,治療性克隆的目的是產生特定細胞、組織和器官用于治療疾病,D項正確。5.D體外受精之前,須要對精子進行獲能處理,使其具有受精的實力,A項正確;用促性腺激素對供體母牛進行超數排卵處理,以獲得足夠數量的卵細胞,B項正確;為提高胚胎的利用率,可以接受胚胎分割技術,C項正確;代孕母體是有健康的體質和正常繁殖實力的受體,不須要是優良經濟動物,D項錯誤。6.A分別過程中運用以棉酚為唯一碳源的培育基,只有能分解棉酚的微生物能生長,該培育基屬于選擇培育基,培育基中除了碳源以外,基本成分還有氮源、水和無機鹽,因此不是以棉酚為唯一的養分物質,A項錯誤;獲得純凈的培育物關鍵是防止外來雜菌的入侵,因此試驗過程中需嚴格遵循無菌操作原則,B項正確;純化微生物的方法有稀釋涂布平板法或平板劃線法,且稀釋涂布平板法還可以對微生物進行計數,C項正確;棉酚分解菌可分解棉酚的干脆緣由是具有相應的酶存在,根本緣由是細胞內存在含有能分解棉酚相應酶的基因,能夠指導該酶的合成,D項正確。7.B上述過程并未得到完整個體或各種細胞,故不能體現細胞的全能性,其原理是細胞增殖,A項錯誤;上述過程主要接受動物細胞培育技術,培育須要無毒、無菌和合適配比的養分和氣體條件,B項正確;培育的材料應取分化程度較低的細胞,C項錯誤;“細胞培育肉”制造過程中,肌肉細胞的培育須要借助合適的支架體系來防止細胞的接觸抑制,成本較高,D項錯誤。8.C提取DNA主要就是將DNA和蛋白質分開,蛋白酶可分解蛋白質,利用蛋白酶可對濾液中的DNA進行純化,A項正確;酵母或菜花的細胞中都含有DNA,可以作為替代香蕉果肉的材料,B項正確;DNA不溶解于酒精,在上清液中加入體積相等的、預冷的酒精溶液(體積分數為95%),靜置2~3min,溶液中出現的白色絲狀物就是粗提取的DNA,不須要快速研磨,C項錯誤;設置只加二苯胺試劑的空白比照組,目的是與試驗組進行顏色比照,以鑒定提取出的物質是DNA,D項正確。9.D若抗生素對細菌有抑制效果,則存在抗生素的部位不會生長細菌菌落,故依據是否有抑菌圈可推斷抗生素對細菌是否有抑制效果,A項正確;抑菌圈直徑與菌落直徑比值的大小可推斷抗生素對細菌抑制效果強弱,一般而言比值越大,抑菌效果越好,B項正確;由于抑菌圈邊緣的菌落干脆與青霉素接觸,耐藥性強,所以連續培育時應從抑菌圈邊緣的菌落挑取細菌,從而獲得目的菌,C項正確;抗生素能夠殺死細菌,抑菌圈邊緣抗生素濃度較低,故抑菌圈邊緣菌落中的細菌可能產生了耐藥性,但有可能也存在能利用耐藥菌產物的其他菌,D項錯誤。10.D過程①為mRNA逆轉錄得到cDNA的過程,須要逆轉錄酶的催化,A項正確;過程②序列已知,可利用PCR技術篩選并擴增出目的基因,B項正確;過程③中轉化農桿菌一般須要Ti質粒(農桿菌質粒)作為表達載體,C項正確;過程④收獲轉化的種子,干脆在土壤中培育也可以長成植株,不須要經植物組織培育,D項錯誤。11.C果酒發酵時,裝置內會產生二氧化碳,應每日快速擰松瓶蓋放氣,避開空氣中的雜菌進入,A項錯誤;果酒發酵時,發酵液中的葡萄糖不斷被消耗,因此用本尼迪特試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變更,紅黃色沉淀逐日削減,B項錯誤;以酒精為底物進行醋酸發酵,酒精與氧氣發生反應產生醋酸和水,幾乎沒有氣泡產生,發酵液產生的氣泡量明顯少于果酒發酵時,C項正確;重鉻酸鉀用于檢測酒精,不能用于測定醋酸含量,D項錯誤。12.A進行動物細胞培育時,有的細胞表現為貼壁生長,該類細胞在培育過程中會出現接觸抑制現象,如體外培育的白細胞會出現貼壁生長和接觸抑制現象,A項正確;滅活的病毒是誘導動物細胞融合的特有方法,誘導動物細胞融合時,接受的仙臺病毒需進行滅活處理,B項錯誤;骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合后,經誘導融合的細胞未必是雜交瘤細胞,因為有的細胞沒有融合,也有的細胞是同種類型的融合,因此須要經過篩選才能獲得雜交瘤細胞,C項錯誤;通過核移植和體外受精所獲得的胚胎須要移植給經過同期發情處理的受體,這樣能保證胚胎的存活,且只須要受體具有良好的孕育實力即可,D項錯誤。13.A基因重組發生在減數分裂過程中,愈傷組織發育形成新個體屬于有絲分裂,因此誘變處理愈傷組織不會進行基因重組,A項錯誤;人工種子具有很多優點,如解決有些作物品種繁殖實力差、結籽困難、發芽率低等問題,B項正確;植物莖尖的分生區旁邊病毒極少,甚至無病毒,利用植物根尖、莖尖作外植體進行培育可以降低病毒的感染,但不能抗拒病毒,C項正確;植物組織培育技術還可以用來生產藥物、食品添加劑、香料、色素等,D項正確。14.C圖示為植物體細胞雜交的過程,雜種細胞為異源四倍體,即發生了染色體數目的變異,A項正確;過程①②均應置于較高滲透壓溶液中,這樣可以避開原生質體吸水漲破,B項正確;經過程②③獲得的未必都是雜種細胞,因為只考慮兩兩融合,則融合的細胞會有三種狀況,即白菜和甘藍的原生質體自融的狀況和互融獲得的雜種細胞,因而還須要篩選才能獲得所需的雜種細胞,C項錯誤;過程④⑤為植物組織培育技術的脫分化和再分化過程,該過程中通常須要相宜的植物生長調整劑的配比來獲得不同的細胞團,如當培育基中細胞分裂素和生長素比例適當時會誘導愈傷組織的產生,D項正確。15.B細菌分泌的脲酶能將尿素水解為NH3和CO2,吸取后可作為自身含氮物質合成的原料,說明這類細菌利用的干脆氮源是NH3,A項錯誤;分泌脲酶的細菌屬于分解者,消費者和分解者都是次級生產者,B項正確;配制尿素固體培育基后須要滅菌處理,配制尿素固體培育基時可以用蒸餾水,C項錯誤;運用固體培育基的緣由是固體培育基上細菌分裂產生的子代個體不易分散,從而形成菌落,故不能利用液體培育基進行篩選,D項錯誤。16.A蛋白質的溶解度較低,所以運用高濃度蛋白質的目的之一是使培育基呈現不透亮的狀態,A項正確;為使試驗數據更加可信,應增設浸過無菌水的圓紙片進行比照試驗,B項錯誤;菌株b提取液四周沒有形成明顯透亮圈的緣由可能是不能合成蛋白酶,也可能是合成的蛋白酶不能分泌到細胞外,C項錯誤;枯草芽孢桿菌能分泌蛋白酶,不須要研磨枯草芽孢桿菌,D項錯誤。17.D由圖可知,枯草芽孢桿菌的蛋白酶在60~70℃相對活性較大,而其他酶的活性較小,兩者的酶活性差值較大,有利于將蛋白酶與其他酶的活性相區分,D項符合題意。18.B動物細胞培育所處的氣體環境一般是95%的空氣+5%的CO2,95%空氣中的氧氣可以滿意細胞需氧呼吸的須要,5%的CO2可以維持培育液的pH,A項錯誤;動物胚胎細胞分化程度低,復原全能性相對簡潔,而體細胞分化程度高,復原全能性特別困難,故動物體細胞核移植的勝利率明顯低于胚胎細胞核移植,B項正確;“克隆羊”“試管羊”在培育過程中,都用到了動物細胞培育技術和胚胎移植技術,但只有“克隆羊”應用了核移植技術,C項錯誤;克隆高產奶牛時,重組胚胎(重構胚)須要用物理或化學的方法激活,使其完成細胞分裂和發育進程,然后將其移植到同種的、生理狀態相同的其他雌性受體體內,使之接著發育,不是胚胎移植后再激活,D項錯誤。19.A以無機氮源(NH4)2SO4為唯一氮源的培育基屬于選擇培育基,可用于篩選硝化細菌,A項正確;對于維生素等熱穩定性不強的成分,不能高壓蒸汽滅菌,B項錯誤;脲酶將尿素分解成氨,氨呈堿性,使培育基的pH上升,加入酚紅指示劑后變紅,C項錯誤;若本試驗須要計數,只能接受稀釋涂布平板法,D項錯誤。20.C解偶聯蛋白1(UCP1)是一種線粒體內膜蛋白,具有消退線粒體內膜兩側的H+濃度差、削減ATP合成、增加耗氧量、增加產熱的功能,故UCP1可能主要影響需氧呼吸的第三階段ATP的生成量;寒冷刺激可能會提高恒溫動物UCP1的活性或表達量,使機體產熱增加,A、B兩項正確;依據題干信息“UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達,獲得了脂肪沉積少的‘瘦肉豬’”,脂肪組織細胞中UCP1基因表達效率低的豬,瘦肉產率低,C項錯誤;甲狀腺激素進入靶細胞后,可通過調整UCP1基因的表達來促進線粒體活動使產熱增加,故甲狀腺激素可能具有提高UCP1基因表達的作用,D項正確。21.D應用CRISPR/Cas9技術育種的主要原理是基因重組,使得小鼠的UCP1基因在豬的體細胞中正常表達,A項正確;過程b進行有限稀釋培育,保證加到每個培育孔內的細胞數不超過1個,該操作的目的是獲得陽性單克隆細胞系,B項正確;卵母細胞含有激發細胞核全能性的物質,還可為細胞的早期分裂供應養分物質,故過程d的受體細胞最好是去核的豬卵母細胞,C項正確;過程e要對代孕豬進行同期發情處理,使之處于相同生理狀態,并選擇發育正常的桑葚胚或囊胚植入代孕豬的子宮中,D項錯誤。22.A多數醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃,高于酵母菌的發酵溫度,A項錯誤;PCR的緩沖液中一般存在Mg2+,其可“激活”耐高溫DNA聚合酶,B項正確;電脈沖等方法可以激活重構胚,使其正常發育,C項正確;B淋巴細胞接受抗原刺激可進行增殖分化,才可用于單克隆抗體的制備,D項正確。23.D為獲得更多的卵母細胞,要對供體母羊注射促性腺激素,目的是促進其超數排卵,A項錯誤;過程②是體外受精,體外受精是將獲能的精子和培育成熟的卵子置于適當的培育液中共同培育一段時間,來促使它們完成受精,B項錯誤;過程③需將表達載體通過顯微注射到羊的受精卵中,C項錯誤;為了在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得htPA,過程④前需對胚胎進行性別鑒定,選擇雌性胚胎移植,D項正確。24.D疣粒野生稻和栽培稻雜交后代高度不育,說明疣粒野生稻和栽培稻間存在生殖隔離,A項錯誤;疣粒野生稻施加大劑量的X射線后不分裂,栽培稻施加碘乙酰胺后不分裂,因此單獨的或者相同融合的細胞不能生長繁殖,則一般培育基就能得到原生質體C,B項錯誤;過程③發生有絲分裂,而基因重組發生在減數分裂過程中,C項錯誤;疣粒野生稻用X射線處理,依據的原理是基因突變,由于突變具有不定向性,因此此方法得到的再生植株不確定具有抗病性,D項正確。25.D圖中有啟動子和終止子等,因此質粒還需具備的結構有限制酶切割位點、標記基因、復制起點等,A項正確;啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mRNA,B項正確;引物F2與R1或F1與R2結合部位包含J基因的堿基序列,因此推想為了確定J基因連接到質粒中且插入方向正確,進行PCR檢測時,若僅用一對引物,應選擇引物F2和R1或F1與R2,C項正確;b是模板鏈,而依據圖上啟動子和終止子的位置可知,轉錄方向是圖上從左向右,對應的模板鏈方向應當是3'-5',非模板鏈(也就是a鏈)是5'-3',考慮到DNA復制的方向是子鏈的5'-3',引物基礎上延長的方向確定是5'-3',所以引物結合的單鏈其方向是3'-5',圖中F1是前引物,在左側,所以其配對的單鏈是3'-5'的b鏈,故其序列應當與a鏈相應部分的序列相同,D項錯誤。26.答案(除標注外,每空1分)(1)質粒3'D(2分)基因組文庫(2)纖維素酶、果膠質壁分別圓球(3)顯微注射感受態農桿菌轉化降低培育基中甘露醇的濃度(4)探針解旋成單鏈/變性較高濃度鹽(5)蛋白質解析(1)獲得到抗鹽基因后可通過PCR技術使其擴增,也可通過將目的基因與質粒連接,再導入大腸桿菌內,利用大腸桿菌快速增殖的特點實現目的基因擴增。DNA聚合酶能在引物的3'端起先延長,結合子鏈延長方向為5'→3'端可知,擴增過程中兩種特異性引物會與靠近模板鏈3'端的堿基序列配對結合。增加模板DNA的量可以提高反應速度,但不能有效削減非特異性條帶,A項不符合題意;延長熱變性的時間和延長延長的時間會影響變性延長過程,但對于延長中的配對影響不大,故不能有效削減非特異性條帶,B、C兩項不符合題意;非特異性產物增加的緣由可能是復性溫度過低造成引物與模板的結合位點增加,故可通過提高復性的溫度來削減非特異性條帶的產生,D項符合題意。若抗鹽基因的序列未知,可將該種嗜鹽微生物的全部DNA提取、切割后與載體連接,再導入受體菌的群體中儲存,該群體稱為基因組文庫,然后從中篩選得到所需抗鹽基因。(2)植物細胞壁主要由纖維素和果膠組成,故可用纖維素酶和果膠酶破壞細胞壁,制備原生質體。在制備葉片原生質體的酶混合液中,一般含較高濃度的甘露醇,使細胞處于微弱的質壁分別狀態,一方面可以防止去壁時損傷細胞,另一方面還可以防止原生質體吸水漲破。(3)將目的基因導入受體細胞的方法有多種,可以利用顯微注射法將目的基因導入原生質體中,也可以利用感受態細胞法將目的基因與載體連接后導入處于感受態的農桿菌細胞中。結合農桿菌侵染植物的特點可知,農桿菌轉化法可提高轉化效率。將轉化后的原生質體進行培育,重新長出細胞壁,此時,應當降低培育基中甘露醇濃度,以利于植物細胞接著分裂、分化形成再生植株。(4)用分子雜交技術鑒定目的基因是否勝利導入時須要利用帶有標記的抗鹽基因片段作為探針,提取的待測DNA須要處理使之變性成單鏈,再與探針結合,視察是否有雜交帶產生。還可以從個體水平檢測目的基因是否勝利表達,大致思路為通過含有較高濃度鹽的培育基,依據生長狀況初步篩選出抗鹽植株。(5)依據蛋白質功能分析蛋白質結構,例如將上述抗鹽蛋白中的第38位氨基酸甲變更為氨基酸乙可能會顯著提高其作用效果,再依據氨基酸序列推想DNA序列,最終獲得改造的蛋白質,該過程須要通過蛋白質工程實現。27.答案(除標注外,每空1分)(1)延長A(2分)(2)表層