ICS11.080.01

CCSC47

中華人民共和國國家標準

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

代替GB/T18281.5-2015

`

醫療保健產品滅菌生物指示物第5部分：

低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

Sterilizationofhealthcareproducts—Biologicalindicators—Part5:Biological

indicatorsforlow-temperaturesteamandformaldehydesterilizationprocesses

(ISO11138-5:2017,IDT)

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發布XXXX-XX-XX實施

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

引言

GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》是有關生物指示物的通用性和專用性標準。GB/T18281

旨在提供生物指示物的要求、選擇和使用指南以及縮短培養時間的方法，擬由八個部分構成：

——第1部分：通則。目的在于提供生物指示物的通用要求。

——第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物。目的在于提供環氧乙烷滅菌用生物指示物的專用要

求。

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物。目的在于提供濕熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物。目的在于提供干熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。目的在于提供低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

的專用要求。

——第6部分：過氧化氫滅菌過程用生物指示物。目的在于提供過氧化氫滅菌用生物指示物的專

用要求。

——第7部分：選擇、使用和結果判斷指南。目的在于提供生物指示物的正確選擇和使用的指南。

——第8部分：縮短生物指示物培養時間的確認方法。目的在于提供縮短生物指示物培養時間的

確認方法。

GB18281.1規定了生物指標物在生產、標簽、測試方法和性能方面的通用要求，這些指示物包含

擬用于滅菌過程確認和常規監測的染菌載體和菌懸液。本文件規定了用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程中的生

物指示物的專用要求。

附錄B給出了低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測試方法原理。

GB18281標準系列由來自生產商、用戶和監管機構的專家們共同參與制定，代表了目前的“最先

進的技術。該系列標準并非是提倡在不建議使用的情況下使用生物指示物，而是為生物指示物的生產與

使用提供規范化要求。

ISO25424提供了用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認與常規監測的通用要求。

注：我國已公布了涵蓋滅菌或生物指示物要求的標準。

對生物指示物的選擇、使用和結果判讀指南見ISO14161。

II

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物

1范圍

本文件規定了用于使用低溫蒸汽甲醛作為滅菌劑的滅菌過程效果評價的試驗微生物、菌懸液、染菌

載體、生物指示物和測試方法的要求。

注1：低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認和常規控制的要求見ISO14937。

注2：工作場所的安全要求見我國國家或地方法規。

本文件適用于低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他滅菌用生物指示物。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017，IDT）。

3術語和定義

ISO11138-1界定的以及下列術語和定義適用于本文件。

3.1

低溫蒸汽甲醛滅菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通過動力排氣，使預先包裝的物品處在負壓狀態下暴露于蒸汽，在低于100℃溫度下，注入甲醛

氣體使滅菌劑在維持時間內保持穩定狀態的過程。

4通用要求

ISO11138-1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌以外的試驗微生物，應確定試驗微生物的抗力適用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體和初級包裝

7.1用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應證明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附錄B的要求。

注：由于纖維素表面對甲醛的化學吸附作用，濾紙類不宜作載體。

7.2確定符合性的暴露條件應如下：

a)最低暴露溫度：制造商標稱的最高暴露溫度的5℃以上；

b)最高暴露溫度：由制造商標稱；如果制造商未標稱，最高暴露溫度應≥100℃；

c)暴露時間：≥160min。

注：盡管在低溫蒸汽甲醛滅菌過程的實際限制范圍內，暴露條件還需代表對載體的現實挑戰。

8染菌載體和生物指示物

ISO11138-1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1抗力特性應按ISO11138-1：2017的6.4要求標稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數的增量應以≤0.1×10n的整數倍標稱（如：每毫升菌懸液、每個染

菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數應≥1.0×105。

9.4抗力應用60℃時的D值表示，單位為分鐘。每一批次的生物指示物或者染菌載體的D值應

以60℃下分鐘數進行標稱，保留一位小數。

9.5按照附錄A進行測試時，以嗜熱脂肪地芽孢桿菌芽孢制成的菌懸液、染菌載體或生物指示物的

D60值應≥6.0min。采用其它微生物時，應滿足該D值要求。

9.6本文件和ISO11138標準系列中其它部分中規定的抗力特性應使用與參考滅菌過程相關的特定

關鍵變量來測定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附錄C和附錄D的方法確定。

9.8D值的確定和存活—殺滅反應特性依據附錄A中的過程參數。

9.9存活—殺滅區間宜用ISO11138-1:2017中附錄E的公式來計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品時是有價值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附錄E的公式結合本文件規定的最少菌數與最小D值，存活-殺滅反應特性為

-在60℃時：存活時間≥18min，殺滅時間≤54min。

2

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附錄A

（規范性）

測定低溫蒸汽甲醛滅菌過程中抗力的方法

A.1通則

本方法是一種基于染菌載體浸沒到甲醛水溶液的定性測試。本方法的測試結果比使用氣相腔式方法

的結果有更好的重現性。

A.2染菌載體的暴露條件

A.2.1測試系統中包含裝有10mL甲醛水溶液的試管，并使試管放在一個自動控溫的水浴裝置中。測

試系統應能在1min至150min時間段內（精確至±10s）保持特定的暴露條件。

A.2.2甲醛水溶液的濃度應用化學分析方法確定。

A.2.3方法應進行確認。

A.3步驟

A.3.1測試時采用無菌操作以避免偶發污染。

A.3.2將染菌載體完全浸沒于裝有預熱至60℃±0.5℃、濃度為1mol/L±0.01mol/L的甲醛水溶

液測試試管中。

A.3.3確認染菌載體完全浸沒于甲醛水溶液中而不是漂浮于表面。

A.3.4在設定的暴露時間結束時，取出甲醛溶液中的染菌載體。

A.3.5去除載體上的多余液體，將其在室溫下浸入裝有已過濾后的2%Na2SO3溶液的試管中至少1

0min，以中和載體上殘留的甲醛。蓋上試管。應注意盡量不要攪動甲醛與中和劑溶液，以防止微生物

被沖下。

注：組氨酸和半胱氨酸是有效的中和劑。

A.3.6應規定生長培養基，確保該培養基可回收測試微生物。

注：本測試中大豆酪蛋白消化培養基適用。

A.3.7將載體轉移至裝有10mL生長培養基（A.3.6）的試管中。蓋上試管。

A.3.8將試管在90℃下放置60min用于孢子的熱激活。

A.3.9最后對載體進行培養（見ISO11138-1:2017，第7章）。

A.4抗力確定

抗力特性應按ISO11138-1:2017中附錄C、D和E的方法進行確定。

3

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附錄B

（資料性）

低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測試方法原理

B.1通則

為了能夠以可重復的方法檢測指示物，應使用特定的測試設備（抗力儀）和測試方法。在低溫蒸汽

甲醛滅菌過程中，抗力儀中的甲醛氣體濃度極難達到穩定，因為當一定量的甲醛注入容器中后，部分甲

醛會溶于出現的少量的水珠（冷凝物）中。依照溫度的不同，甲醛在水中的濃度高于其在氣體狀態下濃

度的1000倍至10000倍。

因此，本文件采用甲醛溶液浸泡的測試方法，該方法下甲醛濃度清晰界定，方法重現性較好。

B.2低溫蒸汽甲醛滅菌過程

即使在連續的蒸汽條件下和穩定的甲醛氣體濃度中，滅菌過程仍高度依賴于滅菌腔體的設計和裝載

物的特性。甲醛滅菌過程可以簡單地劃分為兩個步驟：

a)與蒸汽滅菌過程類似，裝載物表面會產生水珠冷凝物膜；

注：冷凝過程會極快發生。

b)由于甲醛在氣液平衡狀態下的濃度變化極大（1:1000到1:10000），因此達到平衡所需要的

時間相對較長。

注：在實際情況下，需要的時間可能在10min至2h之間。

滅菌過程中對微生物殺滅的能力高度取決于甲醛在液態中的濃度，如表面冷凝水。確認達到這種平

衡條件的準確時間非常困難。

4

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

參考文獻

[1]ISO14161,Sterilizationofhealthcareproducts-Biologicalindicators-Guidancefortheselection,use

andinterpretationofresults

[2]ISO14937,Sterilizationofhealthcareproducts-Generalrequirementsforcharacterizationofa

sterilizingagentandthedevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedical

devices

[3]ISO25424,Sterilizaitonofmedicaldevices-Lowtemperaturesteamandformaldehyde-Requirements

fordevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedicaldevices

[4]EN14180,Sterilizersformedicalpurposes-Lowtemperaturesteamandformaldehyde

sterilizer-Requirementsandtesting

[5]GoMANNJ.,KAISERU.,MENZELR.Reactionkineticsofthelow-temperature-steam-formaldehyde

(LTST).SterilizationProcess.ZentrSteril.2000.8(5)pp.290-296

5

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定

起草。

本文件是GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》的第5部分。GB/T18281已經發布了以下

部分：

——第1部分：通則；

——第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物；

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物；

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物；

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物；

——第7部分：選擇、使用和結果判斷指南；

——第8部分：縮短生物指示物培養時間的確認方法。

本文件代替GB18281.5-2015《醫療保健產品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物》，與GB18281.5-2015相比，主要技術變化如下：

——更改了規范性引用文件（見第2章）；

——更改了載體和初級包裝的暴露時間（見7.2）；

——刪除了指示物抗力用FBIO值表示的規定（見2015年版的9.6）。

本文件等同采用國際標準ISO11138-5:2017《醫療保健產品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽

甲醛滅菌用生物指示物》。

本文件做了下列編輯性修改：

——刪除了國際標準的前言，以適應我國的國情；

——更改了引言中的注，以適應我國的國情；

——更改了范圍中的注2，以適應我國的國情。

本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別這些專利的責任。

本文件由全國消毒技術與設備標準化技術委員會（SAC/TC200）歸口。

本文件起草單位：

本文件主要起草人：

本文件所替代文件的歷次版本發布情況為：

——2015年首次發布為GB/T18281.5-2015；

——本次為第一次修訂。

I

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物

1范圍

本文件規定了用于使用低溫蒸汽甲醛作為滅菌劑的滅菌過程效果評價的試驗微生物、菌懸液、染菌

載體、生物指示物和測試方法的要求。

注1：低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認和常規控制的要求見ISO14937。

注2：工作場所的安全要求見我國國家或地方法規。

本文件適用于低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他滅菌用生物指示物。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017，IDT）。

3術語和定義

ISO11138-1界定的以及下列術語和定義適用于本文件。

3.1

低溫蒸汽甲醛滅菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通過動力排氣，使預先包裝的物品處在負壓狀態下暴露于蒸汽，在低于100℃溫度下，注入甲醛

氣體使滅菌劑在維持時間內保持穩定狀態的過程。

4通用要求

ISO11138-1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌以外的試驗微生物，應確定試驗微生物的抗力適用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體和初級包裝

7.1用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應證明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附錄B的要求。

注：由于纖維素表面對甲醛的化學吸附作用，濾紙類不宜作載體。

7.2確定符合性的暴露條件應如下：

a)最低暴露溫度：制造商標稱的最高暴露溫度的5℃以上；

b)最高暴露溫度：由制造商標稱；如果制造商未標稱，最高暴露溫度應≥100℃；

c)暴露時間：≥160min。

注：盡管在低溫蒸汽甲醛滅菌過程的實際限制范圍內，暴露條件還需代表對載體的現實挑戰。

8染菌載體和生物指示物

ISO11138-1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1抗力特性應按ISO11138-1：2017的6.4要求標稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數的增量應以≤0.1×10n的整數倍標稱（如：每毫升菌懸液、每個染

菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數應≥1.0×105。

9.4抗力應用60℃時的D值表示，單位為分鐘。每一批次的生物指示物或者染菌載體的D值應

以60℃下分鐘數進行標稱，保留一位小數。

9.5按照附錄A進行測試時，以嗜熱脂肪地芽孢桿菌芽孢制成的菌懸液、染菌載體或生物指示物的

D60值應≥6.0min。采用其它微生物時，應滿足該D值要求。

9.6本文件和ISO11138標準系列中其它部分中規定的抗力特性應使用與參考滅菌過程相關的特定

關鍵變量來測定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附錄C和附錄D的方法確定。

9.8D值的確定和存活—殺滅反應特性依據附錄A中的過程參數。

9.9存活—殺滅區間宜用ISO11138-1:2017中附錄E的公式來計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品時是有價值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附錄E的公式結合本文件規定的最少菌數與最小D值，存活-殺滅反應特性為

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