實驗動物的飼養(yǎng)

實驗動物設(shè)施消毒與滅菌任務(wù)描述知識平臺任務(wù)實施任務(wù)描述

了解實驗動物設(shè)施消毒滅菌的方法，消毒液的配制和使用，并實際在實驗動物設(shè)施內(nèi)進行消毒滅菌工作，填寫相應(yīng)的記錄表。

知識平臺知識平臺一、消毒與滅菌二、實驗動物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法三、飼育器具消毒與滅菌四、各種區(qū)域的消毒與滅菌五、SPF級飼育室的消毒六、消毒工作中的個人防護1.飼育架

耐熱性較好的飼育架，可以用高壓蒸汽滅菌(121℃，20~30min)，高壓蒸汽滅菌前，先將飼育架完全清洗干凈，并擦干。三、飼育器具消毒與滅菌2.飼育籠

耐熱飼育籠采用高壓蒸汽滅菌。在滅菌前，需要先去除籠內(nèi)污物(墊料等)，將飼育籠在溫水中浸泡一晚，充分清除籠內(nèi)污跡，洗凈飼育籠。最后送入滅菌器中進行滅菌（121℃，20~30min）。3.墊料一般情況下，墊料采用高壓蒸汽及干熱滅菌方法。（1）高壓蒸汽滅菌：墊料放入不銹鋼容器中，或者直接按每個飼育籠的需要量裝入籠子中一起滅菌，一般裝入2~3cm高。滅菌時間一般為40min(121℃)，干燥時間20min.（2）干燥滅菌用耐熱的不銹鋼容器，墊料放入八成左右，或直接按每個飼育籠的需要量裝入飼育籠中一起滅菌，一般裝入2~3cm高，然后放入到干熱滅菌器中，進行180℃30min滅菌處理。4.飼料盒、飲水瓶（1）消毒在進行消毒和滅菌之前，均應(yīng)清除飼料盒、飲水瓶中的飼料、飲水等，洗去附著的污物。用次氯酸鈉浸泡飼料盒、飲水瓶一個晚上，清洗干燥后放在規(guī)定的清潔場所。（2）滅菌

在溫水槽中將飼料盒、飲水瓶中殘留的飼料等污物浸泡一個晚上，以中性洗滌劑充分洗凈，放在大小適當(dāng)?shù)娜萜髦兴腿敫邏簻缇鳌?.飼料

將飼料裝入飼料箱放入高壓滅菌器中，箱與箱之間不要重疊，上下應(yīng)有一定的間隙。滅菌時間一般為121℃30~40min，干燥20~30min6.飲水

飲水一般采用高壓蒸汽滅菌。將耐熱性水瓶充分洗凈后，裝入80%經(jīng)過濾后的自來水，蓋上水瓶蓋，放入耐熱性容器中。7.實驗器具實驗用的器具有各種形狀、大小和材料等。一般根據(jù)其使用方法和目的進行適宜的滅菌或消毒處理。操作時先清除實驗器具上的污物，然后再進行適當(dāng)?shù)臏缇蛳咎幚恚腿肭鍧崊^(qū)域保存。8.工作服可用洗衣機洗滌，干燥30分鐘后，用包裝袋包裝后放入滅菌器內(nèi)。滅菌時間一般為40min(121℃)，干燥30min，放在固定的場所保管。9.其他包括需要消毒滅菌的工作車、拖鞋、筆記用品、門把手等。（1）滅菌工作車一般用高壓蒸汽滅菌，條件121℃20min。拖鞋、筆記用品等一般用環(huán)氧乙烷滅菌。可將環(huán)氧乙烷滅菌器加熱至60℃，滅菌3小時，取出衣服放在規(guī)定的清潔區(qū)域保管。（2）消毒作業(yè)車、拖鞋及門把手用消毒液消毒，將作業(yè)車、拖鞋洗凈后揩干，用70%酒精，或50%異丙醇噴霧，門把手則用揩布蘸取藥劑后擦拭。1.驗收、檢疫區(qū)域此區(qū)域因為經(jīng)常性地搬入物品、動物，如果帶入污染物，那么此區(qū)域極易被污染，因此必須每天進行整理、整頓、消毒。2.SPF動物的飼育區(qū)域3.無菌動物、悉生動物飼育區(qū)域五、SPF級飼育室的消毒

日常操作原則上每天對清潔物品貯藏室、浴室、緩沖間及走廊等進行空氣消毒，定期操作則以周為單位，對屏障內(nèi)所有區(qū)域進行消毒。1.消毒藥的選擇一般選廣譜消毒劑、鹵化物消毒劑(次氯酸鈉、碘伏等)、逆性皂液(界面活性劑)、過氧化物消毒劑(過氧酸)及季胺類(如新潔爾滅)消毒劑等并用。傳遞窗的消毒也可使用酒精、洗必泰、新潔爾滅等。2.日常消毒操作按照進入屏障設(shè)施的要求穿上無菌服進入動物室。手指用以用消毒液浸泡或噴霧后擦干，戴上手套。地板上的污物、墊料、飼料殘渣要清掃干凈。加料、給水作業(yè)結(jié)束后，籠架上的墊料、飼料殘渣用刷子或揩布掃清。籠架擦拭消毒室內(nèi)排氣口的初效過濾器，每周用水清洗一次層流架上的初效過濾器同樣一周清洗一次。使用后的清掃用具，用上述消毒藥消毒后，盡量保持干。SPF飼育區(qū)域內(nèi)的緩沖間、走廊、更衣室打開紫外線燈。使用后的專用滅菌衣，裝入帶蓋的容器內(nèi)收容，洗凈滅菌后待用。3.定期消毒操作（1）籠子、墊料、托盤、飼料盒、飲水瓶等，使用前用高壓滅菌器滅菌，籠子和墊料每周換1次以上，籠蓋、料盒1月?lián)Q一次以上，飲水瓶每周換2次以上，專用容器從傳遞窗、緩沖間搬出后洗凈、滅菌。（2）不能用高壓滅菌器滅菌的架子、飼育裝置，每周1次以上用200x10-6次氯酸鈉液或0.1%逆性皂液或含有效碘1000x10-6的碘伏清拭消毒。（3）SPF飼育區(qū)內(nèi)，盡量少用水，以保持干燥狀態(tài)。同時除去積水，以減少微生物繁殖。（4）傳遞窗、緩沖間內(nèi)部用70%酒精、或者用0.5%逆性皂液噴霧，或用0.5%的過氧乙酸。另外，打開紫外線燈30min后方可打開內(nèi)側(cè)門。（5）動物更換籠子時，用消毒的小鑷子捉取動物，一個籠子內(nèi)動物更換后，小鑷子放在消毒液中浸泡3min以上再可使用。（6）動物尸體應(yīng)放在塑料袋中，封住袋口，塑料袋四周用70%酒精或0.5%洗必泰酒精混合液噴霧消毒。

消毒因子大多對人是有害的，因此,在進行消毒時工作人員一定要有自我保護的意識和采取自我保護的措施，以防止消毒事故的發(fā)生和因消毒操作方法不當(dāng)可能對人體造成的傷害。1.熱力滅菌：干熱滅菌時應(yīng)防止燃燒；壓力蒸汽滅菌應(yīng)防止發(fā)生爆炸事故及可能對操作人員造成的灼傷事故。2.紫外線、微波消毒：應(yīng)避免對人體的直接照射。3.氣體化學(xué)消毒、滅菌劑：應(yīng)防止有毒有害消毒氣體的泄漏，經(jīng)常檢測消毒環(huán)境中該類氣體的濃度,確保在國家規(guī)定的安全范圍之內(nèi)；對環(huán)氧乙烷氣體滅菌劑，還應(yīng)嚴防發(fā)生燃燒和爆炸事故。4.液體化學(xué)消毒、滅菌劑：應(yīng)防止過敏和可能對皮膚、粘膜的損傷。5.處理銳利器械和用具應(yīng)采取有效防護措施，以避免可能對人體的刺、割等傷害。任務(wù)實施

?分組練習(xí)，完成老師要求的考核2.各學(xué)習(xí)小組仔細閱讀消毒滅菌相關(guān)SOP了解消毒滅菌工作的要點，確定實驗動物飼育工作的主要負責(zé)人，制定工作計劃、分配工作任務(wù)。1.教師提出本次任務(wù)的學(xué)習(xí)內(nèi)容和目標(biāo)分組練習(xí)，完成老師要求的考核3.各學(xué)習(xí)小組進入實驗動物設(shè)施后，按照工作計劃和流程，完成高壓滅菌操作，并進入動物房，接收高壓滅菌鍋中的物品，對設(shè)施進行滅菌消毒的工作。4.高壓滅菌操作（在有資質(zhì)人員指導(dǎo)下進行，視情況選擇一種材料進行滅菌操作）。1.消毒時，如何進行自身防護？2.一名同學(xué)在一更和二更換衣后，進入清潔區(qū)域。他匆匆完成換水、添料工作后，發(fā)現(xiàn)有一只死亡小鼠，就裝入垃圾袋中，然后帶著垃圾袋通過污染走廊離開清潔區(qū)域，將垃圾袋扔到外部垃圾箱中。請問，整個過程中他有哪些不符合要求的地方？如何改正？

思考與練習(xí)實驗動物的飼養(yǎng)

實驗動物設(shè)施消毒與滅菌任務(wù)描述知識平臺任務(wù)實施任務(wù)描述

了解實驗動物設(shè)施消毒滅菌的方法，消毒液的配制和使用，并實際在實驗動物設(shè)施內(nèi)進行消毒滅菌工作，填寫相應(yīng)的記錄表。

知識平臺知識平臺一、消毒與滅菌二、實驗動物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法三、飼育器具消毒與滅菌四、各種區(qū)域的消毒與滅菌五、SPF級飼育室的消毒六、消毒工作中的個人防護

消毒是指殺滅或清除傳播媒介上病原微生物,使其達到無害化的處理。

滅菌是指殺滅或清除傳播媒介上一切微生物的處理。（1）低水平消毒法：只能殺滅細菌繁殖體和親脂病毒的化學(xué)消毒劑和通風(fēng)散氣、沖洗等機械除菌法。1.消毒、滅菌因子的基本分類（2）中水平消毒法：是可以殺滅和去除細菌芽孢以外的各種病原微生物的消毒方法。（3）高水平消毒法：可以殺滅一切病原微生物的消毒方法。（4）滅菌法：可殺滅外環(huán)境中除了一些高抗力的細菌芽孢以外的所有微生物的物理、化學(xué)方法。

2.選擇消毒、滅菌方法的原則

選擇消毒方法時需考慮，一是要保護消毒物品不受損壞，二是使消毒方法易于發(fā)揮作用。

應(yīng)遵循以下基本原則：（1）耐高溫、耐濕度的物品和器材，應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌；耐高溫的玻璃器材、油劑類和干粉類等可選用干熱滅菌。學(xué)生主體、教師引導(dǎo)課下教學(xué)

（2）不耐熱、不耐濕，以及貴重物品，可選擇環(huán)氧乙烷或低溫蒸汽甲醛氣體消毒、滅菌。

（3）器械的浸泡滅菌，應(yīng)選擇對金屬基本無腐蝕性的滅菌劑.（4）選擇表面消毒方法，應(yīng)考慮表面性質(zhì)，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距離照射，或液體消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法。

二、實驗動物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法

1.物理消毒法

（1）干熱消毒：包括焚燒、燒灼、干烤等幾種方法。焚燒適用于動物尸體的處理，尤其是帶毒的動物尸體，污染的垃圾、墊料等。（2）濕熱消毒：主要有以下幾種：①煮沸消毒：這種方法簡單易行、經(jīng)濟實用且效果可靠。適用于金屬器械、玻璃制品、棉織品、飲水瓶、飲水及籠具的消毒。

②常壓蒸汽消毒：又稱為流通蒸汽消毒，是指在1atm（1.013×105Pa）下，用100℃的水蒸汽進行消毒。適用于籠具、食物等不耐高熱的物品的消毒。

③高壓蒸汽滅菌：適用于大多數(shù)耐熱物品，包括：金屬器械、籠具、飼具、墊料、飲水瓶、飲水、飼料等物品的消毒。

（3）紫外線輻射消毒：適用于空氣、飲水及污染物體表面的消毒。

（4）電離輻射滅菌：是指用γ射線、X射線和離子輻射照射物品，殺死其中的微生物的冷滅菌方法。常用于對手術(shù)器械、儀器以及食物的消毒滅菌。

（5）過濾除菌：一般用于液體和氣體的消毒，而不用于對物品的滅菌處理。

①液體過濾除菌：用于不耐熱或不能用化學(xué)方法消毒的液體制劑、血清制品等。②空氣過濾除菌：屏障系統(tǒng)（屏障系統(tǒng)的空氣經(jīng)粗、中、高效過濾）、動物運輸盒等。

2.化學(xué)消毒法

常用化學(xué)消毒方法包括：藥物液體浸泡、噴灑消毒，蒸汽或氣體熏蒸消毒。常用的消毒藥品及方法介紹如下：常用的消毒藥品及方法介紹如下：（1）甲醛：常用于液體浸泡消毒和甲醛氣體熏蒸消毒。

①殺菌作用

②殺真菌作用

③滅活病毒

④注意事項：刺激性大，使用時注意防護；在9℃以下保存。

（2）戊二醛：常用濃度為2%，用0.3%碳酸氫鈉或碳酸鈉調(diào)節(jié)其pH值為7.5~8.5時，可達最強殺菌效果。常用于醫(yī)療器械的冷滅菌，內(nèi)窺鏡、生物制品的消毒滅菌，環(huán)境消毒以及水處理的殺菌滅藻。（3）環(huán)氧乙烷：多用于氣體消毒、常用于外科手術(shù)器械等的消毒滅菌；（4）過氧乙酸：稀釋至0.2%時才能用于皮膚粘膜消毒；0.5%溶液浸泡籠具、鼠盒、飲水瓶、工作衣、帽鞋等10~30分鐘；（5）漂白粉類：84消毒類是一種廣譜、高效、去污力強的新型消毒劑，能快速殺滅甲、乙型肝炎病毒、細菌芽孢等各類致病菌。。（6）二氧化氯：穩(wěn)定性二氧化氯是在二氧化氯水溶液中添加碳酸鈉、硼酸鈉等予以穩(wěn)定。通常用檸檬酸活化，在酸性條件下使用。原液用水稀釋20倍可用于籠具、地面消毒。

（7）乙醇：75%乙醇用于皮膚消毒；70~75%乙醇常用于物體表面的消毒，如工作臺面、推車表面等，時間應(yīng)在3min以上。

（8）苯酚：3%~5%的苯酚水溶液浸泡、噴灑或擦拭污染物品表面，作用時間30~60min。（9）煤酚皂溶液：1%~5%煤酚皂水溶液浸泡、噴灑或擦抹污染物表面，作用時間30~60min；1%~2%水溶液用于皮膚消毒，浸泡3~5min；對排泄物消毒用5%~10%的溶液攪拌均勻浸泡。

（10）洗必泰：0.5%洗必泰乙醇溶液用于外科手術(shù)前擦手及手術(shù)前皮膚消毒；0.02%~0.05%濃度的水溶液或醇溶液用于病房物體表面的噴灑、浸泡、擦拭消毒；0.5%的水溶液可用于傷口創(chuàng)面的沖洗消毒及各種外科創(chuàng)面的消毒處理。（11）新潔爾滅：0.02%消毒傷口和粘膜；對污染物品表面的消毒，可用0.1%~0.5%濃度的溶液噴灑、浸泡、