血細胞分析儀應用心得主要內容——理論部分 一、電阻抗型血細胞分析儀（1）電阻抗原理（2）紅細胞與血小板的檢測原理（3）白細胞的檢測原理（4）血紅蛋白的檢測原理（5）基于檢測原理的常見誤差分析二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查（1）改良牛鮑計數板（2）總數的計算（3）性狀描述、定性（4）分類的要點第2頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（1）電阻抗原理電源在電極之間產生微小的電壓細孔部燒杯外部電極血細胞血細胞浮游液內部電極電阻穩(wěn)定電流血細胞檢測原理血細胞通過小孔血細胞大脈沖大用等滲電解質溶液稀釋全血通過小孔感應區(qū)時，電阻增加引起了電壓變化而出現一個脈沖信號細胞體積越大，引起的電壓變化越大，產生的脈沖振幅越高根據脈沖信號的大小測定不同大小的細胞，從而對細胞進行分群第3頁,共25頁，2024年2月25日，星期天要點血細胞是非傳導性細胞通過小孔時會引起電阻的變化脈沖振幅的高低反映了細胞體積的大小脈沖數量反映了細胞數量（1）電阻抗原理RBC：7.2μmPLT：1.5~3μmWBC：6~20μm第4頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（2）紅細胞及其參數的檢測原理·含有白細胞因素，但可忽略。RBC：WBC=750:1MCV：紅細胞平均體積（脈沖平均高度）HCT=RBC×MCVMCH=HGB÷RBCMCHC=HGB÷HCT誤差分析（1）RBC假性增高（2）RBC假性減低第5頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（2）血小板檢測原理（1）血小板與紅細胞在同一通道檢測（2）血小板通常在2~30fl（3）大于右側閾值者考慮為紅細胞

誤差分析（1）PLT↑：紅細胞碎片、小紅細胞等（2）PLT↓：血小板聚集、巨血小板等第6頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（3）白細胞計數及分群的檢測原理WBC計數：電阻抗原理（1）排除RBC影響：溶血劑（2）排除PLT影響：體積差異淋巴細胞群單個核細胞群粒細胞群分群原理：脈沖高低，細胞大小Q：中間細胞群中包括單核細胞，單核細胞的體積不一定小于粒細胞，那為何中間細胞群位于粒細胞群之前？第7頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（4）血紅蛋白檢測原理：分光光度比色法檢測物質為血紅蛋白衍生物（1）氰化血紅蛋白含有氰化物（2）月桂酰硫酸鈉（SLS）血紅蛋白不含氰化物校正儀器時以氰化高鐵法為準最大吸收波長為540nm國際血液標準委員會（ICSH）推薦方法誤差分析：影響檢測光路的因素第8頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.1）紅細胞計數的誤差分析（1）RBC假性增高：WBC極度增高、嚴重貧血、巨大血小板？（2）RBC假性減低：紅細胞凝集（冷凝集、抗凝劑相關性、自身免疫性）冷凝集解離前測定結果冷凝集解離后測定結果冷凝集素綜合征·在31℃以下·自身紅細胞抗原發(fā)生可逆性凝集常見病·白血病、惡性淋巴瘤或全身性紅斑狼瘡·肺炎支原體屬感染·傳染性單核細胞增多癥處理方法·37℃水浴第9頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.2）血小板計數的誤差分析（1）PLT假性增高：紅、白細胞碎片，小紅細胞；冷蛋白血癥處理辦法：鏡檢確認，手工計數；光學法儀器復查。（2）PLT假性減低：血小板凝集（采血，抗凝劑），血小板衛(wèi)星現象，巨大血小板處理辦法：鏡檢確認，手工計數；光學法儀器復查。EDTA依賴性血小板聚集患者，男性，26歲，呼吸內科，發(fā)熱待查PLT9×109/LWBC10.2×109/LRBC4.50×1012/LHGB120.5g/LHCT0.45MCV80flPLT185×109/LWBC9.4×109/L

RBC4.48×1012/LHGB120g/LHCT0.45MCV80fl第10頁,共25頁，2024年2月25日，星期天RBC直方圖現雙群紅細胞PLT直方圖尾部持續(xù)抬高

可見紅細胞大小不等、小紅細胞、紅細胞碎片患者，女性，39歲，血液科，血小板增多查因WBC7.50×109/LRBC4.91×1012/LHGB93.00g/LHCT0.3MCV60.6flRBC-CV0.27PLT726×109/L第11頁,共25頁，2024年2月25日，星期天Q:血常規(guī)初診PLT計數偏低應如何處理？（國際復檢規(guī)則小于100）①查看血樣是否有凝塊有→重抽復查無→②②復查正常→核實，審核不變→③③查看PLT直方圖及提示信息直方圖良好，無提示信息，可考慮結合臨床審核，最好先閱片直方圖尾部抬起，巨血小板、血小板凝塊→④④鏡檢發(fā)現血小板聚集抽血不順引起的聚集→重抽，正常→審核EDTA依賴性的聚集→更換抗凝劑→正常→⑤⑤聯系臨床，了解患者應無牙齦出血、皮下瘀斑、紫癜等出血傾向，囑醫(yī)生告知患者今后血常規(guī)應采用特殊抗凝劑采血。（通常為枸櫞酸鈉）第12頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.3）白細胞計數的誤差分析（1）WBC假性減低：白細胞凝集（少見）（2）WBC假性增高：血小板凝塊、巨大血小板，冷蛋白，紅細胞溶血不良，有核紅細胞

紅細胞溶血不良（1）脂類代謝異常：紅細胞膜表面與脂類結合形成脂質顆粒保護膜（2）紅細胞膜表面結構異常：異常血紅蛋白血癥

常見于（1）肝功能低下（肝硬化、肝癌晚期、膽道阻塞）（2）高脂血癥、高膽固醇制劑輸液治療中（3）異常血紅蛋白癥（Hgb-S癥、Hgb-C癥）處理辦法：人工顯微鏡形態(tài)學鏡檢第13頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

有核紅細胞的干擾外周血中紅細胞的數量是白細胞的三次方數量級大多數NRBC被當作WBC，紅細胞和淋巴細胞峰低谷上升，出現報警提示第14頁,共25頁，2024年2月25日，星期天白細胞計數結果必須按如下公式予以校正上式中，X為未校正前白細胞數，Y為在白細胞分類計數時，計數100個白細胞的同時計數到的有核紅細胞數。——《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版白細胞校正數/L=X×100100+Y第15頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.4）血紅蛋白檢測的誤差分析脂血癥異常血漿蛋白嚴重白細胞增多膽紅素增高體內溶血紅細胞不溶解第16頁,共25頁，2024年2月25日，星期天患者，男，30歲，燒傷整形外科第17頁,共25頁，2024年2月25日，星期天該圖來源于北京協和醫(yī)院張時民教授博客第18頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共25頁，2024年2月25日，星期天患者，男性，30歲，血液內科一病區(qū)，臨床診斷為慢性髓細胞性白血病。急查血常規(guī)：問：為什么HGB與HCT的下降程度不一致？HCT結果為0.31，對應的HGB應在100g/L左右，而該結果HGB僅為49g/L。病例思考題：WBC423.5×109/LRBC1.9×1012/LHGB49.00g/LPLT225×109/LMCV159flHCT0.31第20頁,共25頁，2024年2月25日，星期天自學內容紅細胞計數的臨床意義血小板計數的臨床意義白細胞計數及其分類的臨床意義血紅蛋白檢測的臨床意義其他參數的臨床應用及其意義第21頁,共25頁，2024年2月25日，星期天二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查（1）性狀描述、定性（2）改良牛鮑計數板（3）總數的計算（4）分類的要點第22頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（1）性狀描述、定性試驗性狀·透明度·顏色：無色、紅色、黃色、乳白色、淡綠色、褐黑色等定性試驗腦脊液：潘迪試驗，球蛋白與苯酚結合，形成不溶性蛋白鹽沉淀胸腹水：Rivalta試驗，0.1%乙酸溶液，使酸性黏蛋白形成白色霧狀沉淀混濁、血性標本應離心取上清做定性試驗第23頁,共25頁，2024年2月25日，星期天3mm三等分每個大格面積為1mm2計數池高度為0.1mm容積=1mm2×