河北省石家莊市礦區(qū)中學(xué)2024屆高考全國統(tǒng)考預(yù)測密卷生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)酶和ATP的敘述，正確的是（）A．酶是活細胞產(chǎn)生的并能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)的物質(zhì)B．長時間的高溫、強堿等條件會導(dǎo)致蛋白酶的肽鍵斷裂使其失活C．線粒體合成的ATP可在細胞核中發(fā)揮作用D．細胞質(zhì)中含有DNA聚合酶，該酶是一種調(diào)節(jié)DNA生理活動的信息分子2．圖是某同學(xué)繪制的單克隆抗體制備過程及原理圖，其中抗原決定簇是指抗原表面或內(nèi)部能決定抗原性的基團，骨髓瘤細胞是一種營養(yǎng)缺陷型細胞。有關(guān)敘述錯誤的是（）A．動物免疫的原理是一種抗原誘導(dǎo)形成一種漿細胞B．選用營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞有利于篩選雜交瘤細胞C．細胞融合也可能發(fā)生在不同類型淋巴細胞之間D．a(chǎn)融合雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)的原理是細胞增殖3．圖甲表示某植物光合作用速率與光照強度之間的關(guān)系；圖乙表示某種植物的非綠色器官在不同的氧濃度下，O2吸收量和CO2釋放量之間的關(guān)系。對下列圖示解釋不正確的是（）A．圖甲L點時，葉綠體中ADP從葉綠體基質(zhì)向類囊體薄膜方向移動B．圖乙中由縱軸、CO2釋放量和O2吸收量共同圍成的面積表示無氧呼吸生成的CO2總量C．影響圖甲中曲線上的P點上下移動的主要外界因素是氧氣濃度D．為了有利于貯藏蔬菜和水果，貯藏室內(nèi)的O2濃度應(yīng)調(diào)節(jié)到圖乙中N點對應(yīng)的濃度4．如圖所示為“J”型曲線和“S”型曲線增長的模型。不考慮遷人率和遷出率，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．曲線X代表“J”型曲線，曲線Y代表“S”型曲線B．圖中b點和c點，種群的增長率相同且大于1C．圖中d點，種群的個體數(shù)為K/2，此時種群增長速率最大D．圖中e點，種群的出生率與死亡率基本相等5．人群中A遺傳病和B遺傳病均為單基因遺傳?。ㄒ阎狝、B遺傳病致病基因均不在Y染色體上）。一對表現(xiàn)型正常的夫婦生了一個只患A遺傳病的女兒和一個只患B遺傳病的兒子，已知此家庭中丈夫體內(nèi)不含B遺傳病致病基因。在不考慮突變的情況下，下列敘述錯誤的是（）A．控制A遺傳病和B遺傳病的基因遵循自由組合定律B．A遺傳病在人群中男性和女性患病的概率基本相等C．該對夫婦再生育一個兒子既患A遺傳病又患B遺傳病的概率為1/16D．患B遺傳病兒子的致病基因來自其外祖母或外祖父6．如圖是生態(tài)系統(tǒng)中某兩個營養(yǎng)級（甲、乙）的能量流動示意圖，其中a—e表示能量值。下列相關(guān)敘述不正確的是A．乙可能是次級消費者，第三營養(yǎng)級B．乙糞便中食物殘渣的能量包含在c中C．乙用于生長、發(fā)育及繁殖的能量值可表示為a-b-dD．甲、乙兩營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率可以表示為a/（a+c+e）二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科學(xué)家卡爾文將小球藻裝在一個密閉容器中，通入14C標(biāo)記的14CO2，給予充足的光照，每隔一定時間取樣、分離、鑒定光合產(chǎn)物。實驗結(jié)果：若光照30s后檢測產(chǎn)物，檢測到了多種帶14C標(biāo)記的化合物（C3、C4、C5、C6等）；若將光照時間逐漸縮短至幾分之一秒，90%的放射性出現(xiàn)在一種三碳化合物（C3）中；在5s的光照后，同時檢測到了含有放射性的五碳化合物（C5）和六碳糖（C6）。請根據(jù)材料分析下列問題：（1）卡爾文不斷縮短光照時間，是為了確定___________________，從而推理出CO2中C的轉(zhuǎn)移途徑為___________________________。（2）取樣時，卡爾文和同事每次將小球藻放入熱的乙醇中，從代謝的角度分析，這樣做的目的是____________________，然后用紙層析法分離出各種化合物，這種方法的原理是_____________。8．（10分）下圖是“桑基魚塘”簡化模式圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中屬于生態(tài)系統(tǒng)基石的生物有_______，它們所需的能量最終都來自于_________。（2）蠶糞中碳元素可以以___________形式被魚食用，這是第_________營養(yǎng)級的同化能量流向魚，而魚產(chǎn)生的糞便可以作為肥料經(jīng)過____________________作用后被桑樹利用。（3）從能量流動的角度分析，蠶糞、豬糞等再度被利用，體現(xiàn)了?；~塘能實現(xiàn)能量的多級利用，提高了能量的__________________。該生態(tài)系統(tǒng)中的甘蔗必須在光照時間為11.5h～12.5h時才會開花，這體現(xiàn)了信息傳遞的作用是___________________。（4）科研小組又對蠶的能量流動情況進行分析，結(jié)果如表（數(shù)字為能量值，單位是kJ/（cm2?a））蠶攝入的能量蠶糞便中的能量蠶用于生長發(fā)育和繁殖的能量蠶呼吸作用散失的能量47.825.4？21.2（4）據(jù)表分析，蠶用于生長發(fā)育和繁殖等的能量是_________。9．（10分）抑郁癥是近年來高發(fā)的一種精神疾病。研究表明，抑郁癥與去甲腎上腺素(NE)減少有關(guān)。NE是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，主要由交感節(jié)后神經(jīng)元和腦內(nèi)腎上腺素能神經(jīng)末梢合成和分泌；NE也是一種激素，由腎上腺髓質(zhì)合成和分泌。結(jié)合圖示回答下列相關(guān)問題。（1）NE作為神經(jīng)遞質(zhì)和激素，都是調(diào)節(jié)生命活動的____________，激素調(diào)節(jié)與神經(jīng)調(diào)節(jié)在作用途徑上的區(qū)別是____________。（2）據(jù)圖分析，突觸前神經(jīng)元興奮引起Ca2＋內(nèi)流從而____________(填“促進”或“抑制”)NE的釋放。NE釋放后的去向有____________和被突觸前膜再攝取。當(dāng)NE被突觸前膜攝取后，會抑制突觸前神經(jīng)元釋放NE，該調(diào)節(jié)機制為____________。（3）據(jù)圖分析，雜環(huán)類抗抑郁劑治療抑郁癥的機理是____________。10．（10分）為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。（1）將草甘膦抗性基因作為_____，與Ti質(zhì)粒用相同的_____和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達載體。（2）用_____處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在添加_____的培養(yǎng)基中，經(jīng)篩選1得到含基因表達載體的農(nóng)桿菌。（3）利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物_____（填字母）進行PCR。A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'（4）PCR擴增時需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計_____種引物，其原因是_____。（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否_____。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細胞的_____過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。11．（15分）圖甲是某生態(tài)農(nóng)業(yè)的結(jié)構(gòu)模式圖，圖乙表示某自然生態(tài)系統(tǒng)能量流經(jīng)第一營養(yǎng)級圖的示意圖，其中a~g表示能量值。據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中____和_____（填圖中的名稱）在碳循環(huán)中起關(guān)鍵作用。圖示的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)點是__________________________________________________（寫出兩點）。（2）若圖乙中A表示某食物網(wǎng)中第二營養(yǎng)級所攝入的全部能量，第二營養(yǎng)級與第三營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為________________能量逐級遞減，原因是________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解題分析】

1、ATP是生物體的直接能源物質(zhì)，ATP在細胞內(nèi)數(shù)量并不很多，可以和ADP迅速轉(zhuǎn)化，ATP中的能量可用于各種生命活動，可以轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽?、化學(xué)能等。2、酶是由活細胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機物，絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，極少數(shù)酶是RNA。酶的特性：高效性、專一性和作用條件溫和的特性。酶促反應(yīng)的原理：酶能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能?！绢}目詳解】A、大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，少數(shù)酶是RNA，不能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，A錯誤；B、長時間的高溫、強堿等條件會導(dǎo)致蛋白酶的空間結(jié)構(gòu)改變而失活，B錯誤；C、線粒體合成的ATP可用于多種生命活動，包括在細胞核中發(fā)揮作用，C正確；D、DNA聚合酶具有催化作用而不是調(diào)節(jié)作用，D錯誤。故選C?！绢}目點撥】解答本題需掌握住酶的本質(zhì)和作用及特性、ATP的利用等相關(guān)知識。2、A【解題分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！绢}目詳解】A、據(jù)圖可知，一種抗原上可有多種抗原決定簇，不同的抗原決定簇可誘導(dǎo)不同的漿細胞產(chǎn)生，A錯誤；B、骨髓瘤細胞可以無限增殖，選用營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞可利用其特點篩選雜交瘤細胞，B正確；C、細胞融合的類型有淋巴細胞-淋巴細胞型、淋巴細胞-骨髓瘤型及骨髓瘤-骨髓瘤型多種類型，C正確；D、融合雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)的原理是細胞增殖，可得到大量的同種雜交瘤細胞，D正確。故選A。【題目點撥】解答此題要求考生能夠識記識記單克隆抗體制備的流程以及雜交瘤細胞的特點，并能結(jié)合題圖分析作答。3、C【解題分析】

分析題圖可知：圖甲中，P點只進行呼吸作用，M點為光補償點，L點為光飽和點。圖乙進行細胞呼吸，當(dāng)氧氣濃度為0時進行無氧呼吸，隨著氧氣濃度逐漸增大，無氧呼吸逐漸減弱，有氧呼吸逐漸增大?！绢}目詳解】A、葉綠體進行光合作用時，ADP從葉綠體基質(zhì)向類囊體薄膜方向移動，A正確；B、圖乙中二氧化碳釋放量表示有氧呼吸和無氧呼吸二氧化碳釋放總量，氧氣吸收量等于有氧呼吸二氧化碳釋放量，由縱軸二氧化碳釋放量和氧氣吸收量共同圍成的面積表示無氧呼吸生成的二氧化碳總量，B正確；C、圖甲中P點含義是呼吸作用速率，影響呼吸作用速率的主要外界因素是溫度，C錯誤；D、N點對應(yīng)的細胞呼吸最弱，有利于水果蔬菜的保存，D正確。故選C。4、B【解題分析】

由圖可知，某種群在適宜環(huán)境后，隨著種群數(shù)量的增多，出生率下降，死亡率上升；種群的增長率=出生率-死亡率，“J”型曲線增長率不變，“S”型曲線增長率先增大后減小?！癑”型曲線：指數(shù)增長函數(shù)，描述在食物充足，無限空間，無天敵的理想條件下生物無限增長的情況?！癝”型曲線：是受限制的指數(shù)增長函數(shù)，描述食物、空間都有限，有天敵捕食的真實生物數(shù)量增長情況【題目詳解】A、圖中X是J型曲線，Y是S型曲線，A正確；B、種群增長率=出生率-死亡率，不一定會大于1，B錯誤；C、圖中d點，種群的個體數(shù)為K/2，此時種群增長速率最大，C正確；D、e點種群數(shù)量達到環(huán)境容納量（K值），所以出生率與死亡率基本相等，種群數(shù)量保持相對穩(wěn)定，D正確。故選B?！绢}目點撥】本題考查種群數(shù)量的增長曲線，識記J型曲線和S型曲線出現(xiàn)的前提，理解增長率和增長速率的概念。5、C【解題分析】

判斷遺傳病類型的口訣為“無中生有為隱性，隱性遺傳看女病，女病父正非伴性”，所以可判斷A病為常染色體隱性遺傳。若為隱性遺傳，且親本只有一方攜帶致病基因，可判斷該病為伴X隱性遺傳病?！绢}目詳解】A、因為該對夫婦都正常，但生有一個只患A遺傳病的女兒和一個只患B遺傳病的兒子，所以這兩種遺傳病都是隱性遺傳病，又因為患A遺傳病女兒的父親正常，所以該遺傳病不可能是伴X隱性遺傳病，屬于常染色體隱性遺傳??；又因為該家庭中丈夫不含B遺傳病的致病基因，所以B遺傳病為伴X隱性遺傳病，所以控制兩種遺傳病的基因不在同一對同源染色體上，遵循基因的自由組合定律，A正確；B、由于A遺傳病屬于常染色體隱性遺傳病，所以該遺傳病在人群中男性和女性患病的概率基本相等，B正確；C、該對夫婦是A遺傳病的攜帶者，所以它們再生育孩子患A遺傳病的概率為1/4；該對夫婦的妻子是B遺傳病的攜帶者，丈夫無致病基因，所以再生育一個兒子患B遺傳病的概率是1/2，故這對夫婦生育一個兒子既患A遺傳病又患B遺傳病的概率為1/4×1/2=1/8，C錯誤；D、該家庭中患B遺傳病的兒子的致病基因來自其母親，而他母親的致病基因來自其外祖父或外祖母，D正確。故選C。【題目點撥】本題考查伴性遺傳和自由組合定律應(yīng)用的相關(guān)知識，要求考生識記伴性遺傳的特點；能根據(jù)題干信息繪制遺傳系譜圖并能據(jù)此推斷出相應(yīng)個體的基因型，再進行相關(guān)概率的計算，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。6、C【解題分析】

1、某一營養(yǎng)級的攝入量=糞便量+同化量，其中糞便中的能量是該營養(yǎng)級未同化的能量。2、某一營養(yǎng)級（最高營養(yǎng)級除外）能量的去向：（1）自身呼吸作用消耗；（2）流向下一個營養(yǎng)級；（3）被分解者利用；（4）未被利用。3、能量流動的特點是單向流動，逐級遞減。【題目詳解】A、乙捕食甲，乙可能是次級消費者，第三營養(yǎng)級，A正確；B、乙糞便中食物殘渣的能量沒有被乙同化，還屬于甲進入分解者的能量，即包含在c中，B正確；C、乙用于生長、發(fā)育及繁殖的能量值=乙同化的能量-乙呼吸作用散失的能量，可表示為a-b，C錯誤；D、甲、乙兩營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率=乙同化的能量/甲同化的能量，可以表示為a/（a+c+e），D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、被14C標(biāo)記的化合物出現(xiàn)的先后順序CO2→C3→（CH2O）使酶失活，反應(yīng)停止不同化合物在層析液中的溶解度不同【解題分析】

光合作用包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個階段。光反應(yīng)發(fā)生場所在葉綠體的類囊體薄膜上，色素吸收光照，吸收光能、傳遞光能，并將一部分光能用于水的光解生成[H]和氧氣，另一部分光能用于合成ATP，暗反應(yīng)發(fā)生場所是葉綠體基質(zhì)中，首先發(fā)生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物結(jié)合形成兩分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP被還原?！绢}目詳解】（1）卡爾文用14C標(biāo)記的CO2作為原料，探究暗反應(yīng)的過程，所以不斷縮短光照時間，是為了確定被14C標(biāo)記的化合物出現(xiàn)的先后順序，CO2中C的轉(zhuǎn)移途徑為CO2→C3→（CH2O）。（2）將小球藻放入熱的乙醇中可以使酶失活，反應(yīng)停止；紙層析法分離化合物的原理是不同化合物在層析液中的溶解度不同?！绢}目點撥】解答本題要注意熟記暗反應(yīng)過程中的物質(zhì)變化，理解放射性同位素標(biāo)記法的原理及應(yīng)用，結(jié)合教材實驗識記紙層析法的原理。8、桑樹、甘蔗太陽（能）（含碳）有機物一（微生物的）分解利用效率生物種群的繁衍，離不開信息的傳遞1．2kJ/（cm2?a）【解題分析】

生態(tài)系統(tǒng)中能量流動是單向流動，逐級遞減的。各營養(yǎng)級的同化能量的去向有：呼吸作用消耗，流入下一營養(yǎng)級，流向分解者，未被利用；碳在無機環(huán)境和生物群落之間主要以二氧化碳形式進行循環(huán)的；碳在生物群落中，以含碳有機物形式存在，所以蠶糞中的碳元素只能以含碳有機物形式流向魚。【題目詳解】（1）生態(tài)系統(tǒng)基石是指生態(tài)系統(tǒng)中的生產(chǎn)者，如圖中的桑樹和甘蔗，生產(chǎn)者將太陽能轉(zhuǎn)化為儲存在在有機物中的能量，因此它們所需的能量最終都來自于太陽。（2）碳在生物群落中，以含碳有機物形式存在，蠶糞中碳元素是以含碳有機物的形式被魚食用，蠶的糞便是屬于桑樹固定的能量，是第一營養(yǎng)級的同化能量流向魚，而魚產(chǎn)生的糞便可以作為肥料經(jīng)過腐生微生物分解作用后被桑樹利用。（3）從能量流動的角度分析，蠶糞、豬糞等再度被利用，體現(xiàn)了桑基魚塘能實現(xiàn)能量的多級利用，在固定的能量相同的情況下，提高了能量的利用效率。該生態(tài)系統(tǒng)中的甘蔗必須在光照時間為11.5h～12.5h時才會開花，這體現(xiàn)了信息傳遞的作用是促進生物繁殖后代，說明生物種群的繁衍，離不開信息的傳遞。（4）據(jù)表分析，蠶用于生長發(fā)育和繁殖等的能量=47.8-25.4-21.2=1.2kJ/（cm2?a）?！绢}目點撥】結(jié)合生態(tài)系統(tǒng)的成分、能量流動、物質(zhì)循環(huán)和信息傳遞等知識分析題意。9、信息分子激素調(diào)節(jié)通過體液將激素運輸?shù)桨屑毎?，而神?jīng)調(diào)節(jié)通過反射弧調(diào)節(jié)促進被水解、與突觸后膜上的受體結(jié)合（負）反饋調(diào)節(jié)雜環(huán)類抗抑郁劑抑制NE的再攝取，使突觸間隙中的NE含量升高，從而治療抑郁癥【解題分析】

1、根據(jù)圖分析，神經(jīng)系統(tǒng)可通過突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì)，直接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細胞的活動，還可通過有關(guān)激素間接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細胞的活動，在此過程中信息分子神經(jīng)遞質(zhì)、激素等參與動物細胞間的信息交流。2、突觸遞特征：單向傳導(dǎo)。即只能由一個神經(jīng)元的軸突傳導(dǎo)給另一個神經(jīng)元的細胞體或樹突，而不能向相反的方向傳導(dǎo)，這是因為神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸小體中，只能由突觸前膜釋放，通過突觸間隙，作用于突觸后膜，引起突觸后膜發(fā)生興奮性或抑制性的變化，從而引起下一個神經(jīng)元的興奮或抑制?！绢}目詳解】（1）神經(jīng)遞質(zhì)和激素都是信息分子，激素調(diào)節(jié)的途徑是通過體液將激素運輸?shù)桨屑毎⑴c靶細胞結(jié)合發(fā)揮作用，而神經(jīng)調(diào)節(jié)的途徑是反射弧。（2）從圖示分析，突觸前神經(jīng)元興奮引起內(nèi)流，激活突觸小泡上的受體，使突觸小泡與突觸前膜融合，從而促進釋放NE。突觸前膜釋放的NE的去向：被水解、與突觸后膜上的受體結(jié)合和被突觸前膜再攝取。NE釋放后被突觸前膜回收，會抑制NE的釋放，該調(diào)節(jié)方式為負反饋調(diào)節(jié)。（3）抑郁癥與NE減少有關(guān)，雜環(huán)類抗抑郁劑能抑制突觸前膜對NE的再攝取，同時解除了NE對突觸前膜釋放NE的抑制作用，使突觸間隙中的NE含量升高，從而治療抑郁癥?！绢}目點撥】本題需要考生充分理解興奮在神經(jīng)元之間的傳遞過程，結(jié)合圖解分析出抑郁癥的致病機理。10、目的基因限制性核酸內(nèi)切酶CaCl2潮霉素BD2保證基因的兩條反向平行的鏈都做模板，且其上堿基序列不同表達再分化【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【題目詳解】（1）用相同的限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒后露出相同的黏性末端再用DNA連接酶連接，從而構(gòu)建基因表達載體，題中以草甘膦抗性基因作為目的基因。（2）依據(jù)圖中信息，農(nóng)桿菌用CaCl2處理后變成感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在含有標(biāo)記基因表達的潮霉素培養(yǎng)基中篩選，從而獲得含目的基因表達載體的農(nóng)桿菌。（3）根據(jù)已知草甘膦抗性基因的部分序列以及雙鏈DNA分子的結(jié)構(gòu)特點（反向平行），再結(jié)合DNA復(fù)制（PCR中）的特點，即子鏈合成的方向是從5’到3’，應(yīng)選擇引物B、D進行PCR擴增。（4）為使基因的兩條反向平行的鏈都做模板，而且其堿基序列不同，所以，PCR擴增時需要根