飼養(yǎng)樹79月齡的解剖學特性

解剖數據作為實驗動物的主要生物學特征，是直接描述動物綜合征的主要數據組。靈長類近親樹鼩(treeshrew,Tupaiabelangeri)為單系起源的攀鼩目(Pengetal,1991;Nieetal,2008;Dongetal,2012;Xuetal,2013)，由于其特殊的生物學特性，已被廣泛應用于醫(yī)學和生物學研究，WHO也曾建議用樹鼩代替瀕危的非人靈長類動物進行科學實驗(Pengetal,1991)。近年來，樹鼩實驗室規(guī)模化馴養(yǎng)繁殖的成功(Jiangetal,2011;Jiaoetal,2009;Shenetal,2011)加快了其實驗動物化的進程。本研究對實驗室馴養(yǎng)樹鼩的解剖學數據進行了全面測定與分析，為樹鼩實驗動物化提供基礎數據。1材料和方法1.1實驗動物及設備實驗室馴養(yǎng)7～9月齡樹鼩70只，雌、雄各半，由昆明醫(yī)科大學實驗動物學部提供。實驗動物使用符合國家和學校動物倫理委員會規(guī)定并遵守國際慣例。1.2文化特性測試解剖前，動物禁食不禁水12h，稱重(體重計購自上海精密科學儀器有限公司，YP2001N)后，腹腔注射戊巴比妥鈉鹽35mg/kg(北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司，批號：20120812)，麻醉后心臟采血、處死。實驗參照《嚙齒類實驗動物生物學特性數據測定技術規(guī)程》(Heetal,2006)相關要求進行。獲取體尺(軟尺測量)及骨骼等解剖數據后依次采集腹腔、胸腔及腦等器官。采集臟器時需將周圍脂肪及結締組織除盡，濾紙吸干表面的血液和體液，腔性器官需在去除腔內液體和內容物后迅速稱重(梅特勒—托利多AL204-IC電子天平)。臟器系數=臟器重量/體重×100%。剖取從胃幽門處至肛門處的所有腸段，置于盛有生理鹽水的平皿中并在硫酸紙上展開，分別測量十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結腸及直腸等的長度。多個腸道需同時測量并由一人操作整個過程，避免由人為過度展開或展開不充分而造成測量數據不準確。1.3統(tǒng)計方法采用SPSS11.5軟件包進行分析。正態(tài)計量資料采用t-test，非正態(tài)用秩和檢驗。2結果2.1尾/體質量及/體大小樹鼩有7個頸椎、13個胸椎、6個腰椎、3個骶椎、24～27個尾椎及6個乳頭。雌、雄個體體長、尾長、尾/體比、胸寬、左后肢長以及盲腸和直腸長無顯著性差異(P>0.05)；體高、右耳寬、回腸及結腸長差異顯著(P<0.05)；體斜長、胸深、軀干長、左前肢長、右前肢長、右后肢長、左耳長、右耳長、左耳寬、龍骨長、左脛長、右脛長、十二指腸及空腸長等差異極顯著(P<0.01)(表1，圖1)。2.2體尺指標分析部分樹鼩體尺數據的相關分析見表2。以體長為因變量，部分體尺指標(尾長、軀干長、左前肢長、右前肢長、左后肢長及右后肢長等)為自變量，作逐步回歸分析，回歸方程為：體長=13.90+尾長×0.16。2.3馬、左頜下腺及左腎重量比較7～9月齡樹鼩雌、雄個體體重差異極顯著(P<0.01)；心、肺、膀胱及右海馬重量及系數差異極顯著(P<0.01)；右腎、左海馬、左頜下腺、左右甲狀腺重量差異極顯著(P<0.01)，系數差異顯著(P<0.05)；小腸及左腎上腺重量差異顯著(P<0.05)，系數差異極顯著(P<0.01)；脾及左腎重量差異極顯著(P<0.01)，但系數無差異；右頜下腺重量差異顯著(P<0.05)，但系數無差異；胃、大腸及腦重量無差異，系數差異極顯著(P<0.01)；右腎上腺重量無差異，系數差異顯著(P<0.05)。2.4主要臟器指標自變量的回歸分析樹鼩主要臟器測定數據的相關分析見表4。以體重為因變量，主要臟器指標(心、肺、肝、脾、左右腎及腦等)為自變量，作逐步回歸分析，回歸方程為：體重=62.73+左腎×79.21+心臟×24.09。3樹臟器重量的兩性差異解剖數據是藥物安全性評價實驗及病原微生物感染的檢測指標，可以客觀反映實驗動物生長發(fā)育程度、病變程度和功能狀態(tài)等(Sunetal,2009)，對其種屬標準化鑒定亦有一定意義(Yeetal,2011)。本研究豐富了中緬樹鼩的解剖數據，為其實驗動物化提供基礎數據。結果顯示7～9月齡樹鼩的絕大部分體尺、臟器及系數指標因性別不同而存在顯著或極顯著性差異，與Yeetal(2011)報道的野生成年樹鼩結果基本一致。因此，若無特殊情況，在實驗中應選擇雌、雄個體各半，并分別對其進行統(tǒng)計分析和比較，研究結果與Pengetal(1991)報道的解剖數據比較，絕大部分相近（如體長、尾長、耳長、脾臟重、腎臟重、腦重、腎上腺重、卵巢重及睪丸臟器系數等）。差異較大的是腦垂體重量，由于腦垂體體積較小，故該差異可能是由稱量儀器與取材不同所導致。小型哺乳動物的消化道長度和重量與其食性和食物質量密切相關(Grossetal,1985;Korn,1992;Derting&Bogue,1993)。小腸是食物消化和營養(yǎng)吸收的主要部位，在能量消耗增加或食物質量降低時，樹鼩小腸長度及重量的增加可獲得更多的能量以滿足生存需要(Caietal,2010)。本研究結果顯示雌、雄個體的小腸各腸段均存在差異(P<0.05)，雌性小腸重量顯著高于雄性(P<0.05)。因此，在實驗室條件下，雌、雄個體對食物的消化和吸收能力是否存在差異仍有待進一步研究。本研究結果顯示雌、雄個體腦重量差異不顯著(P>0.05)，系數差異顯著(P<0.05)，體重差異極顯著(P<0.01)，與Yeetal(2011)的結果相反，這可能與個體發(fā)育階段及生活環(huán)境相關。野生樹鼩的確切年齡較難掌握，且其機體受季節(jié)及營養(yǎng)狀況的影響較大(Cao,1989;Jiaoetal,2011;Lietal,1994;Lietal,2011)。實驗動物隨年齡的增長，其腦、心、肺、脾及腎等主要臟器系數都呈下降趨勢(Sunetal,2009)。提示若能開展多年齡段或采用動態(tài)觀測方法檢測樹鼩臟器重量及生長發(fā)育情況，將更有助于建立其基礎生物學數據。在臟器及其系數的測定分析中，與國內近年較少的研究結果相比(Heetal,2008;Yeetal,2011)，個體心臟、肝臟、肺臟、胰腺、腦及腸等均存在差異。其中，雌、雄個體心臟重量與系數差異極顯著(P<0.01)，這與野生成年個體情況一致(Yeetal,2011)，但重量較輕，而肝臟重量小，胰腺重量大，且其重量與系數差異均不顯著(P>0.05)。以上結果的差異可能由多方面原因導致：(1)研究對象、飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)條件等客觀條件不同，本研究采用7～9月齡樹鼩，與前期工作選用個體的年齡存在差異，且所選樹鼩主要在實驗室條件下以顆粒飼料喂養(yǎng)，與前期馴養(yǎng)及野外條件存在根本的不同；(2)個體的處死及測定方法不同，動物致死時，心臟及肝臟等器官內血液的充盈程度將直接影響其重量，因此，采集內臟器官應在采血后，且不同的采血部位也會影響臟器重量，本研究麻醉后心臟采血5～8mL的致死方法可能也是導致差異的原因之一；(3)結締組織及血管等分離情況不同；(4)研究對象不同的生長發(fā)育階段導致能量代謝及積蓄不同；(5)樣本量不同，Yeetal(2011)使用雄性25只，雌