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文檔簡介

生化制藥工藝項目三酶工程制藥目錄酶的性質概述01酶分子的修飾02固定化酶及其應用0302酶分子的修飾Part2酶分子的修飾一、酶分子修飾的必要性和可行性1、酶分子修飾的概念采用各種方法使酶分子結構發生改變，從而改變酶的某些特性和功能的過程2、為什么要對酶分子修飾—天然酶修飾的必要性→提高應用范圍穩定性差：對熱、酸堿、有機溶劑不穩定半衰期短活性不高：對于工業化應用來說一般不高抗原性：醫用時3、酶分子修飾的可行性結構→功能，結構改變→功能改變Part2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法1、金屬離子置換法對于輔助因子是金屬離子的酶，可通過改變酶分子中所含的金屬離子的種類，使酶的特性和功能發生改變Part2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法2、大分子結合修飾法水溶性大分子與酶結合，使酶的空間結構發生變化，從而改變酶的特性和功能常用的水溶性大分子：右旋糖苷、PEG、肝素、蔗糖聚合物大分子結合后酶的特性：酶活力提高：空間結構改變，形成更準確的催化部位穩定性增強：在酶周圍形成保護層，穩定酶構象降低或消除抗原性

案例討論：SOD

t1/2

普通SOD 6min

右旋糖苷SOD 7h

高分子聚會蔗糖 24h

PEGSOD 35hPart2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法3、肽鏈的有限水解法水解可能出現三種結果破壞酶的活性部---酶失活 ×保持活性部位結構基本完整---酶活力保持或損失不大 √肽鏈部分水解后，更有利于底物結合，形成準確的催化部位---活力提高 √√使用專一性較強的蛋白酶做修飾劑，有利于準確切割

案例分析：胰蛋白酶原→胰蛋白酶→活力提高Part2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法4、酶蛋白側鏈基團修飾采用小分子物質修飾側鏈基團，不同的側鏈基團采用不同的修飾劑-NH2修飾-COOH修飾-胍基修飾-SH修飾-酚基修飾-分子內交聯Part2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法5、物理修飾通過各種物理方法，使酶分子的空間構象發生改變，從而改變酶的特性和功能組成與基因不變，只改變次級鍵方法：處理酶→變性→復性Part2酶分子的修飾二、酶分子修飾的主要方法6、氨基酸置換---蛋白質工程通過改造與蛋白質相對應的基因中的堿基類型或排列順序，或設計合成新的基因，并將其克隆至寄主細胞中，通過基因表達而獲得具有新的特性的蛋白質主要步驟：設計蛋白質結構確定突變基因的核苷酸序列獲得突變基因產生新蛋白質Part2酶分子的修飾三、酶分子修飾的應用1、生物技術領域應用改變最適pH值改變底物專一性提高活力

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