碘量法測定蔬菜中維生素c含量

維生素c被稱為維生素c，具有預防和治療傷口疾病的功能，也被稱為抗傷口酸。是含有6個碳原子的酸性多羥基化合物。分子中第2及第3位碳原子上的2個烯醇式羥基極易釋放出H+,具有很強的還原性。在氧化劑存在時,抗壞血酸可脫氫形成脫氫抗壞血酸,反應可逆,脫氫抗壞血酸具有和維生素C相同的生理活性。脫氫抗壞血酸繼續被氧化生成2,3-二酮古洛糖酸完全失去生理活性,反應不可逆。維生素C具有多種生理功能,如能保持巰基酶的活性和谷胱甘肽的還原狀態,起解毒等作用;可促進膠原蛋白的形成,膠原蛋白可包圍癌細胞,從而表現出抗癌作用;促進人體內抗體的生成,增加免疫力;可將膽固醇轉化為膽汁酸,使高膽固醇血癥患者的膽固醇下降;維生素C在對抗消化性潰瘍、協助戒煙、降低血鉛水平、預防或減輕疾病及預防女性膽結石等方面也具有重要功效;在生理條件下,維生素C參與了機體內正常代謝而產生的自由基的泯滅。維生素C也是畜禽日糧中不可缺少的重要的維生素之一,并且在生產實踐中也有應用。維生素C易被光及空氣氧化,微量金屬離子(銅、鐵等)可加速其氧化,實驗操作要迅速。維生素C在酸性溶液中比在堿性溶液中穩定,實驗在酸性條件下進行。維生素C廣泛分布于動物界和植物界,僅幾種脊椎動物(人類和其他靈長類、豚鼠、一些鳥類和某些魚類)不能合成,這些動物體的肝臟中缺乏L-古洛糖酸-γ-內酯氧化酶。所有綠色植物都能合成維生素C,新鮮水果和蔬菜中含量豐富,是重要的維生素C源。測定蔬菜中維生素C含量的常用方法有2,6-二氯酚靛酚法、碘量法、2,4-二硝基苯肼法、分光光度法、間接光度法、熒光分析法、紫外光度法、光電比濁法、高效液相色譜法等。這些方法各有特點,依據不同的實驗材料和要求選擇不同的測定方法。1材料和方法1.1維生素c試驗材料:邢臺市產的黃瓜(Cucumber);白蘿卜(Bailuobu);冬瓜(Fatmelon)和土豆(Solanumtuberosum)。試劑:1%草酸溶液;維生素C標準溶液(濃度為1mg/mL,即CVC=0.00568mol/L);1%淀粉溶液;0.01055762mol/L碘標準溶液(I2見光易分解或配置碘溶液時未能將其完全溶解都會使碘溶液的濃度發生變化,所以在每次滴定樣品之前,都應先用標準維生素C溶液重新標定碘溶液的濃度)。1.2主體材料的滴定碘量法。原理:維生素C是強還原性物質,其分子中的二烯醇基可被I2氧化成二酮基。利用其還原性,以I2做氧化劑,用淀粉作指示劑,采用I2作標準溶液進行滴定。其滴定原理:當維生素C被I2完全氧化后,則碘與淀粉指示劑作用,使溶液變藍,當滴定到溶液出現藍色且15s內不褪色為終點。2結果與分析2.1u3000i2溶液體積測定分別準確吸取抗壞血酸標準溶液(1mg/mL)5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100mL,稀釋至100mL,各取10mL,加入1%草酸溶液20mL和1%淀粉溶液1mL,用已標定的I2溶液進行滴定,記錄所消耗的I2溶液的體積,滴定3次,取平均值,并扣去空白值(表1)。根據維生素C標準溶液濃度與所消耗的碘溶液的體積線性回歸(圖1)。線性回歸方程得y=1.0181x-0.0693,R2=0.9986(n=11),結果表明,用碘量法測定維生素C的含量在5~100mg的范圍內呈良好的線性關系,符合線性回歸方程。2.2抽濾單元的制備將新鮮的樣品洗凈、瀝干,準確稱取可食用部分10g于研缽中,加入1%的草酸溶液10mL,充分研磨成糊狀,確保維生素C最大程度的溶于提取液中,然后轉入抽濾裝置中抽濾,用1%草酸溶液沖洗研缽并轉入抽濾裝置中。并將抽濾瓶用1%草酸沖洗。2次沖洗共用草酸40mL。每種樣品做3份濾液。有色樣品提取液的顏色影響滴定終點的觀察,可用活性炭或白陶土脫色。如果提取物泡沫較多,可加數滴丁醇。2.3維生素c含量取1份濾液,加入1%淀粉溶液1mL,用已標定的碘溶液進行滴定,記錄所消耗的碘溶液的體積V,并扣除空白值。每份樣品重復上述操作。根據下列公式計算維生素C的含量,100g樣品中維生素C的毫克數(R),見表2。式中,Mvc=176.13;V=消耗I2的體積;標準碘溶液濃度(C12)=0.01055762mol/L。由表2看出,4種蔬菜中白蘿卜中維生素C含量最豐富,冬瓜中維生素C含量較多,黃瓜中維生素C含量的最少。2.4維生素c回收率測定方法精確稱取10g已知含量的樣品3份,用研缽充分研碎成糊狀,加入1%草酸溶液10mL,然后轉入抽濾裝置中抽濾,用1%草酸沖洗研缽,轉入錐形瓶內,抽濾瓶也用1%草酸沖洗。兩次沖洗共用草酸40mL。每種樣品重復上述過程3次,每種樣品得3份濾液。每份加入10mL維生素C標準液,即含10mg維生素C,測定所消耗的已標定的I2的體積,計算維生素C的回收率,見表3及表4。式中,A:加入純維生素C后測得的總量;B:樣品中所含維生素C的量;C:加入純維生素C的量。由表4可以看出,平均回收率為104.5%,說明碘量法測得維生素C含量具有較高的準確性。3維生素c含量碘量法對4種蔬菜維生素C含量進行測定,4種蔬菜中,白蘿卜中維生素C含量最高,為22.50mg/100g,黃瓜中最低為10.60mg/100g。同時采用2,6-二氯酚靛酚法對4種蔬菜中維生素C含量進行了測定,結果為:黃瓜10.04mg/100g,白蘿卜21.62mg/100g,冬瓜14.84mg/100g,土豆11.86mg/100g。兩種方法測定的結果接近。了解4種蔬菜維生素C含量,對日常膳食獲取維生素C提供理論依據。植物體內的維生素C往