乙肝病毒檢測

——方法學評價

乙肝病毒結構（一）乙型肝炎病毒結構特點HBsAg：是HBV感染的主要標志HBsAb：保護性抗體HBcAg：僅存于感染的肝細胞核內，一般不存在于血循環中HBcAb:非保護性抗體，HBcAb-IgM提示HBV處于復制狀態HBeAg：HBV復制及強感染性的指標HBeAb：有一定的保護作用，預后良好患者血清中存在三種基本形態大球型顆粒，又稱Dane顆粒；小球型顆粒；管型顆粒小球型顆粒；管型顆粒管型顆粒乙型肝炎病毒的實驗室診斷（一）血清學檢查（二）生化學檢查（三）HBVDNA、基因型和變異檢查

血清學檢查項目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBcIgM方法ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay，最常用，定性)HBsAg–感染的標志Anti-HBs–既往感染/接種疫苗Anti-HBcIgM–急性感染標志Anti-HBcIgG–既往或慢性感染HBeAg–急性病毒復制，有傳染性

Anti-HBe–病毒不再復制HBV-DNA–急性病毒復制，比HBeAg更準確；主要用于監測治療反應HBV血清學標志物的臨床意義感染模式HBsAgHBeAgHBc(IgM)抗HBc(IgG)抗HBe抗HBs臨床意義1+-----急性乙肝潛伏期后期，攜帶者。2++----急性乙肝早期或潛伏期3+++---急性乙肝早期4++-++--急性乙肝后期5++-+----急性或慢性乙肝，有HBV復制6+++-+-+-急性或慢性乙肝。急性期或無癥狀攜帶者7+-+-++-陰性慢性乙肝8+---+-慢性乙肝，無或低度HBV復制，乙肝恢復期，既往感染，隱匿性9---+-+乙肝恢復期，既往感染，隱匿性10-----+慢性乙肝，接種過乙肝疫苗。兩對半的意義—乙型肝炎的診斷—判斷傳染性—判斷預后—篩查獻血員—流行病學調查乙肝三系定性檢查是用來判斷是否感染乙肝或粗略估計病毒復制水平的初步檢查，對患者病情程度的評估參考性不大，所以乙肝患者在做乙肝三系定性檢查的時候，應結合肝功能檢查、乙肝病毒DNA檢查、B超檢查等來判定病情的輕重，ELISA檢測靈敏低的原因及局限ELISA法受其自身敏感性和特異性的限制;HBVS和前C基因區出現位點突變導致HBsAg和HBeAg表達缺陷。影響因素多,如加樣時間,試劑平衡時間,樣本溶血程度等等。特別是低濃度樣本易導致假陰性結果,使弱陽性樣本漏檢。急性感染的窗口期;HBsAg檢測方法靈敏度不足;血清亞型的漏檢等。標本中病毒顆粒少;血清學檢測的局限性HBV具有“檢測窗口期假陰性結果無法檢測突變株及抗體乙肝病毒的定量檢測1、乙肝表面抗原（HBsAg）定量檢測：1）參考值：0-0.05IU/mL2）臨床意義：（1）可作為HBV攜帶者乙肝病毒復制的參考指標（2）評價拉美呋定的治療效果（3）監測應用alpha-干擾素治療病人的乙肝病毒復制（4）確定肝移植病人免疫球蛋白的使用劑量2.乙肝表面抗體（抗-HBs）定量測定：

是HBsAg刺激機體產生的特異性抗體，是一種保護性抗體，能中和HBV。（1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保護性，需要注射乙肝疫苗（3針：0-1-6方案）。（2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保護性，但較弱，需要乙肝疫苗強化注射（1針）。（3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很強的保護性，不需要注射乙肝疫苗。3、乙肝病毒e抗原（HBeAg）HBeAg增高說明病毒復制，具有很強的傳染性。4、乙肝病毒e抗體（抗-HBe）抗-HBe陽性說明病毒復制減少，傳染性弱，但并非沒有傳染性。抗HBe不是保護性抗體。5、乙肝病毒核心抗體（抗-HBc）抗-HBc：不是中和抗體，有IgG和IgM兩種形式。IgM在早期出現，而IgG在恢復期出現，可持續多年或終身存在。乙肝五項定量檢測的優點由于乙肝病毒容易發生變異，再加上乙肝定性檢測方法的局限性，會出現假陰性結果，導致不能及時發現乙肝的感染，也就不能得到及時的治療，對醫護人員和其他患者也存在著被感染的威脅。乙肝五項定量應用目前最先進的化學發光法檢測，避免了假陰性和漏檢的問題，而且準確，尤其對乙肝病人的療效觀察提供了依據，這是檢驗發展的趨勢。兩對半定量檢測極大地提高了檢測的靈敏度，LiCa技術檢測HBsAg靈敏度可達0．5ng/ml，而ELISA檢測HBsAg達到2ng/ml時才會陽性。急性乙肝早期定量能及早檢出HBsAg，確證HBV感染，幾乎能與PreSi同時檢測，在病程觀察中大大縮短了“窗口期”，而酶標檢測在乙肝早期往往HBsAg呈陰性。慢性乙肝一些患者由于機體常缺乏對HBV包膜蛋白的免疫應答，HBsAg表達較低，酶標檢測可出現HBsAg和HBsAb均陰性的情況，而定量檢測則可避免這些情況的出現，為正確判斷病情提供依據。靈敏度如病毒發生變異后，表達量較低，常規ELISA測不出抗原，而定量檢測具有極高的靈敏度，可發現極有可能同時檢測出HBsAg和HBsAb，血清中HBsAg含量與病人對HBsAg細胞免疫成反比關系，而肝功能改變則與此種細胞免疫成正比。定量HBsAg是反映這一關系的唯一手段。可發現低濃度的HBsAg攜帶者，特別是一些群體如醫務工作者及病人家屬等。定量檢測意義監測疾病發展評估藥物療效指導疫苗接種國內疫苗評價標準無應答者:無抗體產生(5%)----加強計量復種低應答者:<10IU/L(10%)----加強計量復種中應答者:10-100IU/L(65%)----無須復種高應答者:>100IU/L(20%)----無須復種PCR技術在乙肝方面的應用乙型肝炎病毒屬嗜肝DNA病毒科（hepad