elisa法檢測hiv抗體的應用

為了提高血質，有效預防和控制hiv感染和傳播，需要加強對hiv抗體的檢測和管理。酶聯免疫吸附測定法（ELISA）法靈敏度高，特異性強，是一種較為常用的檢測HIV抗體的方法。但在具體的檢測過程中，會受到諸多因素的影響。本研究中，筆者利用ELISA法檢測76450例一般住院患者HIV抗體，探討ELISA法在HIV抗體檢測中的應用及檢測影響因素。現將研究結果進行如下報告。1材料和方法1.1般住院患者采血2010年5月～2012年5月，76450例一般住院患者，其中男38230例，女38220例，年齡18～49歲。對這76450例一般住院患者進行常規檢查和抽血，抽血的過程中要嚴格按照安全防護制度和臨床采血技術規范，以及科華HIV試劑盒的說明書具體要求進行采集。抽取所有一般住院患者的靜脈血3～5mL。1.2試劑檢測前檢查利用酶聯免疫吸附試驗法（ELISA）進行檢測，檢測前，要注意檢查試劑的批和評估以及有效期。用到的儀器為山東艾德康400型全自動酶免分析儀。1.3hiv抗體陰性檢測標本如不能立即測定，5d內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應低溫凍存。檢測過程嚴格按照試劑說明書的具體內容和檢測規程進行操作，并注意防止出現交叉污染。多次檢測，并對檢測結果進行處理，建立質控圖。如果經檢測為陰性，則出具HIV抗體陰性報告。陽性者送至省疾控中心，利用免疫印跡法（WB）進行進一步確認。同時還要注意做好檢測后的咨詢和保密工作。1.4統計處理研究所得數據均輸入Excel表格，并利用SPSS15.0統計軟件對研究所得數據進行統一的錄入和分析。2hiv抗體體構建共檢測76450例一般住院患者HIV抗體，其中確認為陽性的一共有8例，陽性率為0.01%。在8例HIV抗體體感染者中，5例為男性，3例為女性，年齡21～44。不同年齡段具體感染情況如表1所示：3討論3.1來的試劑分析方法ELISA法即為酶聯免疫吸附測定法是一種從免疫酶技術發展而來的特殊的試劑分析方法，檢測過程中，在加入特殊的酶底物之后，在酶的催化或水解作用之下，原本無色的底物便會呈現出顏色。于是，依靠肉眼或者分光光度計，便可以觀察到具體的檢測結果。3.2esa法確定了監測趨勢的重要因素3.2.1試劑質量3.2.2抗凝劑的使用對于待檢的血液標本，要先自然存放1～2h，使其充分凝固后，予以離心。如果標本為血漿，還要使用適量的抗凝劑。如果暫時不接受檢測，還要注意妥善的存放標本，要將標本置于2-8℃的冰箱中，如果需要貯存，則溫度要保持在-20℃。3.2.3溫度對檢測結果的影響溫育對ELISA檢測過程的影響較大。在檢測過程中，抗原和抗體的結合，以及各種酶促反應都需要在特定的溫度條件下進行。所以，檢測過程中細微的溫度變化極有可能會影響檢測結果。例如，酶標板周圍的升降溫速率如果和內部孔不一致，則會造成周邊與內部孔最終檢測結果的不一致。因此，檢測過程要嚴格控制室內溫度（25℃左右）并關閉儀器倉門，減少環境溫度對溫育溫度的影響。3.2.4間延長對檢測的影響檢測過程中，洗板不暢或者洗板等待時間過長等都會對檢測造成影響。因此，在具體的檢測過程開始之前一定要檢測洗板機是否有堵塞，保證洗板機管路暢通！3.2.5檢測試劑的選擇顯色時間會對檢測結果的高低造成影響。因此，在檢測中，不能使用放置過久或者過期的顯色劑。綜上所述，在利用ELISA法對HIV抗體進行檢測的過程中，要積極地分析研究可能會對ELISA法檢測HIV抗體的相關影響因素，選用優質的試劑，并保證檢測