骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死的研究浙江大學附屬第二醫(yī)院王建安骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死的研究浙江大學附屬1Masson三色染色400×400×心梗組大鼠MSC組Masson三色染色400×400×心梗組大鼠MSC組2膠原含量（％）*Masson三色染色膠原含量（％）*Masson三色染色3血管密度***個/0.2mm2P<0.05血管密度***個/0.2mm2P<0.054結論對照組與細胞移植組相比，心臟重量指數(shù)減少，移植組長徑增長，短軸周長縮短，周長與長徑比值減少，梗死區(qū)增厚，重構改善，心功能提高。移植組膠原形成減少，血管密度上調。干細胞可能是通過心肌再生、血管再生、抑制基質膠原合成和分泌細胞因子來改善心功能

結論對照組與細胞移植組相比，心臟重量指數(shù)減少，移植組長徑增長5骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死基礎研究臨床研究骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死6細胞移植途徑細胞移植途徑7臨床試驗已完成的9項臨床研究除1項外，都取得了陽性結果TOPCAREAMI試驗（冠脈內注射CPC和BMC）59例AMI患者隨機分組:CPC組(n=30)和BMC組(n=29)心梗后4.9±1.5天將細胞注射到梗死相關動脈4個月后LVEF增加8%，LVESV降低10ml(18.5%),兩組間無顯著性差異。1年后隨訪，MRI提示LVEF↑，梗死面積↓SchachingerV.JAmCollCardio,2004;44(8):1690–9臨床試驗已完成的9項臨床研究除1項外，都取得了陽性結果Sch8BOOST試驗(骨髓細胞經(jīng)冠脈)心梗后經(jīng)冠脈移植自體骨髓細胞的隨機對照研究入選對象：60例急性STEMI患者(5天內)成功行PCI后,隨機分為細胞組和對照組各30例細胞移植時間：PCI后4.8±1.3天主要終點：6月后的LVEF改變（MRI檢查）細胞移植并不增加負性臨床事件支架內再狹窄促心律失常WollertKC.Lancet.2004;364:141–148BOOST試驗(骨髓細胞經(jīng)冠脈)心梗后經(jīng)冠脈移植自體骨髓細胞9結果結果10骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死的研究課件311骨髓細胞（心外膜注射）Stamm等選擇6例有心肌梗死病史患者在搭橋手術時將1.5×106自體骨髓AC133+細胞注射入梗死邊緣區(qū)心肌隨訪3-9月所有患者存活良好4例左室功能增強5例梗死區(qū)組織灌注明顯改善StammC.Lancet

2003;361:45–46骨髓細胞（心外膜注射）Stamm等選擇6例有心肌梗死病史患者12骨髓細胞（心內膜注射）Perin等評價了用NOGA系統(tǒng)經(jīng)皮心內膜心肌內注射自體骨髓單核細胞治療缺血性心肌病患者前瞻性、非隨機開放設計共21例終末期缺血性心肌病患者入選前14例為治療組后7例為對照組基線評估：運動試驗和24小時動態(tài)心電圖二維多普勒超聲心動圖SPECT灌注掃描電機械標測確定存活心肌（單極電壓≥6.9mV）后注射細胞PerinEC.Circulation2004;110(suppl1):II213-II218骨髓細胞（心內膜注射）Perin等評價了用NOGA系統(tǒng)經(jīng)皮心132月后隨訪2月后隨訪144月后隨訪4月后隨訪15MAGIC試驗目的：評價G-CSF自身動員和經(jīng)冠脈移植外周血干細胞治療心肌梗死的可行性及效果27例PCI術后的MI患者隨機分為三組細胞移植組(n=10)單獨G-CSF組(n=10)對照組(n=7）6月后評價左室收縮功能和灌注KangHJ.Lancet2004;363:751–756MAGIC試驗目的：評價G-CSF自身動員和經(jīng)冠脈移植外周血16結果：G-CSF+PBSCs組移植改善運動耐量、心肌灌注和收縮功能結果：G-CSF+PBSCs組移植改善運動耐量、心肌灌注和收17骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療效研究

骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療效18

骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療效研究入選標準：①年齡≤70歲②近期心肌梗死病史（1-6月）③經(jīng)皮冠脈成形術后1月以上④心超提示梗死相關動脈節(jié)段性運動異常,LVEF≤40%；⑤注射細胞時冠脈造影提示梗死相關動脈TIMI血流3級，原梗死相關動脈支架成形部位無明顯狹窄（<50%）⑥患者知情同意。

骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療19骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療效研究排除標準：①有活動性感染、造血系統(tǒng)惡性疾患②有腫瘤病史或其他可能影響短期存活的致死性疾病③患者知情不同意骨髓間質干細胞移植在近期陳舊性心梗后伴心功能不全患者中的療效20臨床研究方案近期陳舊性心梗患者藥物治療基礎上隨機分組（n=22）移植組（n=11）對照組（n=11）術前IL-6、TNF-α、CRP、BNPEcho、99mTc-MIBI/18F-FDGSPECT、Holter、6-MWMSC移植生理鹽水冠造術后48hr、3月和6月測血清IL-6、TNF-α、CRP，術后3月、6月分別查血漿BNP、Echo、99mTc-MIBI/18F-FDGSPECT、Holter、6MW隨訪記錄死亡率和心血管事件的發(fā)生率臨床研究方案近期陳舊性心梗患者藥物治療基礎上隨機分組（n=221100×

200×

CD29-FITC

CD117-FITC

CD166-PECD34-PECD45-Pcy5100×200×CD29-FITCCD117-FITC22結果

MSCs移植組接受經(jīng)皮冠狀動脈內移植細胞總量為(1.0-2.4)×107個細胞密度為(5.9±2.4)×105/ml細胞臺盼藍染色平均為98.6%

流式細胞學檢測：CD29、CD117、CD166高表達CD34、CD45低表達

結果MSCs移植組接受經(jīng)皮冠狀動脈內移植23研究結果血清炎癥指標：MSC移植術后48小時，3月和6月血清IL-6、TNF-α和CRP與對照組比較無顯著性差異，與術前比較亦無顯著性差異，P>0.05。細胞移植組術后3月、6月BNP較術前降低,與對照組比較具顯著性差異，P<0.05。移植組術后6分鐘步行路程增加，與術前和對照組比較有顯著性差異，P<0.05。術后3月心超發(fā)現(xiàn)左室射血分數(shù)增加，術后6月左室舒張末容積縮小，與自身術前和對照組比較有顯著性差異，P均<0.05。研究結果血清炎癥指標：24

18F-FDG18F-FDG18F-FDG99mTc-MIBI

99mTc-MIBI

99mTc-MIBI移植組治療前后99mTc-MIBI/18F-FDGSPECT心肌顯像根據(jù)BermanDS等將左室分20個節(jié)段，短軸遠段、中段和基底段各8個節(jié)段，垂直長軸心尖部2個節(jié)段移植組術前99mTc-MIBI/18F-FDG不匹配節(jié)段4個，術后3月不匹配節(jié)段數(shù)為4個，術后不匹配節(jié)段數(shù)為6個。

18F-FDG18F25

MSC移植前后灌注-代謝不匹配節(jié)段數(shù)比較

*MSC移植前后灌注-代謝不匹配節(jié)段數(shù)比較*26結論首次采用隨機配對、自身前后對照原則，對近期陳舊性心梗合并心功能不全患者進行經(jīng)皮冠脈內MSC移植，發(fā)現(xiàn)：細胞移植術后6分鐘步行路程延長，血漿BNP下降，LVEF增加，說明心衰程度改善移植術后6月左室舒張末容積縮小，提示MSC移植可能有助于延緩心室重塑。結論首次采用隨機配對、自身前后對照原則，對近期陳舊性心梗27結論移植術后6月灌注-代謝不匹配節(jié)段數(shù)增加，提示梗死部位存活心肌增加，可能與移植的MSCs在梗死區(qū)再生、分化或促進梗死區(qū)冬眠心肌或頓抑心肌的復活有關。移植術后6個月的隨訪中，均未出現(xiàn)致心律失常事件，未發(fā)現(xiàn)有發(fā)熱，過敏反應，栓塞事件等發(fā)生。結論移植術后6月灌注-代謝不匹配節(jié)段數(shù)增加，提示梗死部位存活28骨髓間質干細胞移植治療原發(fā)性擴張型心肌病的療效與安全性骨髓間質干細胞移植治療原發(fā)性擴張型心肌病的療效與安全性29研究過程入選24例DCM患者，隨機分為對照組和移植組各12例兩組均予常規(guī)抗心衰藥物治療，移植組在藥物治療的基礎上給予自身MSC冠脈內回輸，對照組在經(jīng)皮冠脈造影時注射等量生理鹽水。

兩組術前、術后48h、3月和6月分別檢測血清IL-6、TNF-α和CRP，術前、術后3月和6月分別行BNP、Echo、Holter和6分鐘步行試驗。

研究過程入選24例DCM患者，隨機分為對照組和移植組各12例30研究對象

選擇2002年1月至2004年10月在我院住院DCM患者入選標準：①年齡≤70歲；②根據(jù)1995年WHO/ISFC關于原發(fā)性擴張型心肌病的定義，同時心臟超聲LVDd5.5-7.5cm，LVEF<45%；③排除繼發(fā)性擴張型心肌病；④患者知情同意。研究對象選擇2002年1月至2004年10月在我院住院D31研究對象排除標準：①有活動性感染、造血系統(tǒng)惡性疾患；②有腫瘤病史或其他可能影響短期存活的致死性疾病；③患者知情不同意。研究對象排除標準：32Table1

CharacteristicofpatientsMSCsgroup(n=12)Controlgroup(n=12)Male98Female34Age54±1258±11LVEF(%)30±928±9LVEDd(cm)6.83±0.526.39±0.75IL-6(pg/ml)2.45±0.762.69±0.62TNF-α(pg/ml)26.85±16.6226.33±22.56CRP(mg/L)1.05±0.670.93±0.55BNP(pg/ml)292.40±148.54331.60±141.376-MW(m)464.00±76.52415.67±58.23PVC1557.00±2089.061203.75±1897.47VT5.67±4.417.25±7.97Table1Characteristicofpati33研究方法

擴張型心肌病患者（24）移植組（12）對照組（12）術前IL-6、TNF-α、CRP、ECG、Echo、Holter、BNP、6-MW術后6h、12h、24h查IL-6、TNF-α、CRP、Holter術后3m、6m分別查ECG、Echo、Holter、6-MW隨訪記錄死亡率和心血管事件的發(fā)生率細胞移植+藥物藥物治療研究方法擴張型心肌病患者（234研究方法移植組經(jīng)皮冠狀動脈造影，放入6FJL4或6FJR4指引導管，送鋼絲至各分支動脈，然后沿鋼絲送入over-wire球囊至動脈遠端，經(jīng)球囊將含肝素的細胞懸液各1/3注射到左前降支、左回旋支和右冠狀動脈內。對照組經(jīng)皮冠狀動脈造影時注射等量生理鹽水。

研究方法移植組經(jīng)皮冠狀動脈造影，放入6FJL4或6FJR4指35結果MSCs移植前后血清炎癥指標的變化移植組在術前血清IL-6、TNF-α和CRP水平與對照組間無顯著性差異（P>0.05）。移植組術后48小時、3月和6月時血清IL-6、TNF-α和CRP與術前比較無顯著性差異，與對照組比較亦無顯著性差異（P>0.05）。結果MSCs移植前后血清炎癥指標的變化36結果MSCs移植前后BNP水平的比較移植組術前血漿BNP水平，與對照組比較無顯著性差異，P>0.05。移植組術后3月和6月血漿BNP水平，比術前增高，但較對照組降低，具顯著性差異，P<0.05。結果MSCs移植前后BNP水平的比較37結果MSCs移植前后6分鐘步行試驗的比較移植組術前6分鐘步行路程與對照組比較無顯著性差異，P>0.05。術后3月，移植組6分鐘步行路程較術前增加，但與對照組比較無顯著差異，P>0.05，術后6月，移植組6分鐘步行路程增加，與對照組比較，差異具顯著性，P<0.05。結果MSCs移植前后6分鐘步行試驗的比較38MSCs治療前后血漿BNP（pg/ml)變化**MSCs治療前后血漿BNP（pg/ml)變化**39MSC治療前后6分鐘步行路程的比較*MSC治療前后6分鐘步行路程的比較*40結果

MSCs移植前后心超的比較左室射血分數(shù)(EF，simpon法)移植組術后和對照組比較無顯著性差異，P>0.05術后3月：0.28±0.15vs0.31±0.10術后6月：0.29±0.15vs0.30±0.08與自身術前（0.30±0.09）比較亦無顯著性差異，P>0.05。左室舒張末容積（LVEDd）移植組術后與對照組比較無顯著性差異，

與自身術前比較，亦無顯著性差異，P>0.05。

結果MSCs移植前后心超的比較41結果

MSCs移植前后動態(tài)心電