考點32觀察類實驗和鑒定提取類實驗專題12教材基礎實驗考點32觀察類實驗和鑒定提取類實驗專題12教材基礎1靜悟與梳理欄目索引排查與特訓靜悟與梳理欄目索引排查與特訓2靜悟與梳理依綱靜悟1.觀察類實驗操作流程模板靜悟與梳理依綱靜悟1.觀察類實驗操作流程模板32.鑒定類實驗的操作流程模板2.鑒定類實驗的操作流程模板41.觀察類實驗核心梳理實驗名稱細胞的狀態觀察對象染色劑生物材料(及特殊要求)觀察DNA和RNA在細胞中的分布死細胞DNA和RNA的分布吡羅紅甲基綠染色劑人的口腔上皮細胞DNA、RNA同時存在時染色劑要混合使用且現配現用觀察線粒體活細胞線粒體健那綠用生理鹽水配制健那綠染液，用顯微鏡觀察1.觀察類實驗核心梳理實驗名稱細胞的狀態觀察對象染色劑生物材5觀察細胞的減數分裂死細胞染色體無(為固定裝片)蝗蟲精母細胞低溫誘導染色體加倍死細胞改良苯酚品紅染液洋蔥根尖分生區細胞染色前需漂洗干凈觀察細胞的有絲分裂死細胞龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)觀察細胞的減數分裂死細胞染色體無(為固蝗蟲精母細胞低溫誘導染6用顯微鏡觀察多種多樣的細胞活或死細胞細胞無(無需染色)酵母菌細胞、水綿細胞、葉的保衛細胞、魚的紅細胞等觀察葉綠體活細胞葉綠體蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻葉)觀察植物細胞的質壁分離與復原活細胞紫色中央液泡的大小和原生質層的位置紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞用顯微鏡觀察多種多樣的細胞活或死細胞無(無需染色)酵母菌細胞72.鑒定提取類實驗實驗名稱試劑顏色生物材料備注淀粉的鑒定碘液藍色脫色的葉片等若材料有顏色，需先脫色還原糖的鑒定斐林試劑磚紅色沉淀蘋果或梨勻漿等現配現用、水浴加熱脂肪的鑒定蘇丹Ⅲ(或Ⅳ)染液橘黃(或紅)色花生種子切片需用高倍鏡觀察蛋白質的鑒定雙縮脲試劑紫色豆漿、稀蛋清等先加A液，后加B液，搖勻使用2.鑒定提取類實驗實驗名稱試劑顏色生物材料備注淀粉的碘液藍色8綠葉中色素的提取和分離提取液：無水乙醇；分離液：層析液①胡蘿卜素：橙黃色；②葉黃素：黃色；③葉綠素a：藍綠色；④葉綠素b：黃綠色新鮮的綠葉(如菠菜葉)加入二氧化硅是為了研磨得更充分；碳酸鈣可防止在研磨中色素被破壞DNA的粗提取和鑒定二苯胺試劑藍色雞血細胞等沸水浴加熱5min綠葉中提取液：無水乙醇；①胡蘿卜素：橙黃色；新鮮的綠葉(如菠93.關注洋蔥在實驗中的“一材多用”取材部位實驗名稱取材原因葉鱗片葉植物細胞的質壁分離和復原外表皮細胞含紫色大液泡使用高倍顯微鏡觀察細胞的多樣性細胞較大，外表皮細胞有大液泡，內表皮細胞有明顯的細胞核觀察DNA和RNA在細胞中的分布內表皮細胞近于無色管狀葉葉綠體中色素的提取和分離

3.關注洋蔥在實驗中的“一材多用”取材部位實驗名稱取材原因葉10根觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂材料易得，且分生區細胞分裂能力強，染色體數目少，易于觀察低溫誘導植物染色體數目的變化材料易得，且低溫(4℃)下根尖也能分裂生長，誘導染色體變異率較高根觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂材料易得，且分生區細胞分裂能114.辨析有關顏色反應類實驗的五種顏色顏色原理紅①還原糖＋斐林試劑

磚紅色沉淀②脂肪＋蘇丹Ⅳ染液→紅色③RNA＋吡羅紅溶液→紅色④染色體(質)＋醋酸洋紅液→紅色⑤葉綠素a和葉綠素b→主要吸收紅光和藍紫光黃①脂肪＋蘇丹Ⅲ染液→橘黃色②葉綠體中色素分離的濾紙條中：胡蘿卜素→橙黃色，葉黃素→黃色4.辨析有關顏色反應類實驗的五種顏色顏色原理紅①還原糖＋斐林12綠①DNA＋甲基綠染液→綠色②線粒體＋健那綠染液→藍綠色③酒精＋橙色的重鉻酸鉀溶液

灰綠色④葉綠體中色素分離的濾紙條中：葉綠素b→黃綠色，葉綠素a→藍綠色藍①淀粉＋碘液→藍色②DNA＋二苯胺試劑

藍色紫①染色體(質)＋龍膽紫溶液→紫色②蛋白質＋雙縮脲試劑→紫色③胡蘿卜素和葉黃素→主要吸收藍紫光綠①DNA＋甲基綠染液→綠色②線粒體＋健那綠染液→藍綠色③酒135.常用試劑的種類及作用試劑體積分數或質量濃度作用原理相關實驗酒精50%洗去浮色(溶劑)脂肪的鑒定70%消毒微生物的培養95%解離觀察細胞的有絲分裂；低溫誘導染色體加倍100%溶解、提取色素葉綠體色素的提取和分離5.常用試劑的種類及作用試劑體積分數或質量濃度作用原理相關實14鹽酸5%營造酸性環境探究pH對酶活性的影響8%改變細胞膜通透性，使染色質中DNA與蛋白質分離觀察DNA、RNA在細胞中的分布15%解離觀察細胞的有絲分裂；低溫誘導染色體加倍NaOH0.1g/mL斐林試劑、雙縮脲試劑的成分檢測還原糖、蛋白質5%營造堿性環境探究pH對酶活性的影響0.1%遇酚酞呈紫紅色探究細胞表面積與體積的關系CuSO40.05g/mL斐林試劑的成分檢測還原糖0.01g/mL雙縮脲試劑的成分檢測蛋白質鹽酸5%營造酸性環境探究pH對酶活性的影響8%改變細胞膜通透156.常見疑難辨析(1)在觀察類實驗中低倍鏡和高倍鏡的使用情況如何？除觀察類實驗外，還有什么實驗中也用到了顯微鏡呢？提示觀察類實驗中除了“觀察植物細胞的質壁分離和復原”使用低倍鏡即可外，其余均需要使用高倍顯微鏡；還有“脂肪的切片法鑒定”“探究培養液中酵母菌種群數量的動態變化”也用到了顯微鏡。(2)“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”實驗中能否選用哺乳動物的成熟紅細胞？為什么？提示不能。因為哺乳動物的成熟紅細胞中無細胞核和細胞器，幾乎不含有DNA和RNA。6.常見疑難辨析16(3)能否用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體？為什么？提示不能。因為葉綠體中的色素的顏色會掩蓋線粒體被健那綠染色后的顏色變化。(4)在“觀察細胞的有絲分裂”實驗中為什么應注意觀察呈正方形的根尖分生區細胞？提示呈正方形的根尖分生區細胞分裂旺盛，而呈長方形的細胞可能是伸長區或成熟區的細胞，沒有分裂能力。(5)在觀察減數分裂實驗中為什么不宜選擇動物的卵巢和植物的雌蕊？提示因為雄配子的產生數量遠遠多于雌配子，更易觀察到減數分裂。(3)能否用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體？為什么？17(6)選用菠菜葉觀察葉綠體時，為什么要取稍帶些葉肉細胞的下表皮？提示因為靠近下表皮的葉肉細胞中的葉綠體較大而數目較少。(7)為什么應選取成熟的植物細胞觀察質壁分離與復原實驗？提示因其含有中央大液泡，易于發生質壁分離與復原的實驗現象。(8)斐林試劑能否用于蛋白質的鑒定？為什么？提示不能，因為用于蛋白質鑒定的雙縮脲試劑B液是0.01g/mL的CuSO4溶液，兩種試劑的本質不同。斐林試劑的本質是新制的Cu(OH)2，故應將甲液和乙液等量混勻后使用，而雙縮脲試劑的本質是堿性條件下的Cu2＋，故應先加A液1mL造成堿性環境，再加B液4滴搖勻使用。(6)選用菠菜葉觀察葉綠體時，為什么要取稍帶些葉肉細胞的下表18(9)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？提示不一定，因為脂肪的鑒定有兩個方案，可磨碎后在試管內鑒定，肉眼觀察即可，也可做切片借助顯微鏡觀察。(10)綠葉中色素的提取和分離有何區別？提示前者用無水乙醇提取法，原理是色素能夠溶于有機溶劑無水乙醇中；而后者用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素隨層析液在濾紙條上擴散得快，反之擴散得慢。(9)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？19排查與特訓題組一觀察類實驗1.(1)(2014·新課標Ⅰ，4)下列關于植物細胞質壁分離實驗的敘述，錯誤的是A.與白色花瓣相比，采用紅色花瓣有利于實驗現象的觀察B.用黑藻葉片進行實驗時，葉綠體的存在會干擾實驗現象的觀察C.用紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位觀察到的質壁分離程度可能不同D.紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞的液泡中有色素，有利于實驗現象的觀察√解析答案1234排查與特訓題組一觀察類實驗√解析答案123420解析

紅色花瓣是因為液泡內花青素的顏色呈紅色，所以用紅色花瓣作為實驗材料有利于實驗現象的觀察，A項正確；黑藻葉片中的葉綠體顯綠色，液泡中細胞液的顏色接近無色，兩者之間有顏色差異，因此葉綠體的存在不會干擾實驗現象的觀察，B項錯誤；紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位的細胞細胞液濃度可能不同，觀察到的質壁分離程度可能不同，C項正確；通常做植物細胞質壁分離實驗時用紫色洋蔥的鱗片葉外表皮細胞，因為外表皮細胞的液泡中有較多色素，發生質壁分離時容易觀察，D項正確。

1234解析紅色花瓣是因為液泡內花青素的顏色呈紅色，所以用紅色花瓣211234(2)(2014·新課標Ⅰ，29節選)在觀察大蒜根尖細胞有絲分裂的實驗中，常用鹽酸酒精混合液處理根尖，用龍膽紫溶液染色，實驗中，鹽酸酒精混合液的作用是_________________________，龍膽紫溶液屬于____性染料，能夠使細胞中的_______著色。答案殺死細胞，并使細胞分散開堿染色體1234(2)(2014·新課標Ⅰ，29節選)在觀察大蒜根尖221234(3)(2010·新課標全國，3)若要在普通顯微鏡下觀察到質壁分離、RNA和脂肪，下列四組材料中應選擇的一組是A.水稻胚乳和花生子葉B.天竺葵葉和水稻胚乳C.紫色洋蔥和花生子葉D.天竺葵葉和紫色洋蔥解析

在普通光學顯微鏡下觀察細胞質壁分離所選擇的材料應為成熟的植物組織細胞；觀察RNA和脂肪時均需對材料進行染色處理，取材時應選用白色或近于白色的組織，以免造成對實驗觀察效果的干擾，而且花生子葉中脂肪的含量較多，所以C選項正確。√解析答案1234(3)(2010·新課標全國，3)若要在普通顯微鏡下23真題重組判斷下列有關觀察類實驗的敘述：(1)人的口腔上皮細胞經處理后被甲基綠染色，其細胞核呈綠色(2014·重慶，1A)(

)(2)使用顯微鏡觀察裝片，在10倍物鏡下觀察到的圖像清晰、柔和，若直接轉換至40倍物鏡觀察時，除調節細調節器外，還需要調用凹面鏡(或調高亮度)、放大光圈(2013·上海，13改編)(

)(3)若比較有絲分裂細胞周期不同時期的時間長短，可通過“觀察多個裝片、多個視野的細胞并統計”以減少實驗誤差(2013·福建，4D改編)(

)(4)在光鏡的高倍鏡下觀察新鮮菠菜葉裝片，可見葉綠體的結構(2014·重慶，1D)(

)1234答案√√√×真題重組判斷下列有關觀察類實驗的敘述：1234答案√√√×241234(5)制作細胞的有絲分裂裝片時，洋蔥根尖解離后直接用龍膽紫溶液染色(2014·山東，4B)(

)(6)用改良苯酚品紅染色觀察低溫誘導的植物染色體數目變化(2014·四川，4A)(

)(7)用顯微鏡觀察洋蔥根尖裝片時，需保持細胞活性以便觀察有絲分裂過程(2015·山東，3C)(

)(8)用光學顯微鏡可觀察到月季成熟的紫紅色葉表皮細胞染色體的形態和數目(2017·天津，5D改編)(

)答案×√××1234(5)制作細胞的有絲分裂裝片時，洋蔥根尖解離后直接用252.(2017·南充二模)在生物學實驗中，材料的選擇及臨時裝片制作對于實驗能否成功都是非常關鍵的，下列有關說法均正確的一組是解析答案1234序號實驗課題生物材料裝片制作過程A觀察DNA和RNA在細胞中的分布人口腔上皮細胞制片→水解→用蒸餾水沖洗→染色B用顯微鏡觀察葉綠體蔬菜葉上表皮細胞滴清水→加標本→蓋蓋玻片C觀察植物細胞有絲分裂洋蔥根尖2～3cm解離→漂洗→染色→壓片D探究培養液中酵母菌種群數量的變化酵母菌滴稀釋后的培養液于計數室→蓋蓋玻片√2.(2017·南充二模)在生物學實驗中，材料的選擇及臨時裝26解析

用人口腔上皮細胞觀察DNA和RNA在細胞中的分布，裝片制作過程為：制片→水解→用蒸餾水沖洗→染色，A正確；蔬菜葉上表皮細胞通常不含葉綠體，B錯誤；觀察植物細胞有絲分裂，應該取洋蔥根尖2～3mm，裝片制作過程為：解離→漂洗→染色→制片→觀察，C錯誤；探究培養液中酵母菌種群數量的變化，裝片制作過程為：先蓋蓋玻片，再滴稀釋后的培養液于計數室，D錯誤。1234解析用人口腔上皮細胞觀察DNA和RNA在細胞中的分布，裝片271234思維延伸判斷下列敘述的正誤：(1)利用低倍鏡可確認細胞染色體組數是否變化(

)(2)健那綠染液處理的口腔上皮細胞中的線粒體已失去活性(

)(3)在“質壁分離與復原”的實驗中，第二次與第三次觀察間隔時間的長短對實驗現象的影響相同(

)(4)在“觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂”實驗中，解離時間的長短對實驗現象的影響相同(

)答案√×××1234思維延伸判斷下列敘述的正誤：答案√×××281234(5)在紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞的失水和吸水實驗中，顯微鏡下可依次觀察到甲、乙、丙三種細胞狀態。則由乙轉變為丙的過程中，沒有水分子從胞內擴散到胞外(

)答案(6)低溫誘導染色體數目加倍實驗中，須將大蒜根尖制成裝片后再進行低溫處理(

)××1234(5)在紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞的失水和吸水實驗中，29題組二鑒定提取類實驗3.(2017·全國Ⅰ，2)下列關于細胞結構與成分的敘述，錯誤的是A.細胞膜的完整性可用臺盼藍染色法進行檢測B.檢測氨基酸的含量可用雙縮脲試劑進行顯色C.若要觀察處于細胞分裂中期的染色體可用醋酸洋紅液染色D.斐林試劑是含有Cu2＋的堿性溶液，可被葡萄糖還原成磚紅色解析答案√1234題組二鑒定提取類實驗解析答案√123430解析

臺盼藍用于鑒定細胞的死活，被染色的細胞是死細胞，因為死細胞的細胞膜失去了對臺盼藍的選擇透過性，如果細胞膜結構不完整，臺盼藍也能進入細胞進行染色，故也能判斷細胞膜結構的完整性，A正確；雙縮脲試劑是用來檢測蛋白質中肽鍵的，不能檢測氨基酸的含量，B錯誤；

若要觀察處于細胞分裂中期的染色體，可以用堿性染料醋酸洋紅、龍膽紫、改良苯酚品紅等試劑染色，C正確；斐林試劑是由0.1g/mL的NaOH與0.05g/mL的CuSO4等量混合配制而成的，其中的Cu2＋可與還原糖在水浴加熱的條件下，發生氧化還原反應，生成磚紅色沉淀，D正確。

1234解析臺盼藍用于鑒定細胞的死活，被染色的細胞是死細胞，因為死311234真題重組判斷下列有關鑒定提取類實驗的敘述：(1)鑒定待測樣液中的蛋白質時，先加NaOH溶液，振蕩后再加CuSO4溶液(2014·山東，4A)(

)(2)還原糖的鑒定實驗中隔水加熱時，試管中液體的液面應低于燒杯中水的液面(2014·江蘇，22B)(

)(3)還原糖的鑒定實驗結束時將剩余的斐林試劑裝入棕色瓶，以便長期保存備用(2014·江蘇，22D)(

)(4)在葉綠體色素提取實驗中，在95%乙醇中加入無水Na2CO3后可提高色素的溶解度(2013·重慶，3D)(

)答案√√×√1234真題重組判斷下列有關鑒定提取類實驗的敘述：答案√√321234(5)葉綠體色素濾液細線浸入層析液，可導致濾紙條上色素帶重疊(2015·山東，3A)(

)(6)“利用雙縮脲試劑檢測生物組織中的蛋白質和利用重鉻酸鉀檢測酵母菌培養液中的酒精