附1：學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式浙江萬里學(xué)院實(shí)驗(yàn)報(bào)告課程名稱：生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師：譚志文、汪財(cái)生實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：維生素C的定量測(cè)定—2,6二氯酚靛酚法專業(yè)班級(jí)生物技術(shù)112姓名邱玉蘭學(xué)號(hào)2011013451實(shí)驗(yàn)日期2013.4.15實(shí)驗(yàn)步驟：各步驟現(xiàn)象記錄：滴定開始時(shí)，滴下的藍(lán)色被中和，滴定終點(diǎn)時(shí)溶液出現(xiàn)粉紅色，并在15s內(nèi)顏色不褪去結(jié)果計(jì)算與分析：Va=（8.752+8.749+8.734)/3=8.745mlVb=（0.190+0.191+0.192)/3=0.191mlS=1/[(7.533+7.581+7.512)/3]=0.133mlW=10*15.160/100=1.516g獼猴桃中維生素C濃度（mg/100g）=（8.745-0,191）*0.133*100/1.516=75.05mg/100g結(jié)果分析：本次實(shí)驗(yàn)我組用的實(shí)驗(yàn)材料是八成熟的獼猴桃。實(shí)驗(yàn)結(jié)果中獼猴桃的Vc含量比文獻(xiàn)資料中Vc的含量（100-300mg/ml)正常范圍小。對(duì)出現(xiàn)這樣的結(jié)果分析：（1）新鮮時(shí)的獼猴桃Vc的含量是最高的，隨著時(shí)間的推移Vc的含量開始損失，八成熟的獼猴桃Vc已經(jīng)損失很多。（2）在實(shí)驗(yàn)研碎的過程中用的是研碎機(jī)，在快速研碎的過程中有空氣進(jìn)入，其中的氧氣將Vc部分氧化。(3)在滴定的過程中，由于微量滴定管會(huì)漏液，需要對(duì)微量滴定管進(jìn)行調(diào)整使滴定過程過長，Vc被氧氣部分氧化。（4）在標(biāo)準(zhǔn)液的滴定時(shí)，由于微量管的問題，使滴定時(shí)間過長Vc被氧化，最后導(dǎo)致樣品Vc計(jì)算結(jié)果偏小。注意事項(xiàng)與建議：（1）在研碎的時(shí)候，水果樣品最好用刀切的碎點(diǎn)，這樣用研碎機(jī)研碎的時(shí)間會(huì)縮短很多，Vc的損失也會(huì)少點(diǎn)同時(shí)節(jié)約時(shí)間。（2）在滴定前先用水檢查下微量滴定管會(huì)不會(huì)出現(xiàn)漏液的現(xiàn)象，出現(xiàn)漏液就要求老師更換，這樣既節(jié)約時(shí)間又能減小實(shí)驗(yàn)誤差。（3）在樣品滴定前進(jìn)行樣品的預(yù)滴定，看看滴定體積是不是小于1mL或多于4mL，如果樣品含維生素C含量太高或太低時(shí)，可酌情增減樣液的用量或者改變提取液的稀釋度。同時(shí)也可大致知道所需的體積，知道大致的體積數(shù)就可以開始滴定時(shí)液體流速快點(diǎn)，快到滴定終點(diǎn)時(shí)放慢點(diǎn)，這樣可以節(jié)約時(shí)間。思考題解答：1、總結(jié)本次實(shí)驗(yàn)操作的注意事項(xiàng)。答：（1）某些水果、蔬菜（如橘子、西紅柿等）漿狀物泡沫太多，可加數(shù)滴丁醇或辛醇。（2）整個(gè)操作過程要迅速，防止還原性抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不能超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL，如果樣品含維生素C含量太高或太低時(shí)，可酌情增減樣液的用量或者改變提取液的稀釋度。（3）本實(shí)驗(yàn)必須在酸性條件下進(jìn)行。在此條件下，干擾物反應(yīng)進(jìn)行的很慢。（4）2%草酸有抑制抗血酸氧化酶的作用，而1%草酸與此作用。（5）干擾滴定的因素有：若提取液中色素很多時(shí)，滴定不易看出顏色的變化，可用白陶土脫色，或加1mL氯仿，達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，氯仿層呈現(xiàn)出淡紅色。亞鐵離子可還原可還原二氯酚靛酚。對(duì)含有大量的亞鐵離子的樣品可用8%的乙醇溶液代替草酸溶液提取，此時(shí)亞鐵離子不會(huì)很快與染料起作用。樣品中可能含有其他雜質(zhì)還原二氯酚靛酚，但反應(yīng)速度均較抗壞血酸慢，因而滴定開始時(shí)，染料要迅速加入，而后盡可能地一點(diǎn)一點(diǎn)地加入，并要不斷地?fù)u動(dòng)錐形瓶直至呈現(xiàn)粉紅色，于15s內(nèi)不褪色，保證滴定過程不要超過2min。（6）提取的漿狀物如不易過濾，亦可離心，留取上清液進(jìn)行滴定。指出本實(shí)驗(yàn)采用的定量測(cè)定維生素C的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？答：優(yōu)點(diǎn)：2,6-二氯靛酚（DCIP)滴定法利用還原型VC能將染料DCIP還原為無色的原理，有經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、快速、簡便的特點(diǎn)，常用于果蔬中還原型VC含量測(cè)定。缺點(diǎn)：該方法是利用DCIP染料滴定果蔬提取液，只能測(cè)定還原型抗壞血酸，不能測(cè)出具有同樣生理功能的氧化型抗壞血酸和結(jié)合型抗壞血酸。滴定終點(diǎn)為過量一滴染料呈現(xiàn)的紅色，所以待測(cè)果蔬呈紅色，提取液本身顏色會(huì)干擾滴定終點(diǎn)的觀察。試簡述維生素C的生理意義及應(yīng)用情況。答：維生素C不足會(huì)引起壞血病，維生素C還與病毒抑制因子的長生有關(guān)，因而維生素C對(duì)預(yù)防感冒有很大的作用。同時(shí)還有讓膽固醇值下降的作用，保持女性排卵的退性作用。對(duì)抗精神壓力有很大作用。維生素C有分解皮膚中黑色素，預(yù)防色素沉著，預(yù)防黃褐斑、雀斑發(fā)生，使皮膚保持潔白細(xì)嫩的功能，并有促進(jìn)傷口愈合、強(qiáng)健血管和骨骼的作用。維生素C的應(yīng)用：膠原蛋白的合成；治療壞血病；預(yù)防牙齦萎縮、出血；預(yù)防動(dòng)脈硬化；抗氧化劑；治療貧血；防癌；保護(hù)作用；提高人體的免疫力；提高機(jī)體的應(yīng)急能力。為何整個(gè)滴定過程不要超過2分鐘？答：因?yàn)檫€原型抗壞血酸易被氧化，空氣中的氧氣會(huì)氧化Vc，樣品中沒有抗氧化的2%的草酸Vc就更容易被氧化，所以滴定過程不要超過2分鐘。為什么滴定終點(diǎn)以在淡紅色存在15s內(nèi)為準(zhǔn)？答：當(dāng)一種溶液滴加到另一種溶液中時(shí),會(huì)突然打破原來溶液保持的動(dòng)態(tài)平衡,在這個(gè)過程中就出現(xiàn)了"假變色",等半分鐘就達(dá)到新的動(dòng)態(tài)平衡了,顏色就不再改變了查閱資料，介紹其他測(cè)定VC含量的方法和原理。答：用三價(jià)鐵和鄰菲羅啡分光光度法