羥苯磺酸鈣顆粒劑在健康人體的藥代動力學及生物等效性研究

羥苯磺酸鈣是一種改善微循環的藥物。另一方面，它可以通過調整微血管壁的生理功能，降低血管滲透性，減少阻力，降低血小板聚集，防止血栓形成，提高紅細胞的柔性，間接增加對淋巴管和水腫的引流。另一方面，它可以通過抑制血管活動物質（氨基乙酸胺、5-羥色胺、緩沖劑、透明質酸酶和前列腺素）來改善基底膜傷口的生物合成。目前,國內外關于血漿中羥苯磺酸鈣濃度測定方法,均采用高效液相色譜-熒光檢測法。本研究建立了一種高效液相色譜-紫外檢測法,用于測定羥苯磺酸鈣的血藥濃度,該方法準確、靈敏,適用于羥苯磺酸鈣生物等效性研究,這為為羥苯磺酸鈣的臨床應用提供科學依據。材料、對象和方法1藥品規格設計受試制劑:羥苯磺酸鈣顆粒劑,批號為070401,規格為每袋含0.5g,海南凱健制藥有限公司生產;參比制劑:羥苯磺酸鈣膠囊,批號為508769,規格為每粒含0.5g,依比威藥品有限公司生產;對照品:羥苯磺酸鈣,批號:20060508;內標:對氨基苯甲酸,批號126K0751,Sigma公司提供。乙腈、冰醋酸,色譜純,美國Tedia公司;三乙胺,分析純,國藥集團提供;水,自制重蒸水;空白血漿,遼寧省血液中心提供。高效液相色譜儀、L-2400紫外檢測器、L-2130輸液泵及L-2200全自動進樣器,日本日立公司產品;T-2000色譜數據工作站軟件,天美科技有限公司產品;A2受試對象的一般資料20名健康志愿者,體質量56～78kg,平均體質量(67.00±6.54)kg;年齡20～25歲,平均年齡(23.0±1.31)歲。受試者均無藥物過敏史,無肝、腎疾病史,精神狀態良好,全面體格檢查均正常(其中包括心電圖、心率、血壓、腎功能、肝功能等)。受試者在受試前2周內未服過任何藥物;試驗期間,禁服其他藥物及煙、酒、茶和飲料。試驗前簽署知情同意書。3多次給藥、交叉試驗用2制劑雙周期隨機交叉試驗設計。將20名受試者隨機等分成2組,分別口服羥苯磺酸鈣顆粒劑(受試制劑)和膠囊(參比制劑),2次給藥間隔為1周,然后進行交叉試驗。于服藥前和服藥后0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、16.0、24.0h從靜脈采血5mL,置肝素化離心管,離心,取血漿于-20℃冰箱儲存,用于血藥濃度檢測。受試者取血順序同服藥順序,第2周期采血點及時間均與第1周期相同。4條件1色譜柱為DimaC5樣品處理和測量精密量取血漿100μL,置于1.5mL離心管中,精密加入對氨基苯甲酸標溶液(25.88μg·mL-6方法學評價6.1內源性物質不干擾藥物和內標的測定空白血和受試者血樣色譜圖見圖1。羥苯磺酸鈣保留時間為5.5min左右,內標保留時間為10.0min左右,2者基線分離,表明血漿中的內源性物質不干擾藥物和內標的測定。6.2空白血漿中羥苯磺酸溶液的配制精密量取不同濃度的羥苯磺酸標準溶液10μL于7個空白離心管中,加入空白血漿100μL,配制成血漿中羥苯磺酸濃度分別為0.06、0.25、0.99、2.48、4.96、9.91、19.83mg·L-6.3峰峰面積的測定配制成血漿中藥物濃度分別為0.12、0.99和9.91mg·L-精密量取羥苯磺酸鈣對照品和內標液,加入空白血漿中,按“血漿樣品處理方法”項下操作,制備低、中、高3個濃度的樣品,氮氣吹干,流動相復溶,進樣分析,每一濃度進行5個樣本分析,獲得相應藥物峰面積和內標峰面積;另取不同濃度的羥苯磺酸鈣標準溶液和內標,配制成濃度分別為0.12、0.99和9.91mg·L-6.4穩定性研究配制成血漿中藥物濃度分別為0.12、0.99和9.91mg·L-7處理數據用孫瑞元教授等編制的DASver2.0軟件進行處理,t結果1血藥濃度曲線20名健康受試者交叉給予羥苯磺酸鈣顆粒劑和膠囊后,血藥濃度-時間曲線見圖2。2藥房動態參數20名健康受試者口服參比制劑和受試制劑后,羥苯磺酸鈣顆粒劑的血藥濃度-時間曲線,經計算機擬合得藥代動力學參數,見表2。3等生物評價以參比制劑為參比品,受試制劑為供試品,第1、2次給藥分別為周期1和2,用DASver2.0軟件程序對實測t4安全評估20名受試者在2次給藥期間,耐受性良好,受試者服藥前后的血壓、心電圖和血常規、血生化檢驗均在正常范圍內,未發現有藥物不良反應。種制劑間的比較用高效液相色譜法測定血漿中羥苯磺酸鈣濃度已有報道2種制劑的主要藥代動力學參數經對數轉換后,方差分析顯示,在2種制劑間無顯著性差異(P>0.05)。進一步