“1893年的一天，在演奏完第六交響曲（悲慟交響曲）之后，柴可夫斯基來到大街上散步，忽然感到口渴，就進了一家飯店，要了一杯冷水喝，誰知就是這樣一杯水要了他的命。是情殺、仇殺還是另有原因呢？兇手是誰呢？”“1893年的一天，在演奏完第六交響曲（悲慟交響曲）1當時俄羅斯發生霍亂大流行，最后醫生確認，這杯水中含有霍亂弧菌，致使天才音樂家柴可夫斯基染上致命的霍亂而死去。為什么這個故事中特別指出是“冷水”？霍亂可能通過什么途徑傳播？冷水中有多少霍亂弧菌才可能使柴可夫斯基發病？

“千軍萬馬過胃部”“集團作戰”。當時俄羅斯發生霍亂大流行，最后醫生確認，這杯水中含有霍亂弧菌2

1883年，埃及發生了一次瘟疫大流行，成千上萬的病人一批批死亡。患者往往起病急，出現嚴重的腹瀉和嘔吐，米泔樣大便。若得不到及時救治，常常在短時間內因全身脫水、肌肉痙攣和周圍循環衰竭，造成休克而死。1883年，埃及發生了一次瘟疫大流行，成千上萬的病人3一名在印度某水電站工作的44歲工程師，突發大量水樣瀉，由于每小時約0.5L液體的丟失，患者很快出現紫紺及重度脫水癥狀，腸鳴音減弱，低血壓，血容量減少，其排出物呈等滲，暗視野顯微鏡檢查，發現逗點狀微生物。Q1、患者最有可能患有何種疾病？Q2、如何確診？病例分析一名在印度某水電站工作的44歲工程師，突發大量水樣瀉，由于每4形態與染色：革蘭染色陰性，弧菌，單端鞭毛，運動活潑。掃描電鏡霍亂弧菌一、生物學特性形態與染色：革蘭染色陰性，弧菌，單端鞭毛，運動活潑。掃描電鏡5魚群狀排列病人米泔水樣糞便涂片GS鏡檢，可見大量弧菌首尾相互銜接，平行排列如魚群狀。

魚群狀排列病人米泔水樣糞便涂片GS鏡檢，可見大量弧菌6霍亂弧菌Vibriocholerae-vibrio-shapedprokaryotethatcausescholera霍亂弧菌Vibriocholerae-vibrio7霍亂弧菌（鞭毛染色）霍亂弧菌（鞭毛染色）8霍亂弧菌（掃描電鏡）霍亂弧菌（掃描電鏡）9第十一章霍亂弧菌ppt課件10第十一章霍亂弧菌ppt課件11一、生物學特性抗原構造與分群：

H抗原：無特異性

O抗原：分群培養特性：耐堿怕酸，pH8.8-9.2，可在無鹽環境中生長一、生物學特性抗原構造與分群：

H抗原：無特異性

12古典生物型

O-1群

ELTor生物型非O-1群引起散發性胃腸炎。

O-139型，1992年起引起

霍亂流行。一、生物學特性一、生物學特性13與人類感染有關的主要弧菌弧菌人類疾病霍亂弧菌O1和O139血清群霍亂，可造成大流行甚至世界性大流行非O1和非O139霍亂弧菌血清群霍亂樣腹瀉，一般腹瀉，偶爾，腸道外感染副溶血性弧菌胃腸炎，腸道外感染其他：擬態弧菌、創傷弧菌、霍利斯弧菌、河弧菌不常見與人類感染有關的主要弧菌弧菌人類疾病霍亂弧菌O1和O13914抵抗力：

較強，但100℃1-2分鐘可滅活，怕酸（1份漂白粉加4份水，1小時）一、生物學特性抵抗力：一、生物學特性15

致病性與免疫性致病物質：

鞭毛與菌毛：運動并粘附至小腸粘膜

腸毒素：

A—A1：毒性組分，使腺苷酸環化酶活 性增高，cAMP大量增加。

A2：與B結合

B—與小腸上皮細胞神經節苷脂受體結合致病性與免疫性致病物質：16霍亂腸毒素結構：1A、5B霍亂腸毒素（CT）：由一個A亞單位和5個相同的B亞單位構成的一種聚合蛋白。霍亂腸毒素結構：1A、5B霍亂腸毒素（CT）：由一個A亞單17致病物質---霍亂腸毒素:激活腺苷環化酶，使細胞內cAMP水平升高，主動分泌Na+、K+、HCO3—和水，導致重的腹瀉與嘔吐B亞單位A亞單位與小腸粘膜上皮細胞GM1神經節苷脂受體結合，介導A亞單位進入細胞（結合亞單位）（毒性亞單位）致病物質---霍亂腸毒素:激活腺苷環化酶，使細胞內cAMP18B亞單位

與小腸粘膜

上皮細胞

GM1神經節苷脂受體結合B亞單位

與小腸粘膜

上皮細胞

GM1神經節苷脂受體結合19A亞單位裂解為A1和A2兩條多肽，A1亞單位進入細胞發揮毒性作用A亞單位裂解為A1和A2兩條多肽，A1亞單位進入細胞發揮毒性20A1活化AC(腺苷環化酶)，使ATP轉化成cAMP(環磷酸腺苷)，使之在細胞內含量增高A1活化AC(腺苷環化酶)，使ATP轉化成cAMP(環磷酸21cAMP水平升高，導致腸腺上皮細胞分泌功能亢進，大量水和電解質在腸腔堆積，引起劇烈腹瀉cAMP水平升高，導致腸腺上皮細胞分泌功能亢進，大量水和電解22霍亂腸毒素的作用機制霍亂腸毒素的作用機制23傳染源：患者及帶菌者人類是唯一易感者攝入108-1010個細菌可造成感染，引起霍亂傳播途徑：經水傳播經食物傳播經生活接觸傳播經蒼蠅傳播霍亂：

一種殘忍的瘟疫傳染源：患者及帶菌者霍亂：

一種殘忍的瘟24霍亂病人霍亂病人25重型腹瀉次數一日20次以上，極度煩躁甚至昏迷，皮膚彈性消失，眼窩深凹，明顯發紺，嚴重肌肉痙攣，脈搏微弱而速，甚或無脈，血壓下降或測不到，尿量每日少于50ml或無尿，脫水程度兒童相當于體重10%以上，成人8%以上。重型腹瀉次數一日20次以上，極度煩躁甚至昏迷，皮膚彈性消26霍亂劇烈的噴射狀嘔吐休克、電解質紊亂及酸中毒腹瀉物呈米泔水樣不治療，死亡率達60%霍亂劇烈的噴射狀嘔吐27

致病性與免疫性所致疾病：霍亂易感者：人類是霍亂弧菌的唯一易感者傳播途徑：消化道

可疑水、食物（菌103—105，108—1010）

2-3天突然出現劇烈腹瀉與嘔吐

嚴重脫水，電解質紊亂，腎衰、死亡

致病性與免疫性所致疾病：霍亂28致病性與免疫性病后帶菌一般不超過2周，個別可長達數年，病菌主要存在于膽囊中。免疫力：

同群免疫力較牢固，體液免疫為主。致病性與免疫性病后帶菌一般不超過2周，個別29微生物學檢查

霍亂：烈性腸道傳染病，為我國的甲類法定傳染病（俗稱2號病）霍亂是烈性傳染病，對首例病人的病原學診斷應快速、準確，并及時作出疫情報告微生物學檢查霍亂：烈性腸道傳染病，為我國的甲類法30微生物學檢查

標本：嘔吐物、米泔水樣糞便

直接鏡檢

分離培養PCR

G-弧菌堿性蛋白胨水腸毒素運動活潑凝集反應微生物學檢查標本：嘔吐物、米泔水樣糞便31標本病人糞便，肛拭流行病學調查還包括水樣糞便標本：Cary-Blair保存液腸道病原菌：甘油鹽水緩沖保存液標本病人糞便，肛拭32直接鏡檢

革蘭染色陰性弧菌懸滴法觀察細菌呈“魚群穿梭樣”運動有助于診斷直接鏡檢革蘭染色陰性33分離培養接種堿性蛋白胨水增菌目前常用的選擇培養基為TCBS（硫代硫酸鈉檸檬酸膽鹽蔗糖培養基

），霍亂弧菌因分解蔗糖呈黃色菌落挑選可疑菌落進行生化反應血清學反應----玻片凝集反應分離培養接種堿性蛋白胨水增菌34形成菌膜在PH8.8-9.0堿性蛋白胨水中生長表面形成菌膜形成菌膜在PH8.8-9.0堿性蛋白胨水中生長表面形成菌膜35霍亂弧菌在TCBS瓊脂平板上的菌落特征（18-24h）在選擇培養基瓊脂平板（TCBS）上生長，形成較大黃色菌落。霍亂弧菌在TCBS瓊脂平板上的菌落特征（18-24h）在選擇36霍亂弧菌血清學反應

（凝集反應）霍亂弧菌血清學反應

（凝集反應）37

防治原則防：霍亂死菌苗：肌肉注射，保護率50%，3-6個月減毒重組活菌苗：口服，保護率82-100%