腫瘤標志物檢驗本章要點腫瘤抗原的概念及其分類機體的抗腫瘤免疫效應機制腫瘤的免疫逃逸機制腫瘤標志物的概念及常見腫瘤標志物腫瘤標志物檢測的方法CONTENTS目錄01020304概述機體的抗腫瘤免疫效應機制腫瘤的免疫逃逸機制常見腫瘤標志物05腫瘤標志物的檢測和聯合應用前言腫瘤是危害人類健康最嚴重的疾病之一。腫瘤的免疫學檢驗即通過免疫學方法檢測腫瘤標志物，實現對腫瘤的早期篩選、輔助診斷、療效考核、病情監測和預后判斷等目的。概述01一、腫瘤抗原腫瘤細胞是由正常細胞轉化而來，與正常細胞不同的是高速占位性增殖、浸潤與轉移。腫瘤抗原（tumorantigen）指在腫瘤發生、發展過程中新出現的或過度表達的抗原物質的總稱。（一）根據腫瘤抗原的特異性分類1.腫瘤特異性抗原（tumorsepificantigen，TSA）指只存在于腫瘤細胞表面，而不存在于正常相應組織或細胞的大分子物質。2.腫瘤相關抗原（tumorassociatedantigen，TAA）指非腫瘤細胞特有，在腫瘤細胞和相應的正常細胞中均存在的抗原物質，只是在細胞癌變時其含量才會明顯增加。（二）根據腫瘤抗原產生的機制分類1．化學或物理因素誘發的腫瘤抗原2．病毒誘發的腫瘤抗原3．自發腫瘤抗原4．正常細胞成分的異常表達二、腫瘤標志物（一）腫瘤標志物的概念

腫瘤標志物（tumormarker，TM）指在惡性腫瘤發生和發展過程中，由腫瘤細胞合成、分泌，或是由機體對腫瘤細胞反應而產生和（或）升高的、可預示腫瘤存在的一類物質，存在于血液、體液、細胞或組織中。二、腫瘤標志物（二）理想的腫瘤標志物（三）影響TM濃度的因素（7個）機體的抗腫瘤免疫效應機制02機體的抗腫瘤免疫效應機制非特異性抗腫瘤免疫特異性抗腫瘤免疫體液免疫----次要細胞免疫----主要非特異性抗腫瘤免疫補體介導的腫瘤細胞溶解；NK細胞的殺瘤效應；巨噬細胞的殺瘤效應；其它如中性粒細胞、細胞因子如γ-IFN、穿孔素(perforin)和TNF等效應分子的作用。特異性抗腫瘤免疫一、抗腫瘤的體液免疫效應機制

免疫系統可產生抗腫瘤抗原的特異性抗體，但此效應并非機體抗腫瘤的重要機制。1.補體依賴的細胞毒作用（CDC）2.抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC)3.抗體的免疫調理作用4.抗體的封閉作用5.干擾腫瘤細胞的黏附作用二、抗腫瘤的細胞免疫效應機制T細胞NK細胞巨噬細胞樹突狀細胞腫瘤的免疫逃逸機制03腫瘤的免疫逃逸機制一、腫瘤細胞有關方面的因素二、宿主免疫系統有關的因素常見的腫瘤標志物04常見的腫瘤標志物一、胚胎抗原類腫瘤標志物二、糖鏈抗原類腫瘤標志物三、酶類腫瘤標志物四、激素類腫瘤標志物五、蛋白質類腫瘤標志物六、其他常用的腫瘤標志物一、胚胎抗原類腫瘤標志物（一）癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）在胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟，出生后組織內含量很低。在胃腸道惡性腫瘤，乳腺癌、肺癌及其他惡性腫瘤患者亦可檢出。參考值：健康成人CEA濃度＜2.5μg/L（CLIA）。臨床應用時，不建議將CEA用于對健康人群進行早期結直腸癌的篩查。術前CEA水平可與其他因素一起聯合用于手術方案的選擇，對于CEA水平升高的患者需評估是否存在遠處轉移，不建議根據術前CEA水平選擇患者輔助化療方案。一、胚胎抗原類腫瘤標志物（二）甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）參考值：健康成人＜20μg/L（CLIA）。AFP在胎兒期分別由卵黃囊和胎肝合成，在胎兒出生后18個月，AFP濃度下降。正常成人肝細胞幾乎不產生AFP。當肝細胞或生殖腺胚胎組織等癌變時AFP大量表達。AFP主要用于輔助診斷原發性肝癌及篩查高危人群，也用于肝癌的療效及預后評估。持續一個月以上AFP﹥500μg/L，并能排除妊娠、活動性肝炎、睪丸癌或卵巢畸胎瘤等，意味著存在肝癌。良性肝臟疾病如肝炎、肝硬化AFP也可升高，但95%小于200μg/L。一、胚胎抗原類腫瘤標志物（三）胰胚胎抗原（pancreaticoncofetalantigen，POA）在胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟，出生后組織內含量很低。在胃腸道惡性腫瘤，乳腺癌、肺癌及其他惡性腫瘤患者亦可檢出。參考值：健康成人CEA濃度＜2.5μg/L（CLIA）。二、糖鏈抗原類腫瘤標志物糖鏈抗原（carbohydrateantigen，CA）是由于細胞膜糖蛋白中的糖基異常形成的抗原。正常細胞膜表面有豐富的糖蛋白，正常細胞惡變時，糖蛋白發生變異，形成了與正常細胞不同的特殊抗原，糖鏈抗原通常存在于腫瘤細胞的表面或由腫瘤細胞分泌。CA125存在于胎兒體腔上皮分化而來的心包膜、腹膜及胸膜等組織。是上皮性卵巢癌和子宮內膜癌的標志物，在漿液性子宮內膜樣癌、透明細胞癌、輸卵管癌及未分化卵巢癌患者的亦可明顯升高，但在黏液卵巢癌不表達。存在于胰腺、膽道、胃、腸、子宮內膜、涎腺上皮上的黏蛋白型糖蛋白。正常血清中含量較低，但在多種消化系腫瘤大量表達。胰腺癌和結直腸癌的標志物。血清CA19-9陽性臨界值為37kU/L。85％～95％胰腺癌患者CA19-9為陽性。CA19-9抗原決定簇是由糖和多肽兩部分組成的糖蛋白類抗原。主要在乳腺癌、肺腺癌、胰腺癌等腺癌細胞表達。約30％～50％的乳腺癌患者CA15-3明顯升高，為乳腺癌術后復發監測的最佳指標。CA15-3CA15-3在乳腺癌治療中的動態變化

三、酶類腫瘤標志物細胞內的酶因腫瘤細胞破壞或改變細胞膜的通透性，而釋放至血液；腫瘤細胞代謝異常，使某些酶或同工酶的合成增加；腫瘤組織壓迫和浸潤，導致某些酶的排泄受阻，患者血清中的酶活性異常升高。

前列腺特異性抗原參考區間T-PSA≤4.0μg/L

F-PSA≤0.8μg/L

CLIA前列腺特異性抗原（prostatespecificantigen，PSA）

PSA是從前列腺組織中分離出的絲氨酸蛋白酶，相對分子質量34KD，僅存在于前列腺上皮細胞和精液內，PSA在正常男性含量＜2.5μg/L（RIA法、ElA法）。PSA是目前前列腺癌最理想的TM，用于前列腺癌的篩查、分期及預后評估、療效判斷、復發監測。目前尚無足夠充分的依據推薦采用年齡特異的PSA值參考范圍。神經元特異性烯醇化酶神經元特異性烯醇化酶（neuronspecificenolase,NSE）

為烯醇酶的異構體，是一種酸性同工酶，是參與甘油分解的最后一個酶，存在于神經元和神經內分泌組織中。NSE是神經母細胞瘤和小細胞肺癌的最主要的TM。NSE對小細胞肺癌的敏感度為80％，特異性為80％～90％，是目前公認的小細胞肺癌高特異性和高靈敏性的TM。嗜鉻細胞瘤、胰島細胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤等腫瘤也可使NSE升高。α-L-巖藻糖苷酶α-L-巖藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU）是溶酶體酸性水解酶，可催化含巖藻糖基的糖蛋白和糖苷的分解代謝，廣泛存在于人體各組織細胞溶酶體中。AFU是對原發性肝細胞性肝癌臨床診斷的又一敏感、特異的新TM。血清AFU活力在某些轉移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢或子宮癌患者間有重疊，在某些非腫瘤性疾病如肝硬化、慢性肝炎、消化道出血等也可輕度升高。AFU和AFP的聯合檢測，可提高原發性肝癌的診斷率至90%以上。

四、激素類腫瘤標志物正常情況下不產生激素的某些組織，在細胞惡變時產生并釋放一些肽類激素（異位內分泌激素），導致相應癥候群的出現。這些內分泌激素亦可作為腫瘤相關標志物。人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotrophin，HCG）妊娠期胎盤滋養層細胞分泌的糖蛋白激素，有α和β二種亞基。α亞基結構與卵泡刺激素（FSH）、黃體酮生成素（LH）和促甲狀腺素（TSH）相似。β亞基則是其特有的，以特殊的免疫試驗可測定HCG的β亞單位。人絨毛膜促性腺激素

參考區間陰性<5U/L

陽性>25U/L

MEIA微粒子酶免疫分析法

β-HCG是公認的診斷滋養層細胞腫瘤敏感性最高的標志物。非精原細胞性睪丸癌70％輕度升高，并往往和AFP同時升高。部分卵巢癌、膽囊癌、乳腺癌、胃腸道癌、肺癌亦可見β-HCG升高。炎癥、十二指腸潰瘍、肝硬化等良性病變β-HCG可輕度異常。

兒茶酚胺類物質兒茶酚胺類物質（catecholamines，CA）結構中含有兒茶酚的一類物質的總稱，包括腎上腺素、去甲腎上腺素、香草扁桃酸（VMA）等。70％神經母細胞瘤VMA升高。約70％肺癌病人ACTH增加。部分胰腺癌、乳腺癌、胃腸道癌癥患者可見大分子量的ACTH增加。

五、蛋白質類腫瘤標志物大多數實體瘤是由上皮細胞衍生而來，當腫瘤細胞快速分化、增殖時，一些在正常組織中不表現的細胞類型或組分大量出現，如作為細胞支架的角蛋白，成為腫瘤標志物。細胞角蛋白在正常及惡性的上皮細胞中起支架作用,有20個亞型(CK1～CK20)，腫瘤細胞中富含CK18和CK19。CK19主要分布在單層上皮上，當CK19片段被分泌釋放進入血液循環，該可溶性片段即為Cyfra21-l。

細胞角蛋白19血清Cyfra21-1是非小細胞肺癌最有價值的腫瘤標志物，尤其對鱗狀細胞癌的早期診斷、療效判斷及預后監測有重要意義。Cyfra21-1可用來診斷肺癌、鱗癌,對非小細胞肺癌有較高特異性。Cyfra21-1水平和腫瘤的惡化程度，轉移相一致。Cyfra21-l也可用于膀胱癌的輔助診斷。鐵蛋白（Ferritin，FE）由24個亞基組成，其亞基分成H和L兩類，胎兒組織和癌組織中以H型為主。為非器官特異性標志物，存在于各種組織和體液中，病理情況下釋放入血的量增加。

鐵蛋白

男：20～250μg/L女：10～120μg/LRIA、EIA參考區間六、其他常用的腫瘤標志物腫瘤標志物檢測方法參考區間相關腫瘤糖鏈抗原72-4（CA72-4）CLIA≤6.9KU/L胃癌、黏液性卵巢癌等糖鏈抗原242（CA242）CLIA＜15KU/L胰腺癌、結腸癌、胃癌等鱗狀細胞癌抗原（SCCA）CLIA＜1.5μg/L子宮頸鱗癌、頭頸鱗癌、肺鱗癌等鱗狀細胞癌組織多肽抗原（TPA）CLIA<100U/L膽管癌、膀胱癌、乳腺癌等γ-谷氨酰轉肽酶（γ-GT）速率法3U/L~55U/L肝癌、前列腺癌、骨肉瘤等腫瘤標志物的檢測和聯合應用05腫瘤標志物的檢測技術可分為免疫學、生物化學、免疫組織化學、流式細胞和分子生物學技術等。大部分單個腫瘤標志物不能滿足臨床需要，現提倡腫瘤標志物的聯合應用。一、腫瘤標志物的檢測技術血清TM檢測一般采用免疫學和生化方法。細胞內TM采用免疫組化和流式細胞技術。免疫學測定技術靈敏度高、特異性好，既可定性又可定量，主要用于血液和體液中TM的測定。（1）生化比色法：AFU、γ-GT等（2）電泳法：酶和同工酶如ALP及其同工酶，LD及其同工酶等。免疫學測定技術生物化學測定技術檢測腫瘤細胞的表面標志，對惡性淋巴瘤及白血病的診斷、分型有重要意義，可為確定臨床治療方案提供依據。以DNA重組技術、基因擴增與雜交等手段，分析基因的結構與功能改變，研究腫瘤的診斷和發病機制。流式細胞測定技術分子生物測定技術用于組織切片，穿刺細胞及脫落細胞的檢查，可確定瘤細胞的組織類型與分化程度，判斷腫瘤的惡性程度與預后。免疫組化測定技術

二、腫瘤標志物的聯合應用大部分單個腫瘤標志物敏感性或特異性偏低，不能滿足臨床需要。為提高TM輔助診斷價值和確定何種TM可作為治療后的隨訪監測指標，合理選擇幾項靈敏度、特異性能互補的TM構成最佳組合，進行聯合檢測。在聯合應用時，基本原則是選用不同性質、互補的、相對敏感的3～4個標志物組成標志群。常見腫瘤的標志物聯合檢測腫瘤類型首選標志物其他標志物肺癌NSE,CYFRA21-1CEA,Scc,ACTH,CT乳腺癌CA15-3CEA,CA549,HCG,Ferritin,PR,ER胃癌CA72-4CA19-9,CA50,CEA肝癌AFPAFU,GGT,CEA結腸癌CEACA19-9,C