臨床生物化學講義（一）山東省千佛山醫院檢驗科張麗zhangli@臨床生物化學講義（一）山東省千佛山醫院1內容簡介臨床生物化學常用的檢測方法肝膽疾病的生物化學檢測腎臟疾病的生物化學檢測血清脂類及脂蛋白生物化學檢測內容簡介臨床生物化學常用的檢測方法2臨床生物化學講義完整版課件3臨床生物化學講義完整版課件化學比色法基本原理：根據比爾定律，特定波長的光通過溶液時，溶液的吸光度與溶液的濃度成正比。待測物經過一定的化學反應生成的產物，對特定波長的光具有吸收峰，從而對物質進行定量檢測。這是最常用的一種方法。舉例：總蛋白，白蛋白的測定化學比色法基本原理：根據比爾定律，特定波長的光通過溶液時，溶5免疫比濁法基本原理：抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復合物，使反應液出現濁度。當反應液中保持抗體過剩時，形成的復合物隨抗原量增加而增加，濁度亦增加。如檢測散射光強度則為散射比濁，如檢測透過光則為透射比濁。我們所用為透射比濁舉例：前白蛋白，載脂蛋白等蛋白的測定免疫比濁法基本原理：抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復6離子選擇性電極電位法基本原理：根據能斯特方程，離子選擇性電極法通過檢測電極表面電位的改變，比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值大小來計算樣本中離子的含量。舉例：鉀、鈉、氯的測定離子選擇性電極電位法基本原理：根據能斯特方程，離子選擇性電極7電泳法基本原理：在直流電場中，帶電粒子具有向帶相反電極移動的現象。血清中的蛋白質為雙性離子，在堿性環境中帶負電荷，在電場中向正極移動。不同蛋白具有不同大小、分子量和電荷，帶電荷多，分子量小則泳動快，反之則慢，從而將不同蛋白分離。舉例:血清蛋白電泳電泳法基本原理：在直流電場中，帶電粒子具有向帶相反電極移動的8思考題簡述臨床生物化學常用的幾種檢測方法，并各舉一例。思考題簡述臨床生物化學常用的幾種檢測方法，并各舉一例。9肝膽疾病的生物化學檢測肝膽疾病的生物化學檢測1.肝臟的生理功能1.代謝功能：三大物質（糖、蛋白質和脂類）的同化、儲存和異化；核酸代謝、維生素的活化和儲藏；激素的滅活及排泄；膽紅素、膽酸的生成；鐵、銅等金屬的代謝2.排泄功能：對膽紅素和某些染料的排泄3.解毒功能：生物轉化功能（同化、異化）4.物質合成功能：凝血和纖溶因子、纖溶抑制因子的生成及對活性凝血因子的滅活清除1.肝臟的生理功能1.代謝功能：三大物質（糖、蛋白質和脂類）112.肝功能實驗的內容蛋白質代謝功能檢查膽紅素代謝檢查膽汁酸代謝檢查攝取、排泄功能檢查血清肝酶譜的檢查2.肝功能實驗的內容蛋白質代謝功能檢查12蛋白質代謝功能檢查肝臟是蛋白質代謝的主要的器官，許多蛋白質如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纖溶因子及各種轉運蛋白等都由肝細胞合成，當肝細胞受損時，合成上述蛋白的功能降低，蛋白質的合成量就減少球蛋白雖然不是肝細胞合成，但當肝實質細胞受損，間質細胞增生時，球蛋白的生成增加因此，在肝臟疾病時，可表現出血液中蛋白質質和量的改變其主要表現為白蛋白減少，纖維蛋白原減少，球蛋白的增多等因此，測定血清中蛋白質含量和分析其組分的變化，可以了解肝臟蛋白質代謝的功能蛋白質代謝功能檢查肝臟是蛋白質代謝的主要的器官，許多蛋白質如131.總蛋白、白蛋白的檢測總蛋白：雙縮脲法蛋白質是由許多氨基酸通過肽鍵相互結合而成的，二價銅離子在堿性溶液中與蛋白中的肽發生反應形成紫紅色絡合物，在540nm有吸收峰，并與蛋白含量成正比。蛋白+Cu2+→Cu–蛋白絡合物（紫紅色）1.總蛋白、白蛋白的檢測總蛋白：雙縮脲法14白蛋白的檢測溴甲酚綠終點法

血清中白蛋白與溴甲酚綠在pH4.2環境中結合生成綠色復合物，溶液由黃色變為綠色，在630nm有吸收峰，其顏色深淺與白蛋白濃度成正比，從而測出白蛋白含量。白蛋白+BCG白蛋白→溴甲酚綠復合物白蛋白的檢測溴甲酚綠終點法15與溴甲酚紫法的比較溴甲酚綠法操作簡單、快速，即可手工操作，也能自動化分析，是目前國內最常用方法。溴甲酚綠法除與白蛋白結合外，還與部分球蛋白結合，對血清白蛋白特異性較溴甲酚紫法差溴甲酚紫法測定白蛋白具有高特異性與溴甲酚紫法的比較溴甲酚綠法操作簡單、快速，即可手工操作，也16臨床意義血清總蛋白與白蛋白升高急性失水、腎上腺皮質功能亢進血清總蛋白與白蛋白降低肝細胞損害合成減少：肝炎、肝硬化、肝癌總蛋白＜60g/L,白蛋白＜25g/L，低蛋白血癥營養不良：攝入不足丟失過多：腎病、燒傷、大出血消耗增加：結核、甲亢、惡性腫瘤臨床意義血清總蛋白與白蛋白升高17血清總蛋白與白蛋白升高

TP＞80g/L（高蛋白血癥）G＞35g/L（高球蛋白血癥）慢性肝病、M蛋白血癥、自身免疫性疾病、慢性炎癥和感染如結核、麻風、慢性血吸蟲病血清TP降低生理性減少（e.g.<3y）、免疫功能抑制、先天性低TPA/G倒置肝功能損傷、M蛋白血癥。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多發性骨髓瘤血清總蛋白與白蛋白升高18血清前白蛋白測定免疫比濁法

標本中PAB與特異性抗體反應形成不溶性復合物，可在340nm測定該復合物的濁度，與同樣處理的標準品比較，得出標本中PAB的含量。血清前白蛋白測定免疫比濁法19臨床意義降低：營養不良、慢性感染、腫瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，對早期肝炎、急性重肝具有特殊診斷價值升高：Hodgkin病臨床意義降低：營養不良、慢性感染、腫瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，20膽紅素代謝檢查膽紅素主要是在網狀內皮系統中，由衰老RBC的血紅蛋白分解后形成生成后在血液中與白蛋白聚合，此時尚未與其它化合物結合，稱為非結合膽紅素（間接膽紅素或游離膽紅素）非結合膽紅素被轉運到肝臟，經肝細胞攝取后，通過肝臟的生物轉化作用，與葡萄糖醛酸結合后稱為結合膽紅素（直接膽紅素）膽紅素代謝檢查膽紅素主要是在網狀內皮系統中，由衰老RBC的血21膽紅素代謝檢查結合膽紅素由膽道排入腸腔，被細菌還原成尿膽原尿膽原一部分被腸粘膜吸收進入體內被肝細胞攝取，其中大部分又轉變成膽紅素隨膽汁排入腸腔，形成“肝腸循環”殘留腸腔的尿膽原氧化后，以糞膽素排出因此，當膽紅素生成過多或肝細胞的攝取、結合、轉運、排泄等過程發生障礙，可導致血中膽紅素增高，形成黃疸。膽紅素代謝檢查結合膽紅素由膽道排入腸腔，被細菌還原成尿膽原22總膽紅素(T-BIL)重氮鹽法

總膽紅素在強酸環境中，加入溶解劑，與重氮試劑反應，產生偶氮膽紅素膽紅素+2P-苯磺基重氮1，5-萘二磺酸鹽→2-偶氮膽紅素

生成的偶氮膽紅素，在波長545nm處有一吸收峰，吸光度的變化與總膽紅素含量成正比。總膽紅素(T-BIL)重氮鹽法23直接膽紅素(D-BIL)重氮鹽法結合膽紅素可直接與重氮試劑反應，產生偶氮膽紅素直接膽紅素+2P-苯磺基重氮1，5-萘二磺酸鹽

→

偶氮膽紅素

生成的偶氮膽紅素，引起波長545nm處吸光度的上升，吸光度的變化與直接膽紅素含量成正比。直接膽紅素(D-BIL)重氮鹽法24臨床意義

增高見于肝臟疾病，如原發性膽汁性肝硬化、急性黃疸性肝炎、慢性活動性肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黃疸、肝硬化等。肝外疾病如溶血性黃疸、新生兒黃疸、膽石癥、胰頭癌、輸血錯誤等總膽紅素也增高。臨床意義增高見于肝臟疾病，如原發性膽汁性肝硬化、急性黃疸性25膽汁酸測定酶循環法

膽汁酸被3-羥基類固醇脫氫酶及Thio-NAD特異性地氧化，生成3-酮類固醇及Thio-NADH，3-酮類固醇在3-羥基類固醇脫氫酶及NADH存在下，生成膽汁酸和NAD，循環往復從而放大微量的膽汁酸量，測定生成的Thio-NADH的吸光度與標準比較，得出膽汁酸含量。膽汁酸測定酶循環法26臨床意義血清總膽汁酸升高肝損害：肝炎、肝硬化、肝癌膽道阻塞：膽管梗阻門脈分流臨床意義血清總膽汁酸升高27血清酶學檢查肝臟是酶含量最豐富的器官，肝細胞損傷時，許多酶如ALT、AST、GGT、ALP釋放入血，導致血漿酶水平升高1.肝臟疾病時酶活力改變的機制酶合成異常肝細胞釋放增加2.分類血清酶學檢查肝臟是酶含量最豐富的器官，肝細胞損傷時，許多酶如28血清酶學檢查反映肝細胞病變和壞死的酶反映肝、膽淤滯的酶反映肝纖維化的酶反映肝細胞合成功能的酶血清酶學檢查反映肝細胞病變和壞死的酶29肝細胞病變和壞死的酶谷氨酸氨基轉移酶（谷丙轉氨酶，ALT）連續監測法

ALT催化L-丙氨酸的氨基轉移，生成丙酮酸。丙酮酸與NADH在LDH的催化下反應生成乳酸和NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰，其被氧化的速率與血清中ALT的活性成正比，在340nm處測定NADH下降速率，即可測出ALT活性。肝細胞病變和壞死的酶谷氨酸氨基轉移酶（谷丙轉氨酶，ALT）30天門冬氨酸氨基轉移酶（谷草轉氨酶，AST）連續監測法

AST催化L-天冬氨酸的氨基轉移與MDH催化的反應偶聯，使NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰，其被氧化的速率與血清中AST的活性成正比，在340nm處測定NADH下降速率，即可測出AST活性。天門冬氨酸氨基轉移酶（谷草轉氨酶，AST）連續監測法31與賴氏法的比較連續監測法多用于自動化生化分析儀，準確性好、精確性好賴氏法多用于手工操作，實驗條件要求不高，便于基層醫療單位開展，但重復性差，準確性差。與賴氏法的比較連續監測法多用于自動化生化分析儀，準確性好、精32臨床意義急性病毒肝炎ALT：500-1000U/LAST<ALT慢性肝炎、脂肪肝ALT輕度升高100-200U/L肝硬化、肝癌，AST、ALT輕度升高或正常，以AST>ALT多見一些藥物或毒物所致升高：氯丙嗪、異煙肼、奎寧和酒精、鉛、汞、四氯化碳、有機磷中毒臨床意義急性病毒肝炎ALT：500-1000U/LAST33肝細胞合成酶膽堿酯酶（AChE)實驗方法：臨床意義：肝臟合成AChE,肝實質細胞損害時，AChE活力降低肝細胞合成酶膽堿酯酶（AChE)34膽道梗阻的酶堿性磷酸酶（ALP）的測定連續監測法

無色的對-硝基苯磷酸二鈉在ALP作用下，生成在405nm處有特異吸收峰的淡黃色對-硝基苯酚，通過測定在405nm處吸光度的變化速率計算ALP活性。膽道梗阻的酶堿性磷酸酶（ALP）的測定35臨床意義血清中的堿性磷酸酶主要來自肝臟和骨骼肝膽系統疾病：阻塞性黃疸、急、慢性黃疸肝炎、腫瘤引起的膽汁淤積，可增高5~20倍黃疸的鑒別診斷：肝外膽道阻塞+患者常升高骨骼疾病：纖維性骨炎、佝僂病、骨軟化病、骨轉移癌、骨折愈合期生理性升高：生長期的兒童和青少年臨床意義血清中的堿性磷酸酶主要來自肝臟和骨骼36γ-谷氨酰轉肽酶（GGT）的檢測原理：GGT分布在膽管或膽道系統連續監測法

r-谷氨酰-3-羧基-對硝基苯胺和雙甘肽在-GT作用下，生成對硝基苯胺及r-谷氨酰雙甘肽，所釋放出的對硝基苯胺與-GT活性成正比，通過在405nm處測定對硝基苯胺的變化，可求出-GT活力。γ-谷氨酰轉肽酶（GGT）的檢測原理：GGT分布在膽管或膽道37臨床意義膽道阻塞性疾病，升高明顯，可達5~30倍急、慢性病毒性肝炎、肝硬化酒精性肝炎其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺腫瘤臨床意義膽道阻塞性疾病，升高明顯，可達5~30倍38其它酶類酶類腫瘤標志物檢測-L-巖藻糖苷酶（AFU）與原發性肝癌診斷標志（81.2%），AFP聯合檢測可提高肝癌檢出率肝纖維化的酶學檢查單氨氧化酶其它酶類酶類腫瘤標志物檢測39思考題思考題1.肝損害蛋白檢查的意義。2.血清酶學在肝膽疾病檢查的意義。名詞解釋1.結合膽紅素2.非結合膽紅素思考題思考題40填空題1.正常成人血清總蛋白正常參考值為

，白蛋白正常參考為

，球蛋白正常參考為

，A/G正常參考為

。2.臨床上多用

法測定總蛋白，

法測定白蛋白。當血清總蛋白>

g/L或球蛋白>

g/L時，稱為高蛋白血癥或高球蛋白血癥。3.血清蛋白電泳結果中，按泳動速度從正極起分為

、

、

、

、

。4.當膽紅素生成過多或肝細胞的攝取、結合、轉運、排泄等過程發生障礙，可導致血中膽紅素增高，從而發生

。填空題41腎臟疾病的生物化學檢測腎臟疾病的生物化學檢測腎臟功能排泄水分、代謝產物、廢物，保留有用物質調節水分和滲透壓調節電解質及酸堿平衡制造某些重要的生理活性物質腎臟功能排泄水分、代謝產物、廢物，保留有用物質43腎小球功能檢查腎小球濾過率（GFR）是反映腎小球濾過功能的客觀指標，用單位時間內兩腎生成的超濾液量即原尿的生成量來表示腎清除率是指雙腎于單位時間（min）內，能將多少毫升血漿所含的某物質全部清除，結果以ml/min或L/24h表示腎小球功能檢查腎小球濾過率（GFR）是反映腎小球濾過功能的客44腎清除率腎清除率45腎清除率可分別測定腎小球濾過率、腎血流量、腎小管對各種物質的重吸收和分泌作用全部由腎小球濾出，腎小管不吸收、不分泌，如菊粉，可作為腎小球濾過率測定的理想物質，能完全反映腎小球濾過率由腎小球濾出，腎小管也排泌，如尿素、肌酐等，反映腎小球濾過率不如菊粉準確全部由腎小球濾出，又被腎小管全部吸收，如葡萄糖，可作為腎小管最大吸收率的測定除腎小球濾過外，大部分通過腎小管分泌排出，如對氨馬尿酸等，可作為腎血流量的測定腎清除率可分別測定腎小球濾過率、腎血流量、腎小管對各種物質的461.內生肌酐清除率肌酐為肌肉中磷酸肌酸的代謝產物，是反映腎小球的濾過功能的較好指標原理血漿肌酐種類：內源性和外源性血漿肌酐的代謝：大部分從腎小球濾過，不被腎小管重吸收，且腎小管的排泌量很少條件：在嚴格控制飲食和肌肉活動相對穩定的情況下，血漿肌酐的生成量和在尿中的排出量較恒定，其含量的變化主要受內源性肌酐的影響內生肌酐清除率（Ccr）：指腎單位時間內，清除多少毫升血漿中的內生肌酐1.內生肌酐清除率肌酐為肌肉中磷酸肌酸的代謝產物，是反映腎小47臨床意義判斷腎小球損害的敏感指標，可較早判斷腎小球損害對腎功能的初步估價，可作為觀察腎移植成功與否的客觀指標，移植成功，該指標逐步回升，發生排斥，則下降

對臨床治療的指導意義藥物使用的參考慢性腎炎臨床分型的參考臨床意義482.血尿素氮和血肌酐的測定原理血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）主要經腎小球濾過而隨尿液排出，在腎實質受損時，腎小球濾過率降低，導致BUN和Scr在血中的濃度增加參考值BUN3.2—7.1mmol/LScr男性53—106mol/L女性44—97mol/L2.血尿素氮和血肌酐的測定原理49尿素(UREA)的測定臨床實驗室常采用脲酶速率法、離子選擇電極法等脲酶速率法脲酶催化尿素水解產生NH3和CO2。在谷氨酸脫氫酶催化下，NH3與-酮戊二酸和NADH反應生成NAD+。NADH在340nm處有特異性吸收峰，通過測定NADH下降速率與同樣處理的標準比較，得出尿素含量。尿素(UREA)的測定臨床實驗室常采用脲酶速率法、離子選擇50肌酐(CREA)的測定氧化酶比色法肌肝+H2O→肌酸肌酸+H2O肌酐酶→肌氨酸+尿素肌氨酸+H2O+O2→氨基乙酸+H2O2+甲醛H2O2+笨酚+4-氨基安替比林→醌亞胺（紅色）＋4H2O醌亞胺在500nm處有最大吸收峰，其吸光度值與CREA含量成正比。肌酐(CREA)的測定氧化酶比色法51與堿性苦味酸法比較氧化酶比色法可消除假肌酐的影響與堿性苦味酸法比較氧化酶比色法可消除假肌酐的影響52臨床意義各種嚴重腎臟疾病引起腎功能不全時可增高；上消化道出血、嚴重感染和飲食中蛋白質過多，也可導致BUN暫時升高；由于血肌酐受其他影響較小，能反映患者腎功能情況，Cr明顯升高，提示預后差臨床意義533.血尿酸（UA）的測定原理UA是體內嘌呤代謝終產物，小部分經肝分解破壞，大部分經腎小球濾過，在近端腎小管中98-100%被重吸收，故正常情況下UA的清除率較低3.血尿酸（UA）的測定原理54酶比色法尿酸酶催化UA氧化生成尿囊素和H2O2，過氧化氫在過氧化物酶的存在下與笨酚、4-氨基安替比林氧化縮和成紅色醌式染料，此染料在500nm處有最大吸收峰，其吸光度值與UA含量成正比。臨床意義血液尿酸增高常見于腎臟疾病、痛風、子癇、白血病與腫瘤J及其他疾病如慢性鉛中毒引起的腎損害、長期禁食等酶比色法554.β2-微球蛋白原理2-M在體內主要由淋巴細胞產生的一種小分子蛋白，正常人血中2-M濃度很低，可自由通過腎小球，然后在近端腎小管幾乎被全部重吸收4.β2-微球蛋白原理56免疫比濁法β2-MG與特異性抗體反應形成不溶性復合物，可在340nm測定該復合物的濁度，與同樣處理的標準品比較，得出血清中β2-MG的含量。免疫比濁法57臨床意義尿液β2-M升高是反映近端小管受損的非常靈敏和特異的指標腎小球濾過功能下降時，血β2-M水平升高臨床意義尿液β2-M升高是反映近端小管受損的非常靈敏和特異的58胱氨酸蛋白酶抑制劑c的檢測CystatinC有核細胞合成，有穩定的生成率，既使在急性炎癥反應期生成亦不受影響，經腎小球自由濾過，在腎近曲小管幾乎被完全重吸收并降解，無腎小管分泌，因此其血濃度取決于腎小球慮過率，是反映腎小球慮過率的靈敏標志物測定方法：免疫透射比濁法臨床意義：CystatinC幾乎不受腎前因素的影響，也沒有腎外的排泄途徑，是判斷腎小球濾過功能的早期診斷指標之一胱氨酸蛋白酶抑制劑c的檢測CystatinC有核細胞合成，有59尿液酶的測定尿液中含有數十種酶血清酶進入尿液：當腎小球濾過增加而腎小管重吸收功能紊亂，血清酶進入尿液，活性增強細胞酶釋放入尿液：腎小球病變、腎小管細胞破壞，間質炎癥等使細胞破壞，細胞酶釋放入尿液使溶酶體酶增加泌尿生殖系統腫瘤、炎癥、紅細胞、細菌等也可使尿酶增加常見的測定酶N-乙酰-β氨基葡萄糖（NAG）、LDH、γ-谷氨酰轉移酶、溶菌酶尿液酶的測定尿液中含有數十種酶60思考題填空題1.

是反映腎小球濾過功能的客觀指標，它用

來表示。3.血尿酸是體內

終產物，小部分經肝分解破壞，大分部經

濾過，在

中98-100%被重吸收，故正常情況下尿酸的清除率較低。4.正常人血β2-微球蛋白的參考值是

。思考題填空題61單選題1.尿酶法測定血清中尿素時，加脲酶后尿素水解首先產生（）A.氨和谷氨酸B.谷氨酸及CO2C.CO2及氨D.谷氨酸及CO2E.硫酸銨2.尿液中不受飲食和尿量影響，排出量最為恒定的是（）A.肌酸B.肌酐C.尿素D.尿酸E.以上均不是3.臨床上血中尿酸高的疾病應除外（）A.痛風B.腎功能損害C.白血病D.惡性腫瘤E.肝硬化單選題62血清脂類及脂蛋白

生物化學檢測血清脂類及脂蛋白

生物化學檢測概述血漿脂類包括游離膽固醇（FC）、膽固醇酯(CE)、磷脂（PL）、甘油三酯（TG）、糖脂和游離脂肪酸（FFA）等血漿中最多的脂質為膽固醇、PL和TG，游離膽固醇和膽固醇酯稱為總膽固醇血漿脂類以脂蛋白復合體的形式存在血漿脂蛋白分類：CM、VLDL、IDL、LDL、HDL和Lp(a)概述血漿脂類包括游離膽固醇（FC）、膽固醇酯(CE)、磷脂（64磷脂游離脂肪酸（FFA）FFA與Alb結合

其它均包含在脂蛋白中膽固醇甘油三酯磷脂FFA與Alb結合

其它均包含在脂蛋白中膽固醇65超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白661.血清膽固醇測定CH酶比色法（Trinder反應）膽固醇酯在膽固醇酯酶的作用下分解生成膽固醇，膽固醇在膽固醇氧化酶及過氧化物酶作用下最終生成紅色醌類化合物，紅色醌類化合物顏色深淺與膽固醇的濃度成正比。(波長500nm）1.血清膽固醇測定CH酶比色法（Trinder反應）67臨床意義膽固醇的監測用于評估罹患動脈硬化的風險以及對脂類/脂蛋白的代謝紊亂進行診斷和監測治療。增高見于糖尿病昏迷患者，還常見于原發性高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、腎病綜合征、總膽管阻塞、粘液性水腫、肥大性骨關節炎、老年性白內障、牛皮癬等。降低見于惡性貧血、溶血性貧血、甲狀腺功能亢進、感染、營養不良、肝硬化、急性肝壞死等。臨床意義膽固醇的監測用于評估罹患動脈硬化的風險以及對脂類/682.甘油三脂TG磷酸甘油氧化酶法（Trinder反應）甘油三脂在脂肪酶、甘油激酶等酶的作用下，生成3-磷酸甘油，再經磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化生成磷酸二羥丙酮和過氧化氫，過氧化氫與4-氨基安替比林在過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物。其顯色程度與TG成正比。（波長500nm）2.甘油三脂TG磷酸甘油氧化酶法（Trinder反應）69臨床意義血中的甘油三酯以乳糜微粒和前-脂蛋白中含量最高，它與動脈粥樣硬化的形成密切相關，甘油三酯的升高與冠心病的發生也有很大關系。增高：脂肪肝、阻塞性黃疸、動脈粥樣硬化、高脂血癥等降低：嚴重肝衰、甲狀腺功能減退等臨床意義血中的甘油三酯以乳糜微粒和前-脂蛋白中含量最高，703.高密度脂蛋白膽固醇（HDL）一般通過HDL-C亞型含量間接反映HDL水平化學修飾酶法膽固醇酯酶(CHER)和膽固醇氧化酶(CHOD)經化學修飾后，對LDL、VLDL、乳糜微粒中的膽固醇反應性降低，僅對高密度脂蛋白中的膽固醇起作用。3.高密度脂蛋白膽固醇（HDL）一般通過HDL-C亞型含量間71臨床意義HDL-膽固醇參與體內膽固醇酯逆轉運，起到抗動脈粥樣硬化作用，所以是冠心病的保護因子。HDL-膽固醇水平與AS性心、腦血管疾病發病率成負相關。HDL-C:CHOL能更好的預測心、腦動脈粥樣硬化的危險性。肝損害和腎病綜合征時，HDL-C降低臨床意義HDL-膽固醇參與體內膽固醇酯逆轉運，起到抗動脈粥樣724.低密度脂蛋白膽固醇（LDL）LDL是血清中攜帶膽固醇的主要顆粒LDL向組織及細胞內運送膽固醇，直接促使動脈粥樣硬化選擇性溶解法試劑中添加僅使LDL溶解的表面活性劑，LDL之外的脂蛋白（HDL、VLDL、乳糜微粒）由于受表面活性劑和糖化合物的阻礙而不能參與反應，在反應液中以脂蛋白形式殘存。4.低密度脂蛋白膽固醇（LDL）LDL是血清中攜帶膽固醇的主73臨床意義LDL水平升高與冠心病的發生呈正相關臨床意義LDL水平升高與冠心病的發生呈正相關745.載脂蛋白A1Apo-A1是HDL的主要載脂蛋白成分（90%）Apo-A1有清除組織內脂質和抗粥樣動脈樣硬化作用臨床意義Apo-A1血清水平與冠心病發病率負相關5.載脂蛋白A1Apo-A1是HDL的主要載脂蛋白成分（90756.載脂蛋白BApo-B是LDL的主要載脂蛋白（98%）是動脈粥樣硬化的風險指標臨床意義Apo-B水平與動脈粥樣硬化和冠心病正相關膽汁淤積也可使血清Apo-B升高6.載脂蛋白BApo-B是LDL的主要載脂蛋白（98%）76載脂蛋白的測定方法免疫透射比濁法血清中載脂蛋白的與試劑中相應單克隆抗體相結合，形成抗原抗體復合物，產生混濁，其濁度的高低與血清中APOA-1成正比。載脂蛋白的測定方法免疫透射比濁法777.脂蛋白a(Lpa)免疫透射比濁法人血清中Lp(a)與試劑中相應的特異性單克隆抗體在適當的介質中，形成抗原-抗體復合物，產生一定的濁度，濁度的高低在足量抗體存在時與抗原的含量成正比。臨床意義：Lp(a)動脈粥樣硬化的獨立危險因素。7.脂蛋白a(Lpa)免疫透射比濁法78游離脂肪酸FFA酶比色法游離脂肪酸在乙酰輔酶A合成酶(ACS)和乙酰輔酶A氧化酶(ACO)的作用下，.生成過氧化氫（H2O2）。生成的過氧化氫（H2O2）在過氧化酶和顯色劑的作用下產生美蘭，美蘭在一定光波長具有吸收峰，吸光度的大小與游離脂肪酸的濃度成正相關。游離脂肪酸FFA酶比色法79臨床意義游離脂肪酸的代謝受脂肪代謝、糖代謝和內分泌的影響，與胰島素抵抗有關。其含量升高表示患有糖尿病、甲狀腺機能抗進癥、肢端肥大癥和重癥肝功能障礙等疾病。含量降低表示患有甲狀腺機能低下、下垂體功能不全和阿狄森氏病（Addison）等疾病。臨床意義游離脂肪酸的代謝受脂肪代謝、糖代謝和內分泌的影響，80思考題甘油三脂和膽固醇的測定方法是什么那種膽固醇與心血管疾病正相關？哪種負相關？思考題甘油三脂和膽固醇的測定方法是什么81THANKYOUTHANKYOU82臨床生物化學講義（二）山東省千佛山醫院檢驗科張麗zhangli@臨床生物化學講義（二）山東省千佛山醫院83內容簡介臨床生物化學常用的檢測方法肝膽疾病的生物化學檢測腎臟疾病的生物化學檢測血清脂類及脂蛋白生物化學檢測內容簡介臨床生物化學常用的檢測方法84內容簡介糖及其代謝物的生物化學檢測心臟疾病的生物化學檢測無機離子的生物化學檢測化學比色法常見的幾種類型內容簡介糖及其代謝物的生物化學檢測85糖及其代謝物的生物化學檢測血糖及血糖濃度的調節糖尿病糖及其代謝物的生物化學檢測糖尿病自身抗體的檢測糖及其代謝物的生物化學檢測血糖及血糖濃度的調節血糖及血糖濃度的調節血糖主要是指血中的葡萄糖，正常人血糖濃度相對恒定在3.89~6.11mmol/L范圍內。通過體內相關激素對血糖的調節，使血糖的來源與去路保持動態平衡。血糖及血糖濃度的調節血糖主要是指血中的葡萄糖，正常人血糖濃度87血糖及血糖濃度的調節血糖的來源：碳水化合物的消化和單糖的吸收糖原的分解糖異生血糖的代謝去路有氧氧化產生能量（ATP），是血糖去路的主要途徑合成糖原轉換成甘油三酯、蛋白質或氨基酸等其它非糖物質當血糖濃度高于腎糖閾時，從尿中排出血糖及血糖濃度的調節血糖的來源：88糖尿病定義：糖尿病是由于與胰島素分泌絕對或相對不足和(或)胰島素抵抗而引起的代謝性疾病，其特征是高血糖癥糖尿病的分型1型糖尿病：由于胰島B細胞破壞引起的胰島素分泌絕對不足，具有酮癥酸中毒傾向2型糖尿病；由于患者胰島B細胞對胰島素不敏感，即胰島素抵抗特殊類型的糖尿病妊娠期糖尿病糖尿病定義：糖尿病是由于與胰島素分泌絕對或相對不足和(或)胰89糖尿病的診斷出現糖尿病癥狀，隨機血糖（RPG）≥11.1mmol/L空腹血糖（FPG）≥7.0mmol/L，空腹指最少8h內無熱量食物的食入口服葡萄糖耐受試驗（OGTT），血漿葡萄糖（2hPG）≥11.1mmol/L這三種方法可單獨用來診斷糖尿病，任何一種出現陽性必須用三種中任意一種復查才能正式確診糖尿病的診斷出現糖尿病癥狀，隨機血糖（RPG）≥11.1mm90糖尿病的診斷若OGTT-2h血糖≥7.8mmol/L(140mg/dl)但<11.1mmoi/L(200mg/dl)，FPG＜7.0mmol/L(140mg/dl)可以診斷為糖耐量低減(IGT).若FPG≥6.1mmol/L(110mg/dl)<7.0mmoi/L(126mg/d1)OGTT-2h血糖＜7.8mmol/L，則可以診斷為空腹血糖低減(IFG)。若FPG正常，OGTT-2h血糖＜7.8mmol/L為正常糖耐量糖尿病的診斷若OGTT-2h血糖≥7.8mmol/L(1491糖及其代謝物的生物化學檢測空腹葡萄糖口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）胰島素的測定C肽的測定糖化血清蛋白的測定糖化血紅蛋白的測定糖及其代謝物的生物化學檢測空腹葡萄糖92空腹葡萄糖空腹葡萄糖己糖激酶法：準確度和精密度高，特異性高于葡萄糖氧化酶法，為葡萄糖測定的參考方法，葡萄糖氧化酶法：適用于常規檢驗在葡萄糖氧化酶的作用下，葡萄糖氧化生成過氧化氫和葡萄糖酸。過氧化氫在過氧化物酶的存在下與笨酚、4-氨基安替比林氧化縮和成紅色醌式染料，此染料在500nm處有最大吸收峰，其吸光度值與葡萄糖含量成正比。葡萄糖＋O2+H2O→葡萄糖酸＋H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林→醌亞胺（紅色）＋4H2O空腹葡萄糖空腹葡萄糖93葡萄糖測定的臨床意義增高：（1）生理性增高，如餐后1～2h、攝入高糖食物后、情緒緊張等。（2）病理性增高，如胰島素分泌不足（糖尿病）、高血糖激素分泌過多、顱內壓增高時、嚴重脫水。減低：（1）生理性或暫時性減低，如劇烈運動后、嚴重饑餓、妊娠、使用降糖藥等。（2）病理性減低，如胰島細胞瘤、腎上腺皮質功能減退癥、甲狀腺功能減退癥、嚴重肝病。葡萄糖測定的臨床意義增高：94口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）按Who推薦的方法，常規OGTT服無水葡萄糖75g，小孩按1.75g/kg，總量不超過75g，用300ml水溶解后在5分鐘內口服，在0h，0.5h，lh，2h，3h各取血一次。測定期間不能服用降糖類藥和其他食物正常人血糖值高峰見于0.5一1h(50歲以上者后移)，2h可恢復正常范圍，3h可降至正常以下。0.5.lh、2h和3h的上限分別為9.5mmol/L、10mmol/L、7.8mmol/L和7.0mmol/L臨床意義：診斷糖耐量減退；診斷妊娠糖尿病及其他疾病伴有血糖升高口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）按Who推薦的方法，常規OGT95胰島素的測定胰島素(舊su}in，INS)是體內最主要的降血糖激素[;l]臨床上常采用葡萄糖一胰島素釋放試驗.即同時進行75gOGTT檢測。正常成人胰島素釋放高峰出現于0.5一1h峰值達基礎值的5一10倍(約8倍)3h降至空腹水平。正常人INS釋放曲線與OGTT曲線的趨勢平行。胰島素的測定胰島素(舊su}in，INS)是體內最主要的降96胰島素的測定INS水平降低常見于1型DM病人。糖耐量曲線上升而INs釋放曲線低平提示胰島素分泌絕對不足；INS水平升高可見于2型DM病人，空腹血糖升高、INS水平正常或略高INS釋放曲線峰值亦低并延遲出現約在2一3H峰值高于正常體重者，低于同體重者，峰高倍數降低。INS水平持續升高而血糖持續低平則見于胰島p細胞瘤。INS水平持續升高，而血糖水平正常見于早期糖尿病。空腹血糖正常的輕型糖尿病病人常表現為遲發的高INS水平和低血糖現象。胰島素的測定INS水平降低常見于1型DM病人。糖耐量曲線上升97C肽的測定血清c一肽又稱連接(C一PetldeC一P)在血中較穩定，不受外源性INS干擾故外周血中C肽濃度比INS更精確地反映胰島B細胞生成和分泌INS的能力l’2}。血清C肽測定常用放免法。臨床上常采用葡萄釋放試驗。血清C肽在0.5一1h達峰值為空腹基礎值的2一3倍，3h可降至空腹水平。1型DM病人其血漿C肽水平無論是空腹或餐后均明顯降低反映胰島p細胞功能衰竭或其功能極差此型必須使用胰島素治療。2型DM病人其空腹血漿C肽水平仍明顯高于正常人，反映胰島B細胞功能較差。此類病人不宜用胰島素治療而應當嚴格控制飲食C肽的測定血清c一肽又稱連接(C一PetldeC一P)在血中98糖化血清蛋白的測定糖化血清蛋白(GSP)又稱果糖胺，由于白蛋白(Alb)的半衰期比HB短，約17-20d，故可通過測定血清GSP含量反映DM病人2一3周前的血糖水平測定方法：酶法GSP→糖化的蛋白片斷→氨基酸+H2O2H2O2+染料→染料復合物+H2O所產生的顏色在550nm處有最大吸收峰，其產生速率與GSP含量成正比糖化血清蛋白的測定糖化血清蛋白(GSP)又稱果糖胺，由于白99糖化血清蛋白的測定臨床意義：本測定不受血糖波動的影響，可反映患者過去2～3周內平均血糖水平，是糖尿病診斷和近期治療療效的可靠指標。糖化血清蛋白的測定臨床意義：100糖化血紅蛋白的測定通常所說的糖化皿紅蛋白(GHb)指HBA中HB部分被糖基化后與葡萄糖結合部分HbAlc。正常成人比HBAlc為3.5%一6.8%>8.0%為比HbAlc增高臨床意義：可為較長時間段的血糖提供回顧性評價，不受短期血糖濃度的影響，主要用于評估血糖控制情況糖化血紅蛋白的測定通常所說的糖化皿紅蛋白(GHb)指HBA101糖尿病自身抗體的檢測谷氨酸脫羧酶抗體谷氨酸脫竣酶抗體(glutamicacid，decarboxylaseantibodlesGAD一Ab)是胰島細胞自身免疫反應的特異性標志。正常成人GAD一Ab為陰性(酶免法)。在糖尿病發病前期和發病時的陽性率一般都很高為60%一80%最高可達96%而在2型DM中僅為3.2%。GAD一Ab測定對遲發性成人自身免疫性糖尿病(LADA)的鑒別診斷具有決定性意義，其靈敏度為76%特異性為88%優于胰島細胞抗體糖尿病自身抗體的檢測谷氨酸脫羧酶抗體102糖尿病自身抗體的檢測胰島細胞抗體胰島細胞抗體(lsletCellautoantibodiesICAS)主要為具有補體結合活性的lgG類抗體。正常成人ICAs為陰性(酶免法)。ICAS在新診斷為1型DM病人中陽性率為70%一90%.發病1一2年內陽性率達85%，1型糖尿病兒童陽性率可達94%。隨著病情遷延陽性率逐漸下降。2型DM陽性率僅為5%一10%。有研究表明ICAs陽性者中有61%在5年內可發展成為1型糖尿病。其與GAD一AB相比在發病前期其陽性率較低故對1型DM發病的預測價值不如GAD一Ab糖尿病自身抗體的檢測胰島細胞抗體103糖尿病自身抗體的檢測胰島素抗體胰島素抗體insulinautoantibodies，IAA可阻止胰島素發揮生物學活性，是產生胰島素抵抗的重要原因。正常成人IAAs為陰性(酶免法)。IAAs陽性通常見于接受異源性胰島素治療的病人，在新診斷為1型DM病人中IAA也可出現在發病前，但其對1型DM發病的預測價值不如GAD一Ab和ICAs。IAA多見于5歲以下兒童病人，且常呈高滴度。糖尿病自身抗體的檢測胰島素抗體104思考題一、A型題：1.胰島素由何種細胞分泌

（

）A.胰島α細胞

B.胰島β細胞

C.胰腺δ細胞

D.胰島α細胞和β細胞

E.皆不是2.胰島素的化學本質是

（

）

A.蛋白質

B.類固醇

C.氨基酸衍生物

D.脂肪酸衍生物

E.核苷酸3.胰島素在體內的生物半壽期為

（

）

A.5～10秒鐘

B.5～10分鐘

C.5～10小時

D.5～10天

E.5～10月思考題一、A型題：105思考題5.有關1型糖尿病的敘述錯誤的是

（

）

A.胰島β細胞的破壞

B.胰島素絕對不足

C.常見于青少年D.常檢出自身抗體

E.胰島素抵抗6.有關2型糖尿病的敘述錯誤的是

（

）

A.胰島β細胞的功能減退

B.胰島素相對不足

C.常見于肥胖的中老年成人D.常檢出自身抗體

E.胰島素抵抗7.有關果糖胺的敘述錯誤的是

（

）

A.主要是測定糖化清蛋白

B.所有糖化血清蛋白都是果糖胺C.反映過去2～3周的平均血糖水平

D.可替代糖化血紅蛋白思考題5.有關1型糖尿病的敘述錯誤的是

（

）106思考題

E.是糖尿病近期控制水平的監測指標8.當血糖超過腎糖閾值時,可出現

（

）A.生理性血糖升高

B.病理性血糖升高

C.生理性血糖降低D.病理性血糖降低

E.尿糖9.測定血糖的標本最常采用的抗凝劑和防腐劑組合是

（

）

A.碘乙酸鈉-EDTA.Na2

B.疊氮鈉-肝素鋰

C.氟化鈉-草酸鉀

D.氟化鈉-肝素鈉

E.冰醋酸-肝素10.隨機血糖的參考值范圍為

（

）

A.2.8～7.8mmol/L

B.3.89～6.11mmol/L

C.4.5～5.9mmol/L

D.7.0～11.1mmol/L

E.﹤11.1mmol/L思考題

E.是糖尿病近期控制水平的監測指標107思考題

二、B型題：

A.己糖激酶法

B.葡萄糖氧化酶法

C.Follin-Wu法

D.鄰甲苯胺法

E.同位素稀釋－質譜分析法1.血糖測定的常規方法是

（

）2.血糖測定的參考方法是

（

）A.尿硝酸鹽

B.血漿白蛋白思考題

二、B型題：108思考題

C.尿酮體D.全血乳酸E.胰島素抗體3.懷疑糖尿病酮癥酸中毒時需檢測

（

）4.1型糖尿病常伴有哪一指標陽性

（

）5.懷疑糖尿病乳酸酸中毒時需檢測

（

）三、X型題：1.影響糖代謝的激素有

（

）A.胰島素

B.胰高血糖素

C.腎上腺素

D.生長激素思考題

C.尿酮體109思考題

E.皮質醇

F.甲狀腺激素

G.生長抑素2.升高血糖的激素有

（

）A.胰島素

B.胰高血糖素

C.腎上腺素

D.生長激素E.皮質醇

F.甲狀腺激素

G.生長抑素3.胰高血糖素的生理作用有

（

）思考題

E.皮質醇

F.甲狀腺激素

G110思考題

A.促進肝糖原分解

B.促進糖異生

C.促進脂肪動員D.促進肝臟生成酮體

E.抑制胰島素釋放4.最新的按病因將糖尿病分為以下幾類

（

）

A.Ⅰ型糖尿病

B.Ⅱ型糖尿病

C.1型糖尿病

D.2型糖尿病E.特殊類型的糖尿病

F.妊娠期糖尿病

G.糖耐量異常思考題

A.促進肝糖原分解

B.促進111思考題5.有關糖化血紅蛋白的敘述正確的是

（

）

A.包括HbA1和HbA0B.糖化血紅蛋白的形成是不可逆的C.反映過去6～8周的平均血糖水平

D.用胰島素治療的糖尿病人，應將糖化血紅蛋白作為常規檢測指標E.是最長期的糖尿病控制指標6.胰島素對糖代謝調節的主要作用有

（

）

A.促進肌肉、脂肪細胞攝取葡萄糖

B.促進糖原合成，減少糖原分解

C.促進糖氧化分解，加速糖的利用

D．促進糖轉變為脂肪，減少脂肪分解

E.抑制糖異生作用7.具有促進糖異生作用的激素有

（

）

A.胰島素

B.胰高血糖素

C.腎上腺素

D.糖皮質激素

E.生長激素思考題5.有關糖化血紅蛋白的敘述正確的是

（

）112思考題四、名詞解釋：

糖尿病五、問答題：1.

簡述2001年頒布的糖尿病診斷標準。2.

簡述在糖尿病的臨床診斷上檢測C肽比胰島素好的理論依據？思考題四、名詞解釋：113心臟疾病的生物化學檢測概述：在我國，冠狀動脈硬化性心臟病，簡稱冠心病和腦血管病是城市人口的前三位死因，是嚴重威脅人類健康的重要疾病，其病理組織學基礎都為動脈硬化。檢驗醫學在預防動脈硬化的存在、嚴重程度及判斷心肌損傷方面都能為臨床提供重要而有用的信息，使心血管病學重要組成部分。心臟疾病的生物化學檢測概述：在我國，冠狀動脈硬化性心臟病，簡心臟疾病的生物化學檢測組成：與生物化學有關的冠心病危險因素急性心肌損傷的生物化學標志物心臟疾病的生物化學檢測組成：115與生化有關的冠心病危險因素血脂：血脂危險水平臨床首選TC，HDL-C和TG作為冠心病輔助診斷指標炎癥：超敏C反應蛋白（hsCRP）被看作冠心病的獨立危險因素。在心梗發生3h，中風后12h可測到升高的CRP凝血因子：冠脈內血栓形成是冠心病發展加劇的主要因素之一，主要危險因素有：纖維蛋白原（FB）、凝血因子Ⅶ和血漿纖溶酶原激活抑制劑（PAI-1）與生化有關的冠心病危險因素血脂：血脂危險水平臨床首選TC，H116急性心肌損傷的生物化學標志物近幾年，一致認為肌紅蛋白和CK-MB亞型是急性心肌梗死早期標志物，肌鈣蛋白是心肌損傷的確診標志物。具體包括心肌酶學心肌肌鈣蛋白（包括cTnT和cTnI）肌紅蛋白Mb急性心肌損傷的生物化學標志物近幾年，一致認為肌紅蛋白和CK-117心肌酶學的檢測谷草轉氨酶(AST/GOT)乳酸脫氫酶(LDH)乳酸脫氫酶同工酶I（LDH-1）-羥丁酸脫氫酶（-HBDH）肌酸激酶（CK）肌酸激酶同工酶（CK-MB）心肌酶學的檢測谷草轉氨酶(AST/GOT)118谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定試驗方法：速率法AST作用于底物天冬氨酸和-酮戊二酸生成谷氨酸和草酰已酸，后者與還原型輔酶I（NADH2）在蘋果酸脫氫酶的作用下生成蘋果酸和氧化型輔酶I（NAD+）,監測340nm波長下NADN2吸光度的下降速率，計算AST的活性。谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定試驗方法：速率法119谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定臨床意義：AST廣泛存在于人體多種組織器官中，以心肌和肝臟含量最高，血清中AST升高主要見于心臟和肝臟疾病。在急性心肌梗死時，8-12小時開始生高，48-60小時達峰值，最高可達正常的10倍以上，4-5天恢復正常。在急、慢性肝炎及大面積肝細胞受損時，AST和ALT均可升高，主要是ALT升高，當兩種酶都升高，且AST大于ALT時，表示肝臟損傷嚴重。谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定臨床意義：120谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定肌損傷、皮肌炎、進行性肌營養不良、大面腎或肺梗塞、急性胰腺炎、溶血性貧血、燒傷均可以使AST升高。注意事項：溶血干擾AST測定，可引起不同程度的升高，因此標本嚴禁溶血。抗凝劑對酶的活性有抑制作用，尤其是草酸鹽和EDTA類的抗凝劑。谷草轉氨酶(AST/GOT)的測定肌損傷、皮肌炎、進行性肌營121乳酸脫氫酶(LDH)的測定試驗方法：速率法試驗原理：LDH作用于底物乳酸和NAD+生成丙酮酸和NADH2，監測340nm波長下NADH2吸光度的上升速率，計算LDH的活性。乳酸脫氫酶(LDH)的測定試驗方法：速率法122乳酸脫氫酶(LDH)的測定臨床意義：LDH廣泛存在于人體多種組織器官，急性心肌梗死發病12-24小時開始升高，48-72小時達峰值，一般為正常的5-6倍，最高可達10倍以上，可持續10天左右。心衰和心包炎伴肝淤血、嚴重休克和重度貧血和未治療的貧血、白血病（特別是M5型）時可中度升高。乳酸脫氫酶(LDH)的測定臨床意義：123乳酸脫氫酶(LDH)的測定皮肌炎等肌肉損傷性疾病時也可以升高。中毒性黃疸和傳染性單核細胞增多癥可顯著升高。50%LDH升高的病例與惡性腫瘤有關，尤其是腹腔和肺部腫瘤，因此測定這些部位的流出液的LDH活性更有意義。1/3的腎病患者血清LDH也可以升高。乳酸脫氫酶(LDH)的測定皮肌炎等肌肉損傷性疾病時也可以升高124乳酸脫氫酶(LDH)的測定注意事項：紅細胞內含有大量LDH，因此標本嚴禁溶血。抗凝劑對酶的活性有抑制作用，尤其是草酸鹽和EDTA類的抗凝劑乳酸脫氫酶(LDH)的測定注意事項：125乳酸脫氫酶同工酶I（LDH-1）乳酸脫氫酶是由M亞單位和H亞單位組成的四聚體，根據不同亞單位含的比例不同構成5種同工酶，心臟、腎臟和紅細胞所含的同工酶比例相近，以LD1和LD2為主試驗方法：化學抑制法試驗原理：用硫氰酸胍選擇性的抑制帶M亞基的乳酸脫氫酶同工酶（LDH2-5）活性，以速率法測定LDH活性即為LDH1的活性。乳酸脫氫酶同工酶I（LDH-1）乳酸脫氫酶是由M亞單位和H亞126乳酸脫氫酶同工酶I（LDH-1）臨床意義：心肌組織主要含有LDH1,心肌損傷時LDH1從心肌細胞溢出而使血清中此酶活性升高，有時LDH1的升高會早于總LDH。其他組織也含LDH其他同工酶，因此總LDH升高,而LDH1不升高，可以排除心肌損傷性疾病。同LDH相比，更具有器官的特異性，可以較好的反映和心肌損傷，并與其他組織器官損傷鑒別。注意事項：同LDH測定。乳酸脫氫酶同工酶I（LDH-1）臨床意義：心肌組織主要含有L127-羥丁酸脫氫酶（-HBDH）試驗原理：以-酮丁酸取代丙酮酸與NADH2為底物在LDH1的作用下生成-羥丁酸和NAD+，監測340nm波長下NADH2吸光度下降的速率，計算LDH1的活性即為-HBDH活性。臨床意義：同LDH1測定。注意事項：同LDH1測定。-羥丁酸脫氫酶（-HBDH）試驗原理：128肌酸激酶（CK）試驗方法：速率法試驗原理：CK作用于底物磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP，后者與葡萄糖在己糖激酶（HK）的作用下生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和ADP，G-6-P氧化型輔酶II在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PDH）作用下生成6-磷酸葡萄糖和還原型輔酶II（NADPH2），監測340nm波長下NADPH2吸光度的上升速率，肌酸CK活性。肌酸激酶（CK）試驗方法：速率法129肌酸激酶（CK）臨床意義：急性心肌梗死時升高，一般在發生梗死后4-6小時開始升高，24小時達峰值，且升高的幅度比AST和LDH大，3-4天恢復正常。重體力勞動、肌肉損傷、皮肌炎、系統性紅斑狼瘡、假性肥大性肌營養障礙、心肌炎、腦血管疾病、甲狀腺功能低下、長期肌肉注射都會引起此酶升高。兒童較成人輕度升高，一般出生后24小時迅速升高，可達正常成人的2-5倍，14-20天開始下降，6歲后逐漸降至成人水平。4．甲狀腺功能亢進的病人可降低。肌酸激酶（CK）臨床意義：130肌酸激酶同工酶（CK-MB）CK是由M和B兩種亞基組成的二聚體，共有三種同工酶，CK-MB在心肌中所占的比例最高試驗方法：免疫抑制法試驗原理：以CK-M亞基作抗原免疫動物制備的CK-M抗體加入CK試劑I中，與待測樣本中的CK-M亞基發生抗原抗體反應而使其失去活性，再加入CK試劑II啟動CK反應，測得的CK活性為CK-B亞基的活性。由于正常人血清中CK-BB活性幾乎為零，因此將CK-B活性結果乘以2即為CK-MB活性。肌酸激酶同工酶（CK-MB）CK是由M和B兩種亞基組成的二131肌酸激酶同工酶（CK-MB）臨床意義：肌酸激酶同工酶（CK-MB）CK-MB主要存在于心肌細胞，因此在急性心肌梗死時升高明顯。急性心肌梗死發病4小時開始升高，24小時達峰值，48小時可降至正常水平，比CK總活性更特異，CK-MB活性大于CK總活性5%即有診斷意義。肌酸激酶同工酶（CK-MB）臨床意義：肌酸激酶同工酶（CK-132肌酸激酶同工酶（CK-MB）巨CK和線粒體同工酶（CK-Mt）干擾CK-MB測定，可使該方法測定的CK-MB假性升高，有時甚至會出現大于總活性。其主要原因是：巨CK是由于IgG與CK結合后使得酶的構型發生改變，CK-M抗體無法與CK-M亞基結合；CK-Mt是由兩種相同亞基組成的二聚體，氨基酸組成和氨基末端的氨基酸與CK-M亞基不同，因此CK-M亞基也無法與之發生免疫反應，而不能抑制其活性，測定結果再乘以2，就會出現CK-MB假性升高，甚至高于總活性的情況。一般CK-MB活性大于總活性的30%就應該考慮上述原因。肌酸激酶同工酶（CK-MB）巨CK和線粒體同工酶（CK-Mt133思考題一、

A型選擇題1下列危險因素中，哪種指標可更準確地預報冠心病發生

（

）

A.TC

B.TG

C.HDL-C

D.TC／HDL-C2.有關CRP的描述下列哪項不正確

(

)

A.是炎性淋巴因子刺激肝臟和上皮細胞合成,感染、創傷、手術可導致升高。

B.CRP的升高反映了動脈硬化存在低度的炎癥過程和粥樣斑塊的脫落。

C.在AMI發生后6h在血中才能測得升高的hsCRP。E.AMI患者中hsCRP和TC/HDL-C聯合分析，可大大提高預測冠心病的準確性。思考題一、

A型選擇題134思考題3.動脈血栓形成的主要危險因素中，下列哪項指標除外

（

）

A．血漿纖維蛋白原

B.血漿凝血活酶轉變加速素

C.

凝血因子Ⅷ

D.血漿纖溶酶原激活抑制劑4.下列哪項不是冠心病的確定危險因素

(

)

A.纖維蛋白原增高

B.C-反應蛋白增高

C.

HDL增高

D.凝血因子異常5.下列哪項指標通常被作為心肌損傷確診標志物

(

)

A.CK

B.CK-MB

C.LD1

D.CTn6.下列哪項不屬于傳統心肌酶譜檢測指標

(

)思考題3.動脈血栓形成的主要危險因素中，下列哪項指標除外

135思考題

A.CK-MB

B.LD1

C.CK

D.CTn二、

X型選擇題1.目前作為冠心病輔助診斷的首選指標是

(

)

A.LP(a)

B.TC

C.HDL-C

D.TG2.動脈血栓形成的主要危險因素是

(

)

A.血漿纖維蛋白原

B.凝血因子Ⅶ

C.血漿纖溶酶原激活抑制劑

D.飲酒3.眾多冠心病危險因素中,最有價值的可及早預防和治療的指標是

(

)

A.吸煙

B.高血脂

C.C反應蛋白

D.凝血因子異常思考題

A.CK-MB

B.LD1

136思考題4.目前國內外一致認為可作為急性心肌梗死早期診斷標志物的是(

)

A.AST

B.肌紅蛋白

C.CK-MB亞型

D.LD5.傳統心肌酶譜包含下列哪種指標

(

)

A.LD1

B.CK

C.Mb

D.CK-MB6.目前作為心肌損傷確診標志物的是

（

）

A.CTn

B.CK

C.Mb

D.LD1四、問答題.簡述心肌酶譜及其特性。簡述巨CK現象及其原因思考題4.目前國內外一致認為可作為急性心肌梗死早期診斷標志物137無機離子的生物化學檢測體液中的電解質概述何謂微量元素無機離子的生物化學檢測無機離子的生物化學檢測體液中的電解質概述體液中的電解質概述體液中存在的離子稱為電解質，具有維持體液滲透壓的作用，保持體內液體的正常分布。陽離子有鈉（Na+）、鉀（K+）、鈣（2+）和鎂（2+），陰離子主要有氯（Cl-）、碳酸氫根（HCO3-）、磷酸根、硫酸根及有機陰離子。體液中的電解質概述體液中存在的離子稱為電解質，具有維持體液滲139體液中的電解質概述體液電解質分布及平衡細胞外液的主要陽離子和陰離子為Na+和Cl-，而K+卻主要分布在細胞內液，這種分布主要依賴于細胞膜上的鈉鉀泵的主動轉運功能。鈉鉀泵將Na+從細胞內泵出到細胞外，同時將細胞外的鉀收回到細胞內。因此，鈉鉀泵在維持細胞內外電解質濃度的平衡起著重要的作用。體液中的電解質概述體液電解質分布及平衡140體液中的電解質概述陰離子間隙是指細胞外液中所測的陽離子總數和陰離子總數之差，計算為：AG=（Na++K+）－（Cl-+HCO3-）。滲透壓指支配生物膜兩側水穿過膜，使其達到一定平衡的壓力mOsm/kg（水）=1.86（Na+）mmol/L+葡萄糖mmol/L+尿素mmol/L+9體液中的電解質概述陰離子間隙141體液中的電解質概述電解質排斥效應指的是血漿中固體物質部分（血脂和蛋白質）約占總體血漿的7%，而水相只占93%，電解質都在水相中存在。因固體物質改變，引起水相改變，使電解質結果不真實。體液中的電解質概述電解質排斥效應142何謂微量元素微量元素是指占人體總重量1/10000以下，每人每日需要量在100mg以下的元素。人體常見的必需微量元素有鐵、銅、鋅、錳等何謂微量元素微量元素是指占人體總重量1/10000以下，每人143無機離子的生物化學檢測血清鉀的測定血清鈉的測定血清氯的測定血清二氧化碳的測定血清鈣的測定血清磷的測定血清鐵的測定血清鎂的測定無機離子的生物化學檢測血清鉀的測定144血清鉀的測定實驗名稱：血清鉀（K+）實驗方法：離子選擇電極間接法實驗原理：利用電極表面電位的改變，比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值來計算樣本中K+的濃度。注意事項：溶血或延遲分離血清可使血清鉀濃度升高，應及時分離血清，置于有塞試管內冰箱保存。血清鉀的測定實驗名稱：血清鉀（K+）145血清鉀的測定臨床意義：增高排鉀減少。如急、慢性腎功能衰竭、鹽皮質激素缺乏、少尿癥、尿路阻塞、排泄困難等。釋放過多。如嚴重急性容血，呼吸性和尿毒癥性酸中毒，組織分解亢進（創傷，手術感染或瘤組織大量壞死等）。腎上腺皮質功能減退。血清鉀的測定臨床意義：146血清鉀的測定補鉀過多。如大劑量應用青霉素鹽，長期應用潴鉀利尿劑以及輸入過多久存的庫血等。血清鉀大于7mmol/L可引起嚴重的肌肉、心肌甚至呼吸肌抑制、如心跳緩慢、心電圖異常、心室纖顫或心停搏等；神經肌肉效應為震顫，感覺異常、軟弱、甚至遲緩性麻痹等。、血清鉀的測定補鉀過多。如大劑量應用青霉素鹽，長期應用潴鉀利尿147血清鉀的測定２．降低．攝入不足。如長期禁食、厭食或少食而未補鉀。丟失過多。胃腸道失鉀是嚴重致死性低鉀血癥的重要原因。腎丟失Ｋ+可由于原發的腎小管疾病或腎外性疾病。增加腎丟失Ｋ+的因素有：①尿流速增快。②釋入遠曲小管的Ｎａ+增多或難以重吸收的陰離子增多。③堿血癥。④高醛固酮血癥。⑤鉀負荷增多等。鉀向細胞內轉移也可引起低鉀血癥，如堿中毒、鋇中毒、周期性麻痹和服多量胰島素與葡萄糖。低血鉀影響神經、肌肉興奮性，表現為室上性心動過速、心傳導阻滯、室性期外收縮和室性心動過速，便秘、腹脹、肌無力等。如果血Ｋ+低于２ｍｍｏＩ/Ｌ可有明顯肌肉壞死。血清鉀的測定２．降低．148血清鈉的測定實驗名稱：血清鈉（Ｎａ+）實驗方法：離子選擇電極間接法實驗原理：利用電極表面電位的改變，比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值來計算樣本中Ｎａ+的濃度。血清鈉的測定實驗名稱：血清鈉（Ｎａ+）149血清鈉的測定臨床意義：１．增高：腎上腺皮質功能亢進、垂體前葉腫瘤、腦外傷、腦血管意外等。過度補鈉，且伴有腎功能不全。原發性醛固酮增多癥。高滲性脫水主要見于水排出過多而無相應的鈉丟失，如水樣瀉、尿崩癥、大汗和換氣過度等。糖尿病人也可由于尿排出過多而造成高鈉血癥。血清鈉的測定臨床意義：150血清鈉的測定２.降低：腎外因素：可由于嘔吐、腹瀉、腸瘺、胃腸吸收、大量出汗、燒傷、出血等引起。由于伴有不同比例的水丟失，在鈉丟失大于水丟失時才出現低鈉血癥。腎性因素：如滲透性利尿、服用利尿劑或腎上腺功能低下及腎生成減少所生成減少所致的醛固酮形成過少以及急、慢性腎功能衰竭或失血性腎病。由于鈉丟失過多，使體內鈉減少，若水丟失小于鈉丟失則出現低鈉血癥。血清鈉的測定２.降低：151血清鈉的測定低鈉血癥還可見于總體鈉不缺乏，但因抗利尿激素分泌過多或分解滅活緩慢，使腎小管重吸收水分增多，出現稀釋性低鈉血癥。臨床上還有高張性低鈉血癥，即細胞外液（ＥＣＦ）中有高濃度的蛋白質，葡萄糖或脂質，使ＥＣＦ滲透壓增高，因此，細胞內水分向細胞外轉移可使ＥＣＦ鈉被稀釋而表現為低鈉血真癥，此型無細胞水腫表現，反而有神經細胞脫水的癥狀。血清鈉的測定低鈉血癥還可見于總體鈉不缺乏，但因抗利尿激素分泌152血清氯的測定實驗名稱：血清氯（ＣＩ-）實驗方法：離子選擇電極間接法實驗原理：利用電極表面電位的改變，比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值來計算樣本中Cl-的濃度。血清氯的測定實驗名稱：血清氯（ＣＩ-）153臨床意義：１.增高：急性或慢性腎小球腎炎所致的腎功能不全或尿道輸尿管梗阻及心功能不全時，腎臟排泄氯化物減少，使血清氯化物濃度增高。氯化鈉攝入過量，如靜脈輸入過量氯化物等。過度換氣所致的呼吸性堿中毒，如癔病或某些藥物刺激呼吸中樞等。脫水癥，失液大于失鹽，氯離子相對濃度增高。血清氯的測定臨床意義：血清氯的測定154２.降低：嚴重嘔吐、腹瀉或造瘺時，丟失大量含氯的胃腸液、胰液、膽汁等。慢性腎上腺皮質功能和腎功能不全，因排尿過多而丟失大量氯化物。長期應用某些利尿劑如氯噻嗪類，以及大量出汗均可丟失過多的氯離子。長期饑餓或無鹽飲食使氯攝入不足。嚴重糖尿病，因排尿過多，同時有酸中毒也可造成低氯血癥。低鈉血癥常伴有低氯血癥，如無嘔吐或其他過多丟失氯的原因時，血清氯化物濃度降低多為水的稀釋所致。血清氯的測定２.降低：血清氯的測定155