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杏仁核腦片場電位的記錄及其應用杏仁核腦片場電位的記錄及其應用

杏仁核腦片場電位的記錄及其應用

1.2.3藥物加入試驗過程中應用的藥物均加入到灌流腦片的人工腦脊液中.

統計學處理:采納SPSS10.0統計分析軟件進行數據錄入和整理,試驗數據用x±s表示,組間采納方差分析.P0.05為差異具有統計學意義.

2結果

2.1杏仁核與海馬場電位的比較海馬CA1區場電位的幅度為(1.46±0.10)mV(n=10,圖1).BLA的電位為(0.13±0.05)mV(n=9),其放大倍數為海馬的10倍,杏仁核的場電位只有海馬CA1場電位的1/10.

2.2杏仁核場電位的藥理學特性在灌流的人工腦脊液中加入0.1μmol/L谷氨酸,可見場電位明顯增大,洗去谷氨酸后場電位基本恢復至基線的水平(圖2A).灌流液中加入α氨基羥甲基惡唑丙酸(AMPA)受體拮抗劑CNQX10μmol后

,場電位的幅度顯著下降,進一步加入N甲基D天冬氨酸(NMDA)受體阻斷劑APV100μmol后,場電位幾乎消逝,洗去CNQX和APV后,場電位基本恢復至加藥前的水平(圖2B).

2.3杏仁核LTP的誘導在場電位記錄穩定10min后,間隔10min應用兩串高頻刺激外囊,同時觀看場電位幅度和斜率的變化狀況.BLA場電位的幅度和斜率的變化趨勢全都(表1),兩串高頻刺激后,場電位明顯增大,之后場電位漸漸下降,高頻刺激15min后場電位基本穩定,但仍顯著大于基礎值(n=9,P0.01),這種增加作用持續30min以上.通過對場電位斜率用基礎值標準化后,可見兩串高頻刺激后30min增加的場電位的斜率仍舊維持在基礎值的(146.1±6.9)%(n=9,P0.01,圖3).表1兩串高頻刺激前后場電位幅度和斜率的變化

3爭論

杏仁核又稱杏仁復合體,是大多數哺乳類動物共有的結構,位于顳葉內.杏仁核可分為很多大小不等的核團,通常將這些核群分為皮質內側群、基底外側核群和前杏仁區、皮質杏仁移行區兩大過渡區[4].杏仁核與皮層和皮層下結構有著廣泛的纖維聯系,隨著神經科學的進展,杏仁核的功能倍受關注[5].然而由于解剖結構的關系,很難通過電生理的手段直接記錄到在體動物杏仁核的神經細胞的活動,而且在體試驗易受到血壓、呼吸和血腦屏障等的影響.腦片標本具有有序的神經元和纖維排列及比較完整的神經解剖通路,可在解剖顯微鏡下直接定位,便于電生理操作,腦片能夠復制出整體動物大多數電生理現象,模擬在體試驗,因而腦片是討論杏仁核功能的比較抱負的標本.

腦片上應用場電位記錄的方法討論神經細胞的活動多數是在海立刻進行[6].有討論[7]報道,通過記錄杏仁核的場電位討論杏仁核功能,然而這類討論都是在國外的討論室開展,而且試驗儀器都是國外生產,價格昂貴.我們應用國產SWF2W微電極放大器和RM6240記錄系統,價格廉價,而且可以穩定地記錄到杏仁核的場電位.杏仁核的神經細胞分布較稀疏,場電位小,大約只有海馬的1/10,試驗中要求信號的放大倍數為記錄海馬CA1的10倍.由于信噪比小,因此記錄穩定的杏仁核場電位難度極大.在腦片保持良好活性的前提下,記錄系統要求抗干擾強,噪音的幅度應小于0.01mV.記錄系統具有良好的屏蔽和接地后,假如還有比較大的50Hz的噪音,可使用噪音消退器去除該頻率的干擾,但又不影響信號本身的提取.在腦片保持良好活性及記錄系統具有很強的抗干擾作用的狀況下,只要信號放大到肯定程度,就可以在杏仁核記錄到場電位.

在杏仁核的腦片上,刺激外囊可以在BLA記錄到突觸后反應,來自皮層的神經纖維經外囊投射至BLA,刺激外囊可模擬皮層的興奮輸入[8].由皮層投射到BLA的纖維主要是谷氨酸能神經元,BLA記錄到的主要是興奮性的突觸后電位.在灌流液中加入谷氨酸,場電位明顯增大;加入AMPA受體阻斷劑CNQX后,場電位的幅度顯著降低,進一步加入NMDA受體拮抗劑APV后,場電位幾乎完全被阻斷,洗去阻斷劑后場電位基本恢復,提示外囊至BLA的突觸聯系主要以谷氨酸為神經遞質,由AMPA受體和NMDA受體介

杏仁核腦片場電位的記錄及其應用

導,以前者為主.也提示在灌流液中加入藥物,通過觀看藥物對場電位的作用探討藥物對杏仁核功能的影響.

腦片場電位常用于討論海馬的突觸可塑性如LTP和LTD,LTP和LTD被認為是學習記憶的基本機制[9].討論表明杏仁核參加心情情感相關的學習與記憶過程,提示杏仁核的場電位有可能誘導出LTP.結果表明,我們的試驗系統在杏仁核可以誘導出LTP,試驗中相隔10min予以外囊高頻刺激,觀看到記錄的BLA場電位的幅度和斜率均明顯增大,而且持續時間在30min以上.杏仁核的LTP可能參加了學習與記憶的過

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