艾滋病實驗室的質量管理第1頁，課件共59頁，創作于2023年2月

艾滋病實驗室質量管理

實驗室質量管理包括質量保證、質量控制和質量評價。第2頁，課件共59頁，創作于2023年2月一、質量保證(QA）質量保證是指從接收樣本起，到實驗室發出報告止，為確保實驗室最終報告結果的正確性所進行的全過程，包括采取各種行政和技術上的措施和方法。第3頁，課件共59頁，創作于2023年2月行政支持（行政部門關心實驗室發展、建設，人員穩定，足夠經費）人員培訓（新人員上崗前培訓獲得合格證書，接受復訓，篩查實驗室人員至少2年一次。檢測人員應分為檢驗人、復核人、簽發人。復核人和簽發人應具備對檢測過程進行分析和解決問題的能力）環境條件（實驗室設置、建筑、設備符合要求）標本采集、運送和處理檢測方法和試劑的選擇設備維護與校準（酶標儀、移液器、高壓滅菌器、溫度計等）文件和文件管理第4頁，課件共59頁，創作于2023年2月檢測方法和試劑的選擇使用經國家食品藥品監督管理局注冊批準的試劑，選擇敏感性高，特異性好的，根據參比室組織的國家級艾滋病診斷試劑臨床質量評價各實驗室更換試劑批號時，應進行平行試驗所有試劑盒要嚴格按照要求條件保存。第5頁，課件共59頁，創作于2023年2月設備維護與校準第6頁，課件共59頁，創作于2023年2月目前常用的艾滋病檢測設備類安全類：生物安全柜、洗眼器、普通冰箱、超低溫冰箱、高壓滅菌器。檢測類：微量加樣器、搖擺平臺、全自動蛋白印跡儀、普通離心機、震蕩器、移液器、恒溫水浴、酶標儀+洗板機、病毒載量儀、流式細胞儀其它：計算機、空調第7頁，課件共59頁，創作于2023年2月規范化管理的意義遵照《全國艾滋病檢測技術規范》、《全國艾滋病檢測工作管理辦法》。檢測質量保證延長設備的使用時間便于設備的管理節約資源第8頁，課件共59頁，創作于2023年2月HIV實驗室的設備維護日常維護定期檢定和校準第9頁，課件共59頁，創作于2023年2月設備對環境的普通要求電源：電壓一定要匹配，插線板合適，專用的.經常停電或電壓不穩的實驗室，建議配備穩壓器和不間斷電源環境：清潔，溫、濕度合適良好通風長時間不用的設備，注意特別容易壞第10頁，課件共59頁，創作于2023年2月酶標儀第11頁，課件共59頁，創作于2023年2月移液器的檢定一年至少檢定一次需檢定的原因-經常使用-要求高的準確性第12頁，課件共59頁，創作于2023年2月超低溫冰箱定期清理灰塵過濾器（建議每月一次）

第13頁，課件共59頁，創作于2023年2月超低溫冰箱注意事項要求環境溫度控制在28度以下空間的清潔穩定的電源供應不宜放得太擠第14頁，課件共59頁，創作于2023年2月生物安全柜HEPA-過濾裝置容納有害生物氣體。需提供人員保護也為產品提供保護(按等級而定)二級生物安全柜第15頁，課件共59頁，創作于2023年2月生物安全柜的維護每年檢定一次安全柜保持所有操作在窗扇4英寸以內清潔物質和污染物隔離開，減少相互干擾使用后及時清理柜內不宜放太多的物品，不能儲藏化學物質第16頁，課件共59頁，創作于2023年2月離心機的維護第17頁，課件共59頁，創作于2023年2月轉頭、套桶第18頁，課件共59頁，創作于2023年2月使用離心機的注意事項離心力、離心速度平穩的儀器臺不用時，松轉頭；使用時，擰緊轉子保持平衡使用安全：蓋子要嚴使用后要擦干或開蓋至晾干防止液體泄漏到腔內第19頁，課件共59頁，創作于2023年2月高壓滅菌器第20頁，課件共59頁，創作于2023年2月滅菌器的維護壓力表需要定期檢驗（一年兩次）等氣壓和溫度下降到正常后,再開閥高壓時,放入指示紙,以便判定滅菌效果第21頁，課件共59頁，創作于2023年2月設備的檢定和校準

對檢驗的準確性和有效性有影響的儀器設備必須進行檢定和校準。

有國家計量檢定規程的儀器設備，由法定計量檢定機構或經計量行政部門授權的技術機構進行檢定；

沒有國家檢定規程的，可以由廠家、自行檢定和校準。第22頁，課件共59頁，創作于2023年2月制訂儀器設備檢定計劃。經檢定的儀器設備校驗結果貼上標志：合格標志為綠色、準用標志為黃色、停用標志為紅色。凡檢定不合格或超過檢定有效期的儀器設備，一律不得用于檢驗工作。對超過檢定期，但暫時不用的儀器設備，貼上停用標志。

第23頁，課件共59頁，創作于2023年2月強制檢定的工作計量器具目錄

HIV檢測強制檢定儀器：加樣器、酶標儀、溫度計、高壓滅菌器

第24頁，課件共59頁，創作于2023年2月強制檢定的周期，由執行強制檢定的計量檢定機構根據計量檢定規程確定。

屬于強制檢定的工作計量器具，未按照本辦法規定申請檢定或者經檢定下合格的，任何單位或者個人不得使用。

第25頁，課件共59頁，創作于2023年2月文件及文件管理

1.標準操作程序

(SOP)

2.實驗原始記錄表

3.結果報告

4.樣品登記和保存

5.文件存檔

第26頁，課件共59頁，創作于2023年2月

1.標準操作程序

(SOP)

艾滋病檢測實驗室要建立覆蓋主要工作內容的SOP文件。

SOP由各崗位工作人員起草，實驗室主任審定，并應定期修訂。修訂應該在實驗室主管人員的領導下進行，每年至少一次。所有工作人員要在所從事工作的SOP文件上簽名表示已經閱讀并掌握了有關內容。.第27頁，課件共59頁，創作于2023年2月艾滋病檢測實驗室應建立以下SOP1、樣品的接收、登記、處理、保存和運輸2、檢測方法和步驟3、試劑使用方法和保存4、儀器的使用維護和校準5、實驗中的質量控制要求及程序6、結果解釋與報告7、保密程序8、實驗室數據、相關文件記錄與保存9、不確定樣本的追蹤和處理10、實驗室安全防護及實驗室的的清理和消毒11、職業暴漏第28頁，課件共59頁，創作于2023年2月SOP通常包括以下內容（1）標題和編號（2）編寫和修改日期（3）編寫和修訂人員姓名（4）方法、目的和應用范圍（5）相應的職業規范（6）檢測設備和試劑（7）安全防護相關步驟（8）結果的解釋和報告（9）附錄（包括相關的附加文件如標準表格、設備和試劑盒說明書等。）

第29頁，課件共59頁，創作于2023年2月寫你所做的做你所寫的第30頁，課件共59頁，創作于2023年2月2、實驗原始記錄表

應按實驗要求，設計操作的原始記錄表，標明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，便于指導實驗人員加樣。要注明試劑廠家、測定方法、批號、有效期、操作人員和復核人員姓名及檢測日期。

第31頁，課件共59頁，創作于2023年2月ELISA原始記錄快速原始記錄表實驗室樣本交接記錄08高壓滅菌器.實驗室所有設備的使用記錄和維護記錄第32頁，課件共59頁，創作于2023年2月

3、結果報告分析結果及發出檢測報告前，應注意須在試劑盒及外部質控結果滿足要求的前提下，對樣品進行分析。試劑盒及外部質控不合格，樣品需要重新檢測復核人對檢測結果進行仔細復核并對結果提出結論簽發人對試驗結論進行審核、分析、總結、簽字第33頁，課件共59頁，創作于2023年2月4、樣品登記和保存

收到樣品后，建立唯一編碼，及時登記有關信息，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、職業、送檢單位、人群類別、檢測結果、送檢日期、報告日期、通訊地址第34頁，課件共59頁，創作于2023年2月5、文件存檔

實驗原始記錄表、打印數據、膜反應條帶或其照片、檢測記錄表、標本登記、標本保存記錄以及儀器設備維修和校準記錄等都應該妥善存檔保存10年以上。最好同時使用計算機保存各種文件和記錄。

第35頁，課件共59頁，創作于2023年2月二、質量控制(QC)p15

質量控制是指為確保實驗工作正常進行而在每一步實驗過程中必須采取的各種措施。是對檢驗結果的即時性評價，通過對質控結果的連續觀察，監測實驗室結果的精密性。第36頁，課件共59頁，創作于2023年2月

（一）抗體檢測的統計學室內質量控制

在所有實驗中必須包含有試劑盒內部對照質控血清和室內質控品（外部對照質控血清）。1、試劑盒內部對照質控品即為試劑盒內提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內部對照用于判斷每次實驗的有效性，但不能做為室內質控品使用。內部對照是質量控制的基礎。每一次檢測必須使用內部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。內部對照結果無效必須重新實驗。

第37頁，課件共59頁，創作于2023年2月2、室內質控品（外部對照）為非試劑盒組份的外部質控品，是為了監控檢測的重復性而設置的，包括強陽性、弱陽性和陰性質控血清。也可以只設置一個弱陽性質控，以該試劑盒臨界值（cutoff）的2-3倍為宜。外部質控品的作用是，判斷該批臨床樣本檢測的有效性，因此，每次實驗必須包含室內質控品，其結果無效，必須重新實驗。室內質控品可以是商品或實驗室自行制備第38頁，課件共59頁，創作于2023年2月室內質控品的保存

（1）按一周實驗用量分裝、分類、標記、封口、-20℃凍存。

（2）外部對照血清不可反復凍融，一旦融化后應該存放2-8℃，一周內使用。第39頁，課件共59頁，創作于2023年2月3、室內質控品的使用每一次實驗必須使用室內質控品，以便監控實驗的重復性。同時可以了解各批試劑盒的批間差異或孔間差異，繪制質量控制圖。

第40頁，課件共59頁，創作于2023年2月統計室內質控的主要方法----

建立質控圖最常用的質控圖是Levey-Jennings質控圖，該圖使用累計和技術或趨勢分析技術的圖形提供系統偏移和漂移的狀況。下面以ELISA方法檢測HIV抗體為例，描述建立質控圖步驟：第41頁，課件共59頁，創作于2023年2月（二）質控圖的建立及應用

1.建立質控圖參數2.繪制質控圖3.質控圖的判斷和分析4.繪制和分析質控圖的要點5.變異系數（CV）分析6.灰區

第42頁，課件共59頁，創作于2023年2月1、建立質控圖參數

（1）算術平均值(x)代表一組S/CO值的平均值。為了統計學上有顯著性意義，應該采用至少20次(天)所測得的外部對照質控血清S/CO值結果計算出平均值。（2）標準差(s)是描述樣本與均數之間離散程度的一個指標，是與對照值的均值有關的預期范圍。一組S/CO值的標準差以s表示。

第43頁，課件共59頁，創作于2023年2月

（3）控制限：外部對照S/CO值的±2s

（4）變異系數(cv)，是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的一個指標，可以用來衡量檢測的重復性或精密度。

第44頁，課件共59頁，創作于2023年2月計算公式為：

Σx

x=──

n

s

計算公式為：───────

∑(xn-x)2

s=───────

n-1

cv

計算公式為：

s

cv=──x100%

x

第45頁，課件共59頁，創作于2023年2月2、繪制質控圖

質控圖是把檢測數據與計算出的“控制限”進行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并有按時間順序點入的質控血清測定值。

第46頁，課件共59頁，創作于2023年2月質控圖的繪制步驟是

（1）在常規條件下，對同一批血清連續測定20次（天）或以上，獲得一組S/CO值，求均數(x)和標準差(s),超出2s或3s的數據不應刪除。

（2）將均值(x)和標準差(s)分別在質控框架圖中標示出來。以S/CO值作縱座標(Y軸)，每一次(天)試驗作橫座標(x軸)，繪制質控圖。

第47頁，課件共59頁，創作于2023年2月 （3）從第21次起，將每次檢測的質控血清的結果依次點入該質控框架圖中，檢驗進入質控狀態。

第48頁，課件共59頁，創作于2023年2月質控圖第49頁，課件共59頁，創作于2023年2月3、質控圖的判定和分析

（1）告警：外部對照的S/CO值超出±2s，系統處于告警狀態，應予以注意，是否可以繼續檢測需要進一步觀察。

(2)失控：外部對照的S/CO值超出±3s，稱為失控，則本次實驗結果不能被接受。可能是系統誤差或外部對照滴度下降造成。

（3）移漂：連續幾個（3-5次）外部對照S/CO值都落在均值的一側則稱為位移，提示實驗條件發生了較大的變化。應重新繪制質控圖。

（4）趨勢：連續幾個（5-7個）外部對照質控血清S/CO值幾乎按一個方向分布時稱為趨勢，通常由參數的緩慢改變引起。

第50頁，課件共59頁，創作于2023年2月4、繪制和分析質控圖的要點

（1）要在最佳條件下建立質控圖參數。

（2）用S/CO比值繪制質控圖。

（3）由專人負責建立質控圖，每月定期召開質控分析會，討論本月的質量控制情況。每次檢測之前都應了解質控結果。

（4）建議長期和穩定地使用一種質量好的試劑盒。

第51頁，課件共59頁，創作于2023年2月（5）更換不同廠家的試劑盒后，必須重新繪制質控圖。改用新批號試劑盒如結果偏離較大也應重新制作質控圖。使用新批號或不同廠家的試劑盒必須在質控圖上注明使用日期。

（6）如發現質控值劇烈位移或失控，應填寫報告單，上交質量負責人，分析原因并決定是否發出檢測報告。

（7）使用新批次的外部對照質控血清時，必須重新繪制質控圖。

（8）及時發現質控結果失控

第52頁，課件共59頁，創作于2023年2月

5、變異系數（CV）分析

變異系數(cv)小于20％，表示外部對照處于穩定狀態。

6、灰區

通常把臨界值上下10％的范圍定為灰區，對灰區標本應進行復測。

第53頁，課件共59頁，創作于2023年2月三、質量評價（