全自動流動注射分析儀總氰化物分析方法（異煙酸-巴比妥酸方法）（2一200）pg/L1.1方法原理本方法原理為：首先樣品溶液在pH<2的酸性環境中，在145°C溫度條件下和紫外燈開啟的前提下，通過在線消解可將溶液中絡合的氰化物消解為簡單游離氰化物；然后通過在線蒸餾途徑可將簡單氰化物以氣態氰化氫形式蒸餾出來，從而使其與其它干擾物分離開；接下來氣態的氫氰酸通過氣體滲透膜后，氫氧化鈉溶液將其吸收并再進樣，在中性條件下,氰離子與氯胺T的活性氯反應生成氯化氰，氯化氰與異煙酸發生反應生成戊烯二醛，戊烯二醛與兩個巴比妥酸分子縮合生成紅紫色染料，最后的反應溶液通過流通池在600nm處進行比色檢測。1.2方法模塊主要參數及實驗室需求操作環境溫度:15°C-30°C相對濕度：<75%模塊電源：交流220V±22V,50Hz±1Hz。模塊功率：約300W噪聲：小于70db防火：擁有防火設備通風：有良好的通風環境位置：遠離咼電磁干擾遠離咼振動設備1.3方法主要指標線性范圍： 2yg/LCN--200yg/LCN-檢出限（DL）： 0.26yg/LCN-重復性（RSD）：三2%樣品分析頻率：16樣/小時1?4分析單元流程圖窘動進樣器樣品管.樺品^總氟化物分析方法流路圖排廢1再進樣加熱反應器2E????-,廠C三通2二通3fc:-*濟繞反應器24師：|：|I廢液扳窘動進樣器樣品管.樺品^總氟化物分析方法流路圖排廢1再進樣加熱反應器2E????-,廠C三通2二通3fc:-*濟繞反應器24師：|：|I廢液扳茹繞反應器1Y）OY]I氯按「'[顯色劑"排廢3*環繞反應器3數據處理工作站圖1總氰化物分析單元流程圖1.5方法主要測試參數主要測試參數可以在進樣程序中直接進行設置，進樣程序詳見下表:表1總氰化物分析方法進樣程序設置對象參數設置對象參數洗針時間10注射時間80進樣時間140出峰時間30進載流時間30峰寬50到達閥時間200樣品周期時間220蠕動泵轉速35設定溫度1165設定溫度260紫外燈鹵素燈1.樣品保存及前處理2.1樣品采集保存方法水樣采集時，首先檢驗是否存在硫化物干擾（見2.2.1.）,如果沒有硫化物干擾，應立即加氫氧化鈉固定，一般每升水加0.5g固體氫氧化鈉，當水樣酸度較高時，應多加固體氫氧化鈉，保證樣品的pH>12，初步處理好樣品后，將樣品存于聚乙烯塑料瓶或硬質玻璃瓶中,置于暗處存放，避免紫外光的照射。如果不能及時測定樣品，采樣后必須將樣品存放在4°C的冰箱中，并且應在24h內進行分析，如果沒有硫化物的存在，樣品儲存期不應超過14天。2.2樣品前處理（針對不同干擾物進行不同處理）水樣上機之前需要進行進一步的簡單處理，首先對于部分樣品可考慮適當加入EDTA,可提高待測物消解效率。水樣的濁度和色度對反應均有干擾，但通過蒸餾可避免這些干擾。同時通過在線蒸餾可避免非揮發性化合物的干擾。尤其注意，渾濁的樣品上機之前一定要用0.45“m的膜過濾后，然后上機進行分析，否則大顆粒物可堵塞管路。除此之外，還有甲醛，硝酸鹽/亞硝酸鹽，氧化劑（活性氯，硫氰酸根，硫代硫酸鹽）和硫化物等物質也對過程反應有干擾。2.2.1硫化物的干擾及消除硫化物的干擾分為直接干擾和間接干擾，直接干擾是硫化物和氰根離子與顯色劑進行反應，其反應的程度和硫化物、氰根離子和氯銨-T的濃度有關，一般情況下，氰化物溶液中可允許存在高達lOppm的硫化物而沒有明顯干擾。間接干擾是硫化物和氰根離子可反應生成硫氰酸根，此反應和溶液的pH值有關，隨著溶液的pH值增加，此反應加速。由于硫化物在蒸餾的過程中產生的硫化氫對反應有干擾，采集樣品時，滴一滴樣品在乙酸鉛試紙上，如果試紙變黑，則顯示有硫化物存在于樣品當中，先不要加氫氧化鈉固定，應先加碳酸鎘或碳酸鉛固體粉末，生成黃色的硫化鎘或黑色的硫化鉛沉淀，再利用乙酸鉛試紙檢測是否使試紙變黑，如果確定試紙不變黑，則過濾溶液除去硫化物，沉淀物用1%氫氧化鈉洗滌（用氫氧化鈉固定樣品），合并濾液和洗滌液，除去硫化物干擾。注意：避免長時間接觸和大量使用碳酸鎘和碳酸鉛，防止其它絡合氰化物的損失和氰根離子被封閉在沉淀中。2.2.2氧化劑的干擾及消除影響結果：氧氣、臭氧和活性氯等氧化劑對反應有干擾。因為氧化劑會將游離的氰根離子或簡單絡合氰化物氧化生成氰酸鹽而使結果偏低。如活性氯會分解大部分的氰根離子，使結果偏低。干擾測定：樣品采集時，滴一滴樣品在淀粉一碘化鉀試紙上，如果試紙顯示藍色，說明存在干擾。消除途徑：水樣中加入一些抗壞血酸固體，過一段時間再用淀粉碘化鉀試紙檢測，如不顯示藍色證明干擾已被消除，然后在每升水樣中加入0.6g抗壞血酸。其他途徑：亞砷酸鈉和亞硫酸鈉也用來消除此干擾，可量取兩份體積相同的樣品，向其中一分樣品投加淀粉一碘化鉀試紙1-3片，加1+5硫酸溶液酸化，用1.26%的亞硫酸鈉滴至淀粉碘化鉀試紙由藍色變為無色為止，記下用量，另一份樣品不加試紙，僅加上述用量的亞硫酸鈉溶液，進行蒸餾檢測。有文獻報道亞砷酸鈉和硼氫化鈉的效果較好，因為抗壞血酸、硫代硫鹽鈉、二氯亞錫、草酸、磷酸等還原劑本身還原效率不高，而且還會帶來其它干擾。通常情況下，如果水樣中含有50ppm的余氯，可加O.1g/L的亞砷酸鈉反應來消除其干擾，這個反應可在加入氫氧化鈉之前或之后進行。需注意，有時加入亞砷酸鈉會帶來正干擾，而且亞砷酸鈉是毒性物質，需謹慎使用。硼氫化鈉還原效果非常好，一般來說，如果水樣中含有50ppm的余氯，可加O.lg/L的硼氫化鈉來消除干擾，硼氫化鈉需在加入氫氧化鈉之后再加入樣品中，避免水樣中的酸性物質消耗硼氫化鈉而導致效果不佳，除此之外，硼氫化鈉還可消除甲醛的干擾。2.2.3硝酸鹽和亞硝酸鹽的干擾及消除影響結果：硝酸鹽和亞硝酸鹽的存在會使測定結果偏高，在蒸餾的過程中，硝酸鹽和亞硝酸鹽生成的亞硝酸會與水中的一些有機物生成肟，肟在測試的條件下則會分解為氫氰酸，從而對檢測形成正干擾。消除途徑：加入適量的氨基磺酸分解亞硝酸根離子，通常情況下，lmg亞硝酸根離子需要加入2.5mg氨基磺酸。注：對于游離氰根離子的測定，硝酸鹽、亞硝酸鹽的存在對反應結果無干擾，而對于總氰的測定來說，亞硝酸鹽對反應有干擾（硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽時，對反應存在干擾）。在酸性條件下，亞硝酸鹽的干擾為負干擾，在堿性條件和UV消解的條件下，亞硝酸鹽的干擾是正干擾。對于地表水樣品，亞硝酸鹽的干擾更為明顯，一般的還原劑可以用來消除亞硝酸鹽的干擾，例如亞硫酸氫鈉、亞砷酸鈉或硼氫化鈉。2.2.4甲醛的干擾影響結果：甲醛和氰根反應，生成腈，會對反應產生負干擾。消除途徑：將氫氧化鈉加入樣品溶液中之后，方可加入硼氫化鈉可消除甲醛干擾，硼氫化鈉必須在加入。或者在每100ml樣品中加入2ml5%的乙二胺溶液，最多可消除50ppm的甲醛干擾。2.2.5油類物質的干擾利用1+9的醋酸將樣品溶液的pH調節至6.0-7.0,使用三氯氟乙烷、氯仿、正己烷或異辛烷進行萃取，使用的溶劑體積為樣品體積的20%。一次萃取就可消除油類物質對反應的干擾。萃取結束后，立即將溶液的pH調為12。注：每500ml樣品加入5-8g的NaCl可提高萃取和分離效率。2?2?6碳酸鹽的干擾影響結果：含有高濃度碳酸鹽的廢水，加酸蒸餾時釋放出大量的co2,影響蒸餾的同時,也會消耗吸收液中的氫氧化鈉，使的吸收液中的氫氧化鈉含量降低。消除方式：建議將樣品進行在攪拌的前提下，緩緩加入熟石灰或氫氧化鋇，同時攪拌，使水中的碳酸鹽生成碳酸鋇沉淀，用濃硫酸調節溶液的pH值，使溶液PH達到12.5，最后用0.45m的膜過濾后再進行分析。2.實驗前準備工作3.1實驗用試劑及器皿試劑：本方法使用的主要稀釋用液體試劑為17MQ去離子水。其余試劑如下表2總氰化物分析方法用試劑名稱純度推薦廠家總氰化物標準溶液50mg/L氫氧化鈉分析純磷酸二氫鉀分析純氯胺-T分析純1,3-二甲基巴比妥酸分析純異煙酸優級純磷酸85%優級純涉及到的主要玻璃器皿和其他設備工具如下表3玻璃器皿及配套工具名稱數量200mL容量瓶每個方法不少于7個1000mL容量瓶不少于5個500mL試劑瓶不少于2個1000mL試劑瓶每個方法不少于5個1mL刻度移液管5個2mL刻度移液管5個5mL刻度移液管5個10mL移液管TOC\o"1-5"\h\z洗瓶 1個洗耳球 1個藥勺 不少于2個100mL量筒 2個相關器皿清洗方法：所有試劑用瓶均需在10%（體積比）稀硫酸中浸泡24小時后，使用自來水沖洗干凈，然后用蒸餾水反復沖洗6—7遍后，方可使用，否則將影響檢測靈敏度。尤其注意樣品用器皿及其他溶劑器皿不可用洗滌劑進行洗滌，否則嚴重影響檢測準確度。

表4主要實驗小設備設備名稱電子天平（精確至o.oig）超聲波清洗器去離子水機（制備電阻率M17MQ去離子水）鐵架臺磁力攪拌器3.2實驗用管路管理每次開始實驗前，需將進樣毛細管和所有的進試劑的毛細管插入去離子水瓶中，用去離子水清洗管路15min，然后將各個進試劑毛細管插入相應的試劑瓶中，繼續運行15min后,可以進行空白及樣品的測量。每次結束實驗后，蒸餾試劑進液管需先用1M的氫氧化鈉溶液清洗15min,然后用去離子水清洗20min后方可關機。泵管使用注意事項：（1） 需經常更換卡泵管的位置，實驗結束關機后，應將泵管卡頭松開，若泵管疲勞嚴重，應將泵管兩頭交換后使用或更換新泵管，防止因泵管疲勞引起檢測誤差的發生。（2） 蠕動開始工作前，需要在泵的輥軸上滴加硅油，防止泵管的磨損。3.3試劑的配制注：本方法使用17兆歐的去離子水配制相關事件。配制好的試劑使用之前建議通過超聲波清洗器脫氣30分鐘，備用上機。0.025M氫氧化鈉（載流和吸收液）稱取l.Og氫氧化鈉（NaOH）溶解于1L去離子水中，放置于塑料瓶中，現配現用。每次使用之前必須進行脫氣。.3.3.2緩沖溶液稱取97.0g磷酸二氫鉀（KH2PO4）,用去離子水定容至1L,于4°C冰箱中保存，有效期為一個月。3.3.3氯胺—T稱取2.0g氯胺-T溶解于500mL去離子水中，等待完全溶解后放置于棕色玻璃瓶中，現配現用。每次使用之前必須進行脫氣。3?3?4異煙酸/巴比妥酸試劑準備1L棕色容量瓶，首先加入500mL去離子水，然后稱取12.0g氫氧化鈉加入其中，待完全溶解以后，繼續稱取16.8g二甲基-巴比妥酸加入其中，將二甲基-巴比妥酸攪拌溶解完全，再加入13.6g異煙酸，攪拌至完全溶解，用去離子水定容至1L刻度線，儲存于棕色玻璃瓶中，可穩定保存一個月（如果溶液中有不溶物質需用濾紙過濾后再使用）。每次使用前必須進行脫氣。3.3.5磷酸蒸餾試劑取1000容量瓶，首先加入800ml水至其中，然后加入50mL磷酸（優級純），待冷卻后定容至1L刻度線，備用。3.4氰根標準溶液的配制1000mg/LCN-儲備液的配制在1L的棕色容量瓶中，加入800ml水，再加入2.0g氫氧化鉀（KOH），完全溶解后，加入2.503g氰化鉀（KCN）,稀釋到刻度，搖勻備用。100mg/LCN-使用液的配制吸取l.OmLlOOOmg/LCN-儲備液，用0.025mol/L氫氧化鈉溶液稀釋到100ml。2mg/LCN-使用液的配制吸取2.0mL100mg/LCN-儲備液，用0.025mol/L氫氧化鈉溶液稀稀釋到100ml。3.4.4CN-工作曲線標液的配制表5CN-工作曲線標液配制表工作液（臨用現配）ABCDEF F濃度(Ug/LCN-)200.0100.050.020.010.05.0 2.0吸取2mg/LCN-儲備液的體積數，用0.025M氫氧化鈉，稀釋到200ml。20.010.05.02.01.00.5 0.23■分析數據每次實驗，主要涉及到的指標及測試數據有：工作校準曲線，精密度（RSD）,檢出限（DL）,質控樣品的測定，樣品的加標回收數據等，實例如下文顯示。4.1工作曲線圖2總氰方法標準曲線數據及線性關系圖0.3580.2800.2020.1240.046-0.0310.3580.2800.2020.1240.046-0.031試樣4|嵯高:0.0003609式Ihllhl5CW-

樣高面.00214:0.72試樣6|嵯高:0.00920illli?°：3.01試樣T|lI1O：0-017401噓面謨：5.T9試樣8|^:0.03442雌面?°：11.53試樣9IlJlH：0.086291醴面^：28.73試樣山皐高:D.17127I鮭面-fR.：56.40試樣11|lhia：0.3467905.5 992.4 1079.4 1166.3 1253.2 1340.2 1427.1 1514.1 1601.0 1688.0 1774.9 1861.9 1948.8 2035.8 2122.7 2209.7 2296.6 2383.6 2470.5 2557.5 2644時間(s) 圖3標準樣品主界面譜圖顯示表6工作曲線表（0-200.0）yg/L標準濃度（Ug/L）峰高峰面積回算濃度（Hg/L）00.00040.09470.6120.00210.71711.6850.00923.00635.61100.01745.792010.40200.034411.525520.25500.086328.725349.811000.171356.399697.372000.3467116.8524201.264?2精密度RSD（20卩g/L）：連續測試15次，軟件默認選擇連續7次數據進行計算，得到的結果統計

即可

圖4精密度RSD主界面顯示圖(20yg/L)

表7RSD的測定數據0.0560.0：3：30.009-0.014試11|峰14:0.枳

樣高岡0342811.35試樣14|^：0.03505睚面&：11-51試樣14|^：0.0：3：362睚面&：11-21試樣14?縞：0.032T6幢面0.0560.0：3：30.009-0.014試11|峰14:0.枳

樣高岡0342811.35試樣14|^：0.03505睚面&：11-51試樣14|^：0.0：3：362睚面&：11-21試樣14?縞：0.032T6幢面?.R.：10.94-0.0386655.414:LIfe樣高0344411.37'itdlldli14:LIfe粗高IS0358911.75■It嵯峰14:LIfe樣高0341211.316731.86808.26884.66961.07037.37113.77190.1T266.5T342.9T419.37495.T7572.17648.57724.87801.27877.67954.08030.48106.88183RSD測定次數吸光度回算濃度(Ug/L)111.351619.96211.508020.22311.213219.72410.936819.24511.367719.98611.745920.63711.310619.89選擇其中一組數據，詳細數據和計算結果如下：RSD=2.1%4?3檢出限檢出限：EPA方法DL=t(n-1a=o.99)*(s)，當n=7時t=3.14，檢出限：0.16yg/L-0.0125-0.020443T4.24449.y4525.64601.346TT.IJ4752.185131.Z5Z07.IJ5Z8Z.T5358.45509.S55S5.5-0.0151-0.0178W13幗高：0.00205-0.0125-0.020443T4.24449.y4525.64601.346TT.IJ4752.185131.Z5Z07.IJ5Z8Z.T5358.45509.S55S5.5-0.0151-0.0178W13幗高：0.00205幄面租066W13幗高：0.00219幄面親：。72W13幗高：0.00226帳面-fa：0.73W13幗高：0.00237雌面^：0.74WI3腥高：0.00215嵯面積：。69W13嵯高：0.00208籬面稅：0.68W13懈高：0.00214睡面-?.：0.67-0.0230414T.1圖5總氰化物方法檢出限分析譜圖

表8總氰化物方法檢出限實驗數據DL測定次數吸光度回算濃度.（Ug/L）10.66441.5920.67651.6130.72831.7040.71651.6850.67081.6060.73791.721.630.68831.63選擇其中一組采納的數據，詳細值及結果：檢出限：0.16yg/L4.4質控樣品的測定采用國家環境保護總局標準樣品研究所的總氰質控樣（202243,標準值54yg/L，不確定度±5.2mg/L）,對方法及儀器進行檢驗，測定結果如下：證明儀器穩定可靠。表9總氰化物分析方法質控樣分析數據樣品名稱樣品屬性已知濃度回算濃度120224354±5.252.9220224354±5.254.6320224354±5.251.34.安全注意事項5.1氰化物的注意事項?實驗過程要戴一次性口罩，帽子，防護眼睛，穿實驗服，在通風櫥中進行！穿過的實驗服立即清洗，接觸氰化物之后應立即清洗手、臉！?氰化物標準溶液具有劇毒，禁止與標準溶液的直接接觸、吸入與吞入！?氰化物遇酸會生成劇毒的氫氰酸氣體，禁止氰化物與酸的直接接觸！?使用吸耳球吸取氰化物標準溶液及其稀釋液，切勿吸入口中！?氫氧化鈉、鹽酸溶液具有腐蝕性，避免直接接觸，注意不要弄在衣物上！?撒出來的氰化物用硫酸亞鐵方法處理！急救處理：口服中毒者，可用1：2000高錳酸鉀溶液洗胃，