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學(xué)院:生命科學(xué)學(xué)院班級:2011級生物技術(shù)學(xué)號:20111070088:器械pH上升的趨勢,所以易選用軟毛刷和優(yōu)質(zhì)洗滌劑。用去污粉。因其中含有砂粒。會嚴(yán)3次,不留死角。晾干或烘干備用。對已用過的器皿,凡污染者液等,不同物品其有效滅菌壓力和時間不同,如培養(yǎng)用液、橡膠制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高壓滅菌10min;布類、玻璃制品、金屬器械等用103kPa(121.3℃)高壓滅菌++pHpH1mol/L0.1mol/LpH值調(diào)5.8~6.0;12120min0.5Pa12115~20min。0時,打開滅菌鍋,取出培養(yǎng)瓶,放平,待培養(yǎng)基凝固后瓊脂、蔗糖、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)等,成符合要求的培養(yǎng)基。將胡蘿卜的貯藏根(根的)表面后切割成小塊接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)外植體脫分化產(chǎn)生愈傷組織。對愈傷組織進(jìn)行繼代培養(yǎng)可以得到的愈傷組織。配制胡蘿卜愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種胡蘿卜肉質(zhì)根誘導(dǎo)愈傷組織產(chǎn)生配制胡蘿卜愈傷組織增殖培養(yǎng)基接種胡蘿卜愈傷組織進(jìn)行增殖0.5mg/L,3%1NHClorNaOHPH值到所須值(趁熱將培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)用的容器(三角瓶等)中,注意培養(yǎng)基黏附到瓶口或(一)外植體材料:取6—8cm長的胡蘿卜一段進(jìn)行以下操作(3塊,均勻分布,封好瓶口。2~3個切塊。(3)2~3182441125288燙傷瓶中,有5塊卜塊變黑。原因可能是在接種過接種器械灼燒滅菌后未待其冷卻就接觸到了卜愈傷組織誘導(dǎo)實驗中,被污染了4瓶,說明在整個實驗過,一定要注意無菌蘿卜塊切得太小了。外植體經(jīng)過等處理,可在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),誘導(dǎo)圖一.致密型愈傷組 圖二.疏松型愈傷組植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)與其次生代謝產(chǎn)物β-卜素的分離檢(9g/L)瓊脂,pH5.8換成卜愈傷組織懸浮培養(yǎng)用:MS+2,4-D0.4mg/L+3%(30g/L)置于80~120r/min搖25℃暗培養(yǎng)7天甲醇萃取β-卜素。將收集好的細(xì)胞放入圓底燒瓶中,每克試樣加10ml1μg。培養(yǎng)后重細(xì)胞鮮重的測β-卜素所用細(xì)胞鮮重A452(三懸浮培1號-1懸浮培2號-新鮮胡11g懸浮培養(yǎng)的卜細(xì)胞中含β-卜素1g新鮮卜細(xì)胞中含β-卜素染污染可能發(fā)生在撥散和轉(zhuǎn)移愈傷組織過培養(yǎng)前后細(xì)胞鮮重減少的原因可能是三角瓶圖一.左為懸浮培養(yǎng)1號瓶 圖二.左為污染的懸浮培養(yǎng)瓶右為懸浮培養(yǎng)2號 而產(chǎn)生特定結(jié)構(gòu)和功能的組織或(如形成芽、根或胚狀體等,這叫再分化。這些都充分說明植物細(xì)胞具有與植株相同遺傳信息的能力——細(xì)胞的全能性植物組織培養(yǎng)是在0.5cm3 圖一.愈傷組織再分化培養(yǎng)一周 圖二.愈傷組織再分化培養(yǎng)一周3【1】.細(xì)胞工程實驗[M].:高等教育【2】,等.蘿卜誘導(dǎo)愈傷組織的影響因素[J].西南學(xué)報,2006,28(1)【3】.植物生物技術(shù)[M].:科學(xué)技術(shù)【4】,,河村嘉一郎;獼猴桃試管苗愈
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