愈邦對燒傷早期創(chuàng)面一氧化氮、內(nèi)皮素、丙二醛的影響【摘要】目的探討新型燒傷敷料“愈邦”對燒傷早期創(chuàng)面的可能作用機制。方法建立大鼠深Ⅱ°燒傷模型，實驗組以愈邦外用包扎，對照組以1%SDAg包扎，空白對照組不用任何藥物，分別測定傷前皮膚、傷后3、6、12、24h各組創(chuàng)面中的NO、ET-1的含量以及傷前皮膚、傷后6、24h各組創(chuàng)面MDA含量，并計算各組ET-1/NO的比值。結(jié)果實驗組創(chuàng)面ET-1、NO、MDA含量較對照組及空白對照組均低，實驗組的ET-1/NO的比值較空白對照組和對照組為低，并且較早地趨向于傷前比值。結(jié)論愈邦燒傷敷料可能通過調(diào)節(jié)創(chuàng)面的ET-1、NO的含量，優(yōu)化ET-1/NO比值，從而減少創(chuàng)面組織細胞的脂質(zhì)過氧化損害程度；并且其作用優(yōu)于磺胺嘧啶銀。

【關鍵詞】愈邦；一氧化氮；內(nèi)皮素-1；丙二醛

【Abstract】ObjectiveTostudytheinfluenceofYubanginthewoundafterthermalSDseventy-eightrats(250g～300g)ofbothsexeswererandomlydividedinto4group(n=6)wasservedasnonburnedcontrolandthecontentofnitricoxide(NO)，endothelin-1(ET-1)andMDAinthebackskinwasmeasuredafterexposedto37℃waterfor20seconds，thentheET-1/NOwasothergroupswereexposedto80℃waterfor20secondsresultinginadeepseconddegreeburninvolvingabout20%surfacethe2ndgroup，nothingwasusedtoprotectthewoundanditservedasblankcontrol3rdgroupwasusedthe1%SDAgtoprotectthewoundandservedascontrol4thgroupwasusedtheYubangtoprotectthewoundservedasexperimental3，6，12，24hours，thecontentofNO，ET-1wasmeasuredinthewoundofthe2nd，3rd，4th6，24hoursthecontentofMDAwasmeasuredinthewoundofthe2nd，3rd，4ththe2nd，3rd，4thgrouptheET-1/NOwascalculatedinthe3，6，12，24hoursafterthermalThecontentofET-1，NO，inthe2nd，3rd，4thgroupwashigherthanthatinthe1stgroupandthecontentofMDAinthe3rd，4thwashigherthanthatinthe1st，2ndET-1/NOinthe4thgroupswaslowerthanthatinthe2ndgroupand3rdThecontentofNO，ET-1andMDAinthewoundcanincreaseafterthermalinjury，andtheYubangmayberegulatethecontentofET-1andNO，anddecreasetheproductionofMDAinthewoundaftertherapeuticinjury.

【Keywords】Yubang；nitricoxide(NO)；endothelin-1(ET-1)；MDA

磺胺嘧啶銀一直以來是用于燒傷創(chuàng)面較好的外用藥物，但因其過量吸收常可引起局部或全身的毒副反應。近年一種新型納米銀醫(yī)用無菌敷料——“愈邦”已在不少醫(yī)院應用，臨床初步顯示了其在諸多方面優(yōu)于傳統(tǒng)的磺胺嘧啶銀敷料。但對于其發(fā)揮作用的機制，除抗感染的作用外，對于創(chuàng)面早期的影響卻知之甚少。本實驗通過對SD大鼠深Ⅱ°燒傷后分別采用“愈邦”敷料和1%磺胺嘧啶銀及空白對照組的皮膚組織中NO、ET-1和丙二醛(MDA)的測定，探討“愈邦”對燒傷創(chuàng)面早期影響的可能機制，為臨床推廣應用豐富理論依據(jù)。

1材料與方法

動物模型及分組健康純種SD大鼠78只，體重250～300g，雌雄不限(湖南省中醫(yī)研究院動物室提供)。隨機分為4組，傷前對照組(n=6)、實驗組A組(n=24)、對照組B組(n=24)、空白對照組C組(n=24)。實驗前2天以10%Na2S背部脫毛。將1%戊巴比妥鈉按30～35mg/kg腹腔注射麻醉后，將A、B、C組動物背部浸入80℃水溫中20s，造成深Ⅱ°燒傷模型(病理證實)，面積約20%BSA，并于腹腔內(nèi)注入生理鹽水15～20ml抗休克。A組以愈邦納米銀敷料包扎，B組以1%SDAg紗布包扎，C組不用任何藥物，創(chuàng)面暴露。傷前對照組背部浸入37℃水溫中20s不作其他處理。傷后動物單籠喂養(yǎng)，自由飲食。A、B、C組于傷后3、6、12、24h4個時相點在背部取材(每時相點分別為6只)，檢測NO、ET-1，傷后6、24h兩時相點取材測MDA，傷前對照組取材檢測NO、ET-1、MDA，取材后存于-70℃冰箱內(nèi)待測。

觀察指標與方法NO、ET-1、MDA試劑盒購自解放軍東亞研究所。ET-1測定按非平衡免疫法測定［1］；NO含量測定采用Griess法測定；MDA采用改良八井木夫法測定，蛋白含量按紫外分光光度計法測定。

統(tǒng)計學處理實驗結(jié)果以x±s表示，采用SPSS10統(tǒng)計學軟件包以配對及組成t檢驗，檢測水準α=、α=取雙側(cè)。

2結(jié)果

創(chuàng)面NO含量測定結(jié)果傷后NO上升，3組均較傷前明顯升高，對照組和空白對照組在大多數(shù)時相點較實驗組明顯升高，但對照組和空白對照組比較兩者差異無顯著性。見表1。表1傷后不同時相點NO含量比較(x±s，mmol/mg)

注：與傷前對照組比較，*P；與B、C組比較，**P；***P

創(chuàng)面ET-1含量的測定結(jié)果傷后ET-1含量上升，3組較傷前均有明顯上升，對照組、空白對照組較實驗組顯著升高。對照組和空白對照組差異無顯著性，見表2。表2傷后不同時間ET-1含量比較(x±s，mmol/mg)

注：與傷前對照組比較，*P；與B、C組比較，**P，***P。

創(chuàng)面MDA含量結(jié)果傷后MDA含量上升，實驗組上升不明顯，但對照組和空白對照組明顯上升，且對照組和空白對照組含量差異無顯著性。見表3。

表3傷后不同時間MDA含量比較(x±s，mmol/mg)

注：與傷前對照組比較，*P；與B、C組比較，**P

傷后各時相點ET-1/NO比值比較在傷后3h，三組比值接近，但在其他時相點，實驗組較對照組和空白對照組為低，且逐步趨向傷前。而對照組、空白對照組在24h仍升高。見表4。表4傷后不同時間ET-1/NO的比值

3討論

MDA作為細胞脂質(zhì)成分多價不飽和脂肪酸的氧化產(chǎn)物，其濃度間接反應了細胞膜的氧化受損程度［2］。NO對于深Ⅱ°燒傷早期創(chuàng)面保持足夠的血流灌注起重要作用，它通過抑制血管平滑肌的收縮，減少血小板聚集及中性粒細胞粘附，減少炎性細胞釋放介質(zhì)對創(chuàng)面的影響［3］。而過量的NO亦可造成創(chuàng)面損傷。ET可以直接損害血管內(nèi)皮細胞，使其活力下降；細胞內(nèi)MDA量增加、SOD下降，內(nèi)皮素及其受體和NO等的改變與燒傷早期損害的各種指標存在明顯的相關性。創(chuàng)面高濃度的ET不僅直接損傷組織細胞，使?jié)B出和水腫加重，與組織水腫呈正相關［4］，而且使創(chuàng)面微血管長時間處于收縮狀態(tài)，則血栓形成，組織進一步缺血缺氧。而ET-1作為中性粒細胞的有效趨化因子可使中性粒細胞大量聚集導致創(chuàng)面再損傷。在本實驗中，實驗組NO、ET-1的含量在多數(shù)時相點較對照組及空白對照組明顯降低；MDA的含量也較對照組和空白對照組明顯降低，且在傷后各時相點差異無顯著性，而對照組和空白對照組在傷后24h較6h明顯增加。通過對燒傷早期創(chuàng)面ET-1/NO比值測定，發(fā)現(xiàn)傷后3h各組比值較接近，但較傷前增高明顯，而在隨后的各時相點實驗組逐步接近于傷前，對照組和空白對照組在傷后24h仍然增高。正常情況下，體內(nèi)ET和NO存在相互制約的關系［5］，處于動態(tài)平衡，ET和NO之間存在負反饋調(diào)節(jié)機制，ET通過其β受體促進NO釋放，而NO則通過cGMP途徑抑制ET的生成，同時NO也可通過調(diào)節(jié)ET受體而對ET的釋放產(chǎn)生反饋作用，使二者保持平衡，這對于維持臟器恒定血供極為重要。

本實驗通過對1%SDAg與納米銀“愈邦”敷料分別處理燒傷創(chuàng)面后相應時相點的ET-1、NO、

MDA的測定，其結(jié)果說明了燒傷早期創(chuàng)面損傷與創(chuàng)面ET-1和NO的含量變化有關，納米銀“愈邦”外用后可能通過調(diào)節(jié)創(chuàng)面ET-1、NO的含量和比值而減少創(chuàng)面組織細胞脂質(zhì)過氧化損害程度。實驗組MDA含量的減少說明納米銀“愈邦”除了直接抑制ET-1的生成或(和)釋放，減輕了對于創(chuàng)面的損害，同時更為重要的可能是通過優(yōu)化ET-1/NO的比值，使微血管處于適度的舒縮狀態(tài)，從而保障了創(chuàng)面的有效血供。

“愈邦”是通過納米科學技術(shù)，將天然礦物質(zhì)銀以物理、化學的微觀研究理論為基礎，以當代精密儀器和先進技術(shù)為手段，以醫(yī)用無菌紗布為載體加工而成的超精細銀顆粒的創(chuàng)面外用材料?，F(xiàn)代研究表明，物質(zhì)顆粒越小，其離子溶出度越大；顆粒越小，其表面積越大，生物活性越高?！坝睢本哂袠O強的滲透性，滲入創(chuàng)面組織，產(chǎn)生生物熱反應，亦有助于清除損傷組織釋放的過氧化物質(zhì)、炎性介質(zhì)，以此達到保護創(chuàng)面的目的。

“愈邦”應用《醫(yī)用微生物學》中“使菌體變性或沉淀”的經(jīng)典理論，對大多數(shù)致病菌有殺菌或抑菌作用，控制創(chuàng)面炎癥，亦可進一步調(diào)理或減輕損傷性因子和炎性介質(zhì)對組織的損傷，有利創(chuàng)面愈合?！緟⒖嘉墨I】

1賈曉明，朱兆明，曾強，等.燒傷早期大鼠血漿、皮膚創(chuàng)面及臟器內(nèi)皮素的動態(tài)變化.解放軍醫(yī)學雜志，1997，22(1)：40-427(9)：37.

2OhkawaH，OhishiN，YagilipidperoxidesinanimaltissuebythiobarbitutiBiolChem，1979，95(2)：351-358.

3Llindblow，JCassatoL，Yregard，etofnitricoxideintheregulationofburnoedma，proteinuriaandurine，2000，(26)