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熒光介紹及熒光顯微鏡的使用Leica圖象分析儀組成部分顯微鏡

熒光顯微鏡可見(jiàn)光顯微鏡成象系統(tǒng)照相機(jī)圖象采集軟件一、熒光顯微鏡的使用優(yōu)點(diǎn)：檢出能力高對(duì)細(xì)胞的刺激小能進(jìn)行多重染色用途：物體構(gòu)造的觀察熒光的有無(wú)、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析熒光的種類自發(fā)熒光：物質(zhì)受光激發(fā)產(chǎn)生的固有熒光二次熒光：物質(zhì)借熒光色素受光激發(fā)產(chǎn)生的熒光自發(fā)熒光二次熒光熒光的性質(zhì)吸收光保持固有的熒光特性熒光波長(zhǎng)＞激發(fā)波長(zhǎng)熒光強(qiáng)度極小于激發(fā)光的強(qiáng)度有不同程度的衰減熒光強(qiáng)度取決于激發(fā)光強(qiáng)度、被檢物濃度、熒光效率

熒光顯微鏡的種類

透射式

落射式落射熒光顯微鏡原理汞燈激發(fā)濾色鏡分色鏡吸收濾色鏡物鏡

標(biāo)本透射熒光顯微鏡原理

目鏡吸收濾色鏡物鏡暗場(chǎng)聚光鏡激發(fā)濾色鏡汞燈熒光激發(fā)濾色塊

透過(guò)能使標(biāo)本產(chǎn)生熒光的特定波長(zhǎng)的光，同時(shí)阻擋對(duì)激發(fā)熒光無(wú)關(guān)的光。

幾種主要的熒光激發(fā)濾色塊

單細(xì)胞懸液制備制膠片DNA堿解旋電泳中和細(xì)胞裂解染色與觀察單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)（彗星試驗(yàn)）對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組中肺泡巨噬細(xì)胞DNA遷移的實(shí)驗(yàn)圖象

DAPI+FITC+TexasRed二、可見(jiàn)光顯微鏡的使用光源在顯微鏡下方，不需要開(kāi)汞燈可以觀察載玻片上的任何物質(zhì)三、成象系統(tǒng)1、照相機(jī)2、圖象采集軟件

Leica100圖象分析軟件，把顯微鏡下看到的圖象拍攝下來(lái)，保存成圖片文件，再進(jìn)行相關(guān)分析。使用要點(diǎn)標(biāo)本制作正確選擇濾色鏡200W的超高壓汞燈作光源，需預(yù)熱15分。壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)省時(shí)間，保護(hù)光源。

防止污染（載物臺(tái)已被EB污染）染色后盡快觀察，熒光逐漸減弱測(cè)試題1、該儀器由哪幾部分組成？2、什么是熒光？熒光有

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