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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)一棉籽餅粕中

游離棉酚含量的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆諊鴺?biāo)法測定飼料中游離棉酚含量的原理、方法及結(jié)果的表示。二、游離棉酚的測定方法概述一般用在70%丙酮水溶液或在3-氨基-1-丙醇存在下，用異丙醇和正己烷的混合溶劑提取游離棉酚，用比色法、高效液相色譜法測定。比色法：有苯胺法、三氯化銻法、甲氧基苯胺法、間苯三酚法、紫外分光光度法等。苯胺比色法準(zhǔn)確度高、精密度好，也是國標(biāo)方法。HPLC法準(zhǔn)確度高，干擾少。HPLC法所測得的結(jié)果往往低于比色法。四、儀器與器皿樣品粉碎機(jī)及分樣篩分析天平電動(dòng)振蕩器恒溫水浴鍋分光光度計(jì)容量瓶、具塞錐形瓶、玻璃漏斗、移液管、量筒、玻璃珠五、試劑（1）異丙醇；（2）正己烷；（3）冰乙酸；（4）3-氨基-1-丙醇；（5）苯胺；（6）異丙醇、正己烷混合溶劑：6：4（V/V）；（7）溶劑A：取500ml異丙醇、正己烷混合溶劑，2ml3-氨基-1-丙醇，8ml冰乙酸和50ml水，放入1000ml容量瓶中。再用異丙醇、正己烷混合溶劑定容至刻度。六、操作方法（1）游離棉酚的提取：稱取1-2g棉籽餅粕樣品于250ml具塞錐形瓶中，加入20粒玻璃珠。準(zhǔn)確加入50ml溶劑A。塞緊瓶塞。于振蕩器上劇烈振蕩1小時(shí)（每分鐘120次左右）。用干燥的定量濾紙過濾。過濾時(shí)在漏斗上加蓋一表玻璃皿。棄去最初幾滴濾液。收集濾液于100ml具塞錐形瓶中。（2）以下操作見下表aba0b0移取2份10ml濾液分別于2個(gè)25ml棕色容量瓶中移取2份10ml的溶劑A于2個(gè)25ml棕色容量瓶中。用混合溶劑A稀釋至刻度，搖勻。加入2.0ml苯胺，沸水浴30min顯色用混合溶劑A稀釋至刻度，搖勻加入2.0ml苯胺，沸水浴30min顯色冷卻至室溫，用混合溶劑定容，搖勻，靜置30min冷卻至室溫，用混合溶劑定容，搖勻，并靜置30min七、結(jié)果的計(jì)算游離棉酚（mg/kg）=A×50×25×106

K×m×V×L×1000式中：A—校正吸光度；K—質(zhì)量吸收系數(shù)，游離棉酚為62.5cm-1g-1l;m—試樣質(zhì)量，g；V—測定用濾液的體積，ml；L—吸收池長度，cm；50—提取樣品的提取液體積，ml；結(jié)果表示與重復(fù)性每個(gè)試樣做兩個(gè)平行，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。結(jié)果表示到20mg/kg。：重復(fù)性：FG＜500mg/kg時(shí)，相對偏差不超過15%；FG

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