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羊人工授精所需器材、藥品、用品用于配制稀釋液的藥品、試劑(如葡萄糖、檸檬酸鈉、EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)都要分析純的,青、鏈霉素不要過期的,卵黃需新鮮雞蛋,要用不加水的鮮奶)假陰道內(nèi)胎,玻璃器皿易破損的物品要多準備一些。顯微鏡保溫箱、開膛器照明燈、精液保存箱等能自己做的盡可能自己做,在實踐中要有所創(chuàng)新。如要開展冷凍精液輸精,要配備好液氮罐。流程一、采精前的準備種公羊采精調(diào)教.同圈法:將不會爬跨的公羊和若干只發(fā)情母羊關(guān)在一起過幾夜,或與母羊混群飼養(yǎng)幾天后公羊便開始爬跨。.誘導法:在其他公羊配種或采精時,讓被調(diào)教公羊站在一旁觀看,然后誘導它爬跨。.按摩睪丸:在調(diào)教期每日定時按摩睪丸10?15分鐘,或用冷水濕布擦睪丸,經(jīng)幾天后則會提高公羊性欲。.藥物刺激:對性欲差的公羊,隔日每只注射丙睪丸素1?2毫升,連注射3次后可使公羊爬跨。.將發(fā)情母羊陰道沾液或尿液涂在公羊鼻端,也可刺激公羊性欲。.用發(fā)情母羊做臺羊。.調(diào)整飼料,改善飼養(yǎng)管理。器械洗滌和消毒人工授精所用的器械在每次使用前必須消毒,使用后要立即洗滌。新的金屬器械要先擦去油漬后洗滌。方法是:先用清水沖去殘留的精液或灰塵,再用少量洗衣粉洗滌,然后用清水沖去殘留的洗衣粉,最后用蒸餾水沖洗1?2次。(1).玻璃器皿消毒:將洗凈后的玻璃器皿倒扣在網(wǎng)籃內(nèi),讓剩余水流出后,再放入烘箱,在115°C下消毒30分鐘。可用消毒杯柜或碗柜消毒,價格便宜、省電。消毒后的器皿透明,無任何污漬,才能使用,否則要重新洗滌、消毒。(2).開腔器、溫度計、鑷子、磁盤等消毒:洗凈、干燥后,在使用前1.5小時,用75%液精棉球擦試消毒。假陰道的安裝、洗滌和消毒先把假陰道內(nèi)胎(光面向里)放在外殼里邊,把長出的部分(兩頭相等)反轉(zhuǎn)套在外殼上。固定好的內(nèi)胎松緊適中、勻稱、平正、不起皺折和扭轉(zhuǎn)。裝好以后,在洗衣粉水中,用刷子刷去粘在內(nèi)胎外殼上的污物,再用清水沖去洗衣粉,最后用蒸餾水沖洗內(nèi)胎1?2次,自然干燥。在采精前1.5小時,用75%酒精棉球消毒內(nèi)胎(先里后外)待用。附:配制75%酒精,用購買的醫(yī)用酒精,一般為95%濃度,取其79毫升,加蒸餾水21毫升即為75%濃度的酒精。二、采精選擇發(fā)情好的健康母羊作臺羊,后軀應(yīng)擦干凈,頭部固定在采精架上(架子自制,離地發(fā)情通一個羊體高)。還可用公羊、假臺羊等作臺羊。種公羊在采精前,用濕布將包皮周圍擦干凈。假陰道的準備:將消毒過的,酒精完全揮發(fā)后的內(nèi)胎,用生理鹽水棉球或稀釋液棉球從里到外的擦試,在假陰道一端扣上消毒過并用生理鹽水或稀液沖洗后甩干的集精瓶(高溫低于25C時,集精瓶夾層內(nèi)要注入30C?35C溫水)。在外殼中部生水孔注入150毫升左右的50°C?55°C溫水,擰上氣卡塞,套上雙連球打氣,使假陰道的采精口形成三角形,并好氣卡。最后把消毒好的溫度計插入假陰道內(nèi)測溫,溫度在39C?42C為宜、在假陰道內(nèi)胎的前1/3,涂抹稀釋液或生理鹽水作潤滑劑。采精操作采精員蹲在臺羊右側(cè)后方,右手握假陰道,氣卡塞向下,靠在臺羊臀部,假陰道和地面約呈35度角。當公羊爬跨、伸出陰莖時,左手輕托陰莖包皮,迅速地將陰莖導入假陰道內(nèi),公羊射精動作很快,發(fā)現(xiàn)抬頭、挺腰、前沖,表示射精完畢。隨著公羊從臺羊身上滑下時,將假陰道取下,立即使集精瓶的一端向下堅立,打開氣卡活塞,放氣卡取下集精瓶(不要讓假陰道內(nèi)水流入精液,外殼有水要擦干),送操作室檢查。采精時,必須高度集中,動作敏捷、做到穩(wěn)、準、快。種公羊每天可采精1?2次,采3?5天,休息一天。必要時每天采3?4次。二次采精后,讓公羊休息2小時后,再進行第三次采精。三、精液品質(zhì)檢查.肉眼觀察:正常精液為乳白色,無味或略帶腥味。凡帶有腐敗味,出現(xiàn)紅色、褐色、綠色的精液均不可用于輸精。公山羊正常的射精量范圍是0.5?2.0毫升,平均為1.0毫升。.精子活率檢查在載玻片上滴原精液或稀釋后的精液1滴,加蓋玻片,在38C顯微鏡溫度下(可按顯微鏡大小,自制保溫箱,內(nèi)裝40瓦燈泡1只,既照明又保溫)檢查。評定精子活率以直線前進運動精子百分率為依據(jù),通常是用十級評分法。大約有80%的精子做直線前進運動的評為0.8,有60%精子做直線前進運動的為0.6,依次類推。山羊原精液活率一般可達0.8以上。在檢查(評定)精子活率時,要多看幾個視野,并上下扭動顯微鏡細螺旋,觀察上、中、下三層液層的精子運動情況,才能較精確的評出精子的活率。.密度檢查估測法:在檢查精子活率的同時進行精子密度的估測。在顯微鏡下根據(jù)精子稠密程度的不同。將精子密度評為“密”、“中”、“稀”三級、“密”級為精子間空隙不足一個精子長度,“中”級為精子間有1?2個精子長度空隙,“稀”級為精子間空隙超過2個精子長度以上,“稀”級不可用于輸精。精小計數(shù)法:血細胞計算板法每毫升山羊精液中含精子數(shù)為10?50億,平均為30億。四、液態(tài)精液稀釋配方與配制精液低倍稀釋的稀釋液,在精液采出后,原精數(shù)量不夠時,可作低倍稀釋,密度儀器測定。滿足需要,并在短時間內(nèi)使用,稀釋液配方可簡單些。如生理鹽水;奶類稀釋液:用鮮牛、羊奶,水浴92C?95C消毒15分鐘,冷卻去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀釋精液的稀釋液,都可作低倍稀釋用。精液高倍稀釋的稀釋液(擴大精液量,延長精子的保存時間)配方很多,介紹2個稀釋液。(1)葡萄糖3克,檸蒙酸鈉1.4克,EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)0.4克,加蒸餾水至100毫升,溶解后水浴煮沸消毒20分鐘,冷卻后加青霉素10萬單位,鏈霉素0.1克,若再加10?20毫升卵黃,可延長精子存活時間。(2)葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、檸檬酸鈉0.3克,EDTA0.07克,蒸餾水100毫升,溶解后煮沸消毒20分鐘,冷卻后加龐慶大霉素1萬單位,卵黃5毫升。五、液態(tài)精液稀釋原精液活率在0.6以上萬可用于稀釋輸精。精液低倍稀釋,原精液量夠輸精時,可不必再稀釋,可以直接用原精直接輸精。不夠時按需要量作1:2?4倍稀釋,要把稀釋液加溫到30°C,再把它緩慢加到原精液中,搖勻后即可使用。精液高倍稀釋,要以精子數(shù)、輸精劑量、每一劑量中含有1000萬個前進運動精子數(shù),結(jié)合下午最后輸精時間的精子活率,來計算出精液稀釋比例,在30C下稀釋(方法同前)。六、分裝、保存和運輸精液低倍稀釋,就近輸精,把它放在小瓶內(nèi),不需降溫保存,短時間用畢。分裝保存(1)小瓶中保存;把高倍稀釋清液,按需要量(數(shù)個輸精劑量裝入小瓶,蓋好蓋,用蠟封口,包裹紗布,套上塑料袋,放在裝有冰塊的保溫瓶(或保存箱)中保存,保存溫度為0C?5C。(2)塑料管中保存:作者等把精液以1:40倍稀釋,以0.5毫升為一個輸精劑量,注入飲料塑料吸管內(nèi)(剪成20厘米長,紫外線消毒),兩端用塑料封口機封口,保存在自制的泡沫塑料的保存箱內(nèi)(箱底放凍好的冰袋,再放泡沫塑料隔板,把精液管用紗布包好,放在隔板上面,固定好)蓋上蓋子,保存溫度大多在4C?7C,最高到9C。精液保存10小時內(nèi)使用,這種方法,可不用輸精器了,經(jīng)濟實用。運輸不論那種包裝,精液必須固定好,盡可能減輕振動。七、冷凍精液制作技術(shù)稀釋液配方與配制I液葡萄糖3克、檸檬酸鈉3克,加蒸餾水至100毫升,溶解后,水浴煮沸消毒20分鐘,冷卻后加青霉素10萬單位,鏈霉素0.1克,取80毫升加卵黃20毫升。II液取I液44毫升,加甘油6毫升。精液冷凍制作采出的精液,檢查活率在0.6以上者即可冷凍,在30C下用1液(30C)進行1:1.5倍稀釋,包上8層紗布放在4C冰箱中預(yù)冷降溫2?小時,在4C下加與I液等量的含甘油的II液,搖勻,最終稀釋比例為1:3倍稀釋,立即在氟板上滴凍成0.1毫升的顆粒。取本稀釋液I液94毫升,加甘油6毫升,合成一液,就可以冷凍細管精液。八、母羊發(fā)情鑒定以母羊發(fā)情外部表現(xiàn)來判斷母羊發(fā)情發(fā)情外部表現(xiàn)較明顯,發(fā)情時發(fā)出叫聲,食欲減退,興奮不安,對外界刺激反應(yīng)敏感,搖頭擺尾,有交配欲,喜歡接近公羊,在公羊追趕爬跨時常站立不動,讓公羊交配;陰門腫大,流出粘液。試精最簡便的方法是,在試情前將公羊腹部帶兜上試情布(長40?45厘米,寬35?40厘米,四角縫上25?30厘米長的帶子),每日早晨一次或早晚各一次將公羊放入母羊群中試情。當母羊接受公羊爬跨,站立不動,或母羊圍著公羊旋轉(zhuǎn),并不斷搖尾,都是母羊發(fā)情的表現(xiàn),及時把它抓出,待配。試情公羊選擇和飼養(yǎng)管理試情公羊必須選擇體質(zhì)結(jié)實、健康無病,性欲旺盛,動作靈敏的1?5歲公羊。試情公羊與母羊的比例以1:30?40為宜。在配種前一個月驅(qū)蟲,加強飼養(yǎng)管理,除放牧采食或舍飼喂草外,每天補飼0.2?0.3公斤混合精料。每隔10?15天,給試情公羊排精一次,增強性欲。九、輸精輸精時間適時輸精,對提高母羊的受胎率十分重要。山羊的發(fā)情持續(xù)時間為24?48小時。排卵時間一般多在發(fā)情后期30?40小時。因此,比較適宜的輸精時間應(yīng)在發(fā)情中期后(即發(fā)情后12?16小時)。如以母羊外部表現(xiàn)來確定母羊發(fā)情的,若上午開始發(fā)情的母羊,下午與次日上午各輸精1次;下午和傍晚開始發(fā)情的母羊,在次日上下午各輸精1次。每天早晨1次試情的,可在上下午各輸精1次。2次輸精間隔8?10小時為好,至少不低于6小時。若每天早晚各1次試情的,其輸精時間與以母羊外部表現(xiàn)來確定母羊發(fā)情相同。如母羊繼續(xù)發(fā)情,可再行輸精1次。母羊保定保定人將母羊頭夾緊在兩腿之間,兩手抓住母羊后腿,將其提到腹部,保定好不讓羊動,母羊成倒立狀。用溫布把母羊外陰部擦干凈,即待輸精。輸精方法子宮頸口內(nèi)輸精:將經(jīng)消毒后在1%氯化鈉溶液浸涮過的開膛器裝上照明燈(可自制),輕緩地插入陰道,打開陰道,找到子宮頸口,將吸有精液的輸精器通過開膛器插入子宮頸口內(nèi),深度約1厘米左右。稍退開膛器,輸入精液,先把輸精器退出,后退出開膛器。進行下只羊輸精時,把開膛器放在清水中,用布洗去粘在上面的陰道粘液和污物,擦干后再在1%氯化鈉溶液浸涮過;用生理鹽水棉球或稀釋液棉球,將輸精器上粘的粘液,污物自口向后擦去。輸精量原精輸精每只羊每次輸精0.05?0
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