現在是1頁\一共有111頁\編輯于星期四1.Molecularcomponent現在是2頁\一共有111頁\編輯于星期四aminoacid——L--氨基酸

buildingblocks：aminoacidsproteinhydrolysis(acidorbaseorenzyme)現在是3頁\一共有111頁\編輯于星期四NH3+COO-HcarboxylgroupaminogroupsidechainCOMMOMGROUP氨基酸通式CR現在是4頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是5頁\一共有111頁\編輯于星期四通式例GlyValAspPro現在是6頁\一共有111頁\編輯于星期四根據側鏈的結構脂肪族氨基酸芳香族氨基酸雜環氨基酸雜環亞氨基酸根據側鏈的性質非極性疏水性氨基酸：Gly、Ala、Val等極性中性氨基酸：Trp、Ser、Tyr等酸性氨基酸：Asp、Glu堿性氨基酸：Lys、His、Arg氨基酸的分類現在是7頁\一共有111頁\編輯于星期四疏水性氨基酸甘GlyG丙AlaA纈ValV亮LeuL異（亮）IleI苯（丙）PheF脯ProP蛋（甲硫）MetM色TrpT親水性氨基酸絲SerS蘇ThrT天胺AsnN谷胺GlnQ酪TyrY半（胱）CysC酸性氨基酸天（冬）AspD谷GluE堿性氨基酸賴

LysK精ArgR組HisH

氨基酸表示法－中文、三字符號和單字符號p16現在是8頁\一共有111頁\編輯于星期四一個氨基酸的-羧基與另一個氨基酸的-氨基之間脫水縮合形成的化學鍵。Connectiontypeofammoniaacid

peptidebone（肽鍵）現在是9頁\一共有111頁\編輯于星期四CH+H3NR1COO-+-H2OCHNR2COO-HHH+CH+H3NR1COO-CHNR2COHpeptidebone現在是10頁\一共有111頁\編輯于星期四鍵長為0.132nm,介于單鍵（鍵長為0.147nm）與雙鍵（鍵長為0.128nm）之間。具雙鍵的性質，即不能旋轉。Featuresofpeptidebond現在是11頁\一共有111頁\編輯于星期四－NH3＋-COO-7.23A3.61A現在是12頁\一共有111頁\編輯于星期四Componentsofapolypeptidechain.Apolypeptidechainconsistsofaconstantbackbone(showninblack)andvariablesidechains(showningreen).肽鏈：主鏈（backbone）+側鏈（sidechain）現在是13頁\一共有111頁\編輯于星期四由氨基酸殘基組成，其連接鍵為肽鍵方向性:含有氨基末端（N-端）、羧基末端（C-端）肽鏈骨架為:…-N-C-C-N-C-C-…側鏈（R）決定其排列順序肽鏈的特點現在是14頁\一共有111頁\編輯于星期四肽平面——肽單元（peptideunit)上世紀30年代末，L.Pauling和應用X線衍射技術研究氨基酸和寡肽的晶體結構，提出肽單元。參與構成肽鍵的6個原子（C1、C、O、N、H、C2)被約束在同一個平面上，C1和C2處平面對角，這樣的平面單位稱為肽平面。現在是15頁\一共有111頁\編輯于星期四肽平面現在是16頁\一共有111頁\編輯于星期四肽平面-1肽平面-2現在是17頁\一共有111頁\編輯于星期四多肽鏈可以看成由Cα串聯起來的無數個肽平面組成現在是18頁\一共有111頁\編輯于星期四2MolecularStructure

現在是19頁\一共有111頁\編輯于星期四一級結構（初級結構）空間結構（高級結構）二、三、四級結構現在是20頁\一共有111頁\編輯于星期四構象（conformation)：指一類不涉及共價鍵改變的立體結構問題。如蛋白質的一、二、三、四級結構。構型（configuration)：指一類涉及共價鍵改變的立體結構問題。如氨基酸的L-型和D-型。現在是21頁\一共有111頁\編輯于星期四指多肽鏈中氨基酸的排列順序稱為蛋白質的一級結構。維系一級結構的化學鍵：肽鍵（主鍵）Primarystructure現在是22頁\一共有111頁\編輯于星期四牛胰核糖核酸酶一級結構：一條肽鏈124個氨基酸殘基，缺色氨酸四個二硫鍵現在是23頁\一共有111頁\編輯于星期四胰島素的一級結構：兩條肽鏈，A鏈和B鏈51個氨基酸殘基3個二硫鍵現在是24頁\一共有111頁\編輯于星期四Proteinspacestructure空間結構的表示方法：金屬絲模型主鏈金屬絲模型Backbonewiremodel飄帶模型Ribbonmodel香腸模型Sausagemodel空間填充模型Space-fillingmodel現在是25頁\一共有111頁\編輯于星期四指多肽鏈主鏈以肽平面為單位折疊形成局部肽段的空間排布方式。即主鏈原子的局部空間排布（即構象），并不涉及側鏈部分的位置。維系二級結構的化學鍵：氫鍵（次級鍵）二級結構的形式：α-螺旋、β-折疊、β-轉角和無規卷曲。Secondarystructure現在是26頁\一共有111頁\編輯于星期四Severaltypesofsecondarystructureareparticularlystableandoccurwidelyinproteins.Themostprominentaretheαhelixandβconformationsdescribedbelow.Usingfundamentalchemicalprinciplesandafewexperimentalobservations,LinusPaulingandRobertCoreypredictedtheexistenceofthesesecondarystructuresin1951,severalyearsbeforethefirstcompleteproteinstructurewaselucidated.現在是27頁\一共有111頁\編輯于星期四定義：蛋白質分子中局部肽鏈的肽平面通過α碳原子旋轉，使碳鏈主鏈沿中心軸盤曲成穩定的右手螺旋構象α螺旋是主要的二級結構形式，存在于大多數的蛋白質中，如α角蛋白（皮膚、毛發、指甲、和角）全部是α螺旋-螺旋（-helix)現在是28頁\一共有111頁\編輯于星期四-螺旋（-helix)模型圖5.4A3.6個殘基氫鍵側鏈基團現在是29頁\一共有111頁\編輯于星期四Fourmodelsoftheahelix,showingdifferentaspectsofitsstructure.

(a)Formationofaright-handedαhelix.Theplanesoftherigidpeptidebondsareparalleltothelongaxisofthehelix.(b)Ball-and-stickmodelofaright-handedαhelix,showingtheintrachainhydrogenbonds.Therepeatunitisasingleturnofthehelix,3.6residues.(c)Theαhelixasviewedfromoneend,lookingdownthelongitudinalaxis.NotethepositionsoftheRgroups,representedbyredspheres.(d)Aspace-fillingmodeloftheαhelix.現在是30頁\一共有111頁\編輯于星期四α-螺旋的要點：

一般為右手螺旋；每個螺旋圈含3.6個氨基酸殘基，螺距為0.54nm;螺旋圈之間通過氫鍵（aa1的C=O和aa4的-NH之間）維持結構穩定;

R側鏈位于螺旋外側，其大小、形狀及電荷等是影響此結構形成的主要因素。現在是31頁\一共有111頁\編輯于星期四Hairα-keratinisanelongatedaα-helixwithsomewhatthickerdomainsneartheaminoandcarboxytermini.Pairsofthesehelicesareinterwound,probablyinaleft-handedsense,toformtwo-chaincoiledcoils.例1現在是32頁\一共有111頁\編輯于星期四Structureofcollagen.(膠原質）Thecollagenhelixisarepeatingsecondarystructureuniquetothisprotein.(a)TherepeatingtripeptidesequenceGly-X-ProorGly-X-Hypadoptsaleft-handedhelicalstructurewiththreeresiduesperturn.TherepeatingsequenceusedtogeneratethismodelisGly-Pro-Hyp.(b)Space-fillingmodelofthecollagenhelixshownin(a).(c)Threeoftheseheliceswraparoundoneanotherwitharight-handedtwist.Theresultingthree-strandedmoleculeisreferredtoastropocollagen.(d)Thethree-strandedcollagensuperhelixshownfromoneend,inaball-and-stickrepresentation.Glycineresiduesareshowninred.Glycine,becauseofitssmallsize,isrequiredatthetightjunctionwherethethreechainsareincontact.例2現在是33頁\一共有111頁\編輯于星期四定義：多肽鏈的局部肽段，以肽鍵平面為單位折疊成鋸齒狀的一種較伸展結構.-折疊（-pleatedsheet)現在是34頁\一共有111頁\編輯于星期四-折疊（-pleatedsheet)模型圖Cα現在是35頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是36頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是37頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是38頁\一共有111頁\編輯于星期四Atwisted

sheet.(A)Aball-and-stickmodel.(B)Aschematicmodel.(C)Theschematicviewrotatedby90degreestoillustratethetwistmoreclearly.片層并非是平直而是扭曲的現在是39頁\一共有111頁\編輯于星期四β-折疊的要點：多肽鏈較伸展,遇Cα發生折疊,R側鏈交錯位于鋸齒狀(hackle)結構上下方；兩條或多條肽鏈片段平行排列，靠鏈間氫鍵穩定構象（-CO和-NH）；兩條肽鏈的走向可以是順向平行或反向平行（殘基間距離前者為0.65nm，后者為0.70nm）或混合排列。現在是40頁\一共有111頁\編輯于星期四-轉角（-turn)定義：多肽鏈中的某局部出現180度回折處形成的特定構象。一般由四個氨基酸組成，常見氨基酸：Pro,Gly,Asp,Asn,Trp。以氫鍵維持穩定，第1個氨基酸殘基的C=O與第4個殘基的N-H之間形成氫鍵。賦予蛋白質較大的構象柔性，常位于三維結構的表面，有些具有特定功能。現在是41頁\一共有111頁\編輯于星期四β-轉角(β-turnorreverseturnorhairpinbend)Structureofareverseturn.TheCOgroupofresidueiofthepolypeptidechainishydrogenbondedtotheNHgroupofresiduei+3tostabilizetheturn.現在是42頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是43頁\一共有111頁\編輯于星期四無規則卷曲（randomcoil）定義：沒有明確規律性的那部分肽段的結構。但這些“無規則卷曲”也象其他二級結構那樣是明確而穩定的結構。即蛋白質在其多肽鏈的不同區段可形成不同的二級結構。作用：賦予蛋白質較大的構象柔性，常構成蛋白質的特定功能部位。現在是44頁\一共有111頁\編輯于星期四定義：即模體（motif）是指在多肽鏈內順序上相互靠近的二級結構常常在空間折疊中彼此相互作用，形成規則的二級結構聚合體。作用：它是蛋白質構象中二級和三級結構之間的一個層次，具有特定功能故稱超二級結構。通常類型有：、、（三）超二級結構(supersecondarystructure)和結構域(domain)超二級結構現在是45頁\一共有111頁\編輯于星期四Motif的常見組合現在是46頁\一共有111頁\編輯于星期四結構域定義：是指在較大蛋白質分子中，由于多肽鏈上相鄰的超二級結構緊密聯系，形成二個或多個在空間上可以明顯區別的局部區域（一般為球狀），常具有特定的功能。有時也稱功能域（functionaldomain）。結構域約含100-200個氨基酸殘基，各自有獨特的空間構象，并承擔不同的生物學功能。現在是47頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是48頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是49頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是50頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是51頁\一共有111頁\編輯于星期四結構域的特征：結構域50-350個氨基酸殘基構成，與整個蛋白質分子是共價相連，蛋白質分子可以有多個相同或不同結構域的組合。多結構域蛋白質的結構域常有它對應的基因外顯子編碼。是多肽鏈的獨立折疊單位，結構域之間常有一段柔性的肽鏈連接（鉸鏈區，hinge），使結構域容易發生相對運動。結構域承擔一定的生物學功能，幾個結構域協同作用，可體現出蛋白質的總體功能。例如，脫氫酶類的多肽主鏈有兩個結構域，一個為NAD+結合結構域，一個是起催化作用的結構域，兩者組合成脫氫酶的脫氫功能區。結構域之間有一裂溝（cleft）或口袋狀，常常是活性部位。現在是52頁\一共有111頁\編輯于星期四定義：指在二級結構的基礎上，多肽鏈進一步卷曲、折疊而形成具有一定規律的三維空間結構。三級結構是一條多肽鏈的完整的構象，包括全部的主鏈和側鏈的專一性的空間排布。維系三級結構的化學鍵：氫鍵、疏水鍵、鹽鍵和范德華力等次級鍵以及二硫鍵。tertiarystructure現在是53頁\一共有111頁\編輯于星期四Myohemerythrin(2mhrintheProteinDataBank)isanoxygen-carryingproteinfromasipunculanworm.Thefour-helix,up-and-downbundlemotifiscommontoanumberoffunctionallyunrelatedproteins.Thiscommonalityindicatesthatthisisanenergeticallyfavorablearrangement.蚯蚓肌紅蛋白三級結構（α-螺旋）現在是54頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是55頁\一共有111頁\編輯于星期四激酶相關蛋白現在是56頁\一共有111頁\編輯于星期四半乳糖苷變旋酶三級結構（β-折疊）現在是57頁\一共有111頁\編輯于星期四氧化鐵還原蛋白三級結構現在是58頁\一共有111頁\編輯于星期四半乳糖苷激酶三級結構（α-螺旋、β-折疊）現在是59頁\一共有111頁\編輯于星期四定義：指具有二條或二條以上獨立三級結構的多肽鏈組成的蛋白質，其多肽鏈間通過次級鍵相互結合，而形成空間結構。亞基（subunit）：四級結構蛋白中，具有獨立三級結構的多肽鏈。故四級結構實際是亞基的立體排列和相互作用。作用力：疏水鍵、離子鍵、氫鍵Quaternarystructure）現在是60頁\一共有111頁\編輯于星期四QuaternarystructureofhemoglobinHemoglobiniscomposedoffourpoly-peptidechains,eachofwhichisboundtoahemegroup.Thetwoαchainsandthetwoβchainsareidentical.Hemeprostheticgroups(1persubunit,so4perHbtetramer)inred(ball&stickrendering)--the4hemesarefarapart.現在是61頁\一共有111頁\編輯于星期四八聚體組蛋白核心2(H2A,H2B,H3,H4)現在是62頁\一共有111頁\編輯于星期四蛋白質空間結構的總結現在是63頁\一共有111頁\編輯于星期四一級結構蛋白質的空間結構基礎，蛋白質趨向形成一種能量最低，結構最穩定的三級結構，這是蛋白質能折疊的動力；細胞內高稠密介質，以及狹窄空間使得伸展的和部分折疊的蛋白質在高濃度時傾向于聚集；無法自我迅速完成正確折疊；“輔助性組裝學說”（assistedassembling）：新生肽鏈折疊并組裝成有功能的蛋白質并非都能自發完成，在相當多的情況下是需要其他蛋白質幫助的，這類幫助蛋白包括分子伴侶（molecularchaperones）和折疊酶（foldingenzymes,foldases）。蛋白質的折疊問題現在是64頁\一共有111頁\編輯于星期四兩大類蛋白質參與蛋白質折疊：折疊酶：蛋白質二硫鍵異構酶（proteindisulfideisomerase,PDI）:加速蛋白質折疊過程中形成正確配對二硫鍵；肽基脯氨酰順反異構酶（peptidylprolylcis/transisomerase,PPI）分子伴侶（molecularchaperone）:為蛋白質折疊提供一個有利的折疊環境，與未折疊肽段的疏水部分可逆結合，防止聚集和錯誤折疊，誘導正確折疊。如熱休克蛋白（heatshockprotein）等1987,Lasky:molecularchaperone現在是65頁\一共有111頁\編輯于星期四分子伴侶主要的分類：伴侶素家族（chaperonin,Cpn）應激蛋白70家族（stress-70family）/熱休克蛋白70家族（Hsp70family）應激蛋白90家族（stress-90family）/熱休克蛋白90家族（Hsp90family）現在是66頁\一共有111頁\編輯于星期四伴侶素家族（chaperonin,Cpn）Thestructureandfunctionofthehsp60familyofmolecularchaperones.(A)Thecatalysisofproteinrefolding.Asindicated,amisfoldedproteinisinitiallycapturedbyhydrophobicinteractionsalongonerimofthebarrel.ThesubsequentbindingofATPplusaproteincapincreasesthediameterofthebarrelrim,whichmaytransientlystretch(partlyunfold)theclientprotein.Thisalsoconfinestheproteininanenclosedspace,whereithasanewopportunitytofold.Afterabout15seconds,ATPhydrolysisejectstheprotein,whetherfoldedornot,andthecyclerepeats.Thistypeofmolecularchaperoneisalsoknownasachaperonin;itisdesignatedashsp60inmitochondria,TCP-1inthecytosolofvertebratecells,andGroELinbacteria.Asindicated,onlyhalfofthesymmetricalbarreloperatesonaclientproteinatanyonetime.(B)ThestructureofGroELboundtoitsGroEScap,asdeterminedbyx-raycrystallography.Ontheleftisshowntheoutsideofthebarrel-likestructureandontherightacrosssectionthroughitscenter.現在是67頁\一共有111頁\編輯于星期四Thehsp70familyofmolecularchaperones.Theseproteinsactearly,recognizingasmallstretchofhydrophobicaminoacidsonaprotein'ssurface.Aidedbyasetofsmallerhsp40proteins,anhsp70monomerbindstoitstargetproteinandthenhydrolyzesamoleculeofATPtoADP,undergoingaconformationalchangethatcausesthehsp70toclampdownverytightlyonthetarget.Afterthehsp40dissociates,thedissociationofthehsp70proteinisinducedbytherapidre-bindingofATPafterADPrelease.Repeatedcyclesofhspproteinbindingandreleasehelpthetargetproteintorefold,應激蛋白70家族(Stress-70family）現在是68頁\一共有111頁\編輯于星期四3Relationshipbetweenstructureandfunction

現在是69頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是70頁\一共有111頁\編輯于星期四一級結構與功能關系一級結構是空間結構的基礎一級結構不同，功能不同；一級結構相似，空間構象和功能也相似現在是71頁\一共有111頁\編輯于星期四例１activitynoactivity現在是72頁\一共有111頁\編輯于星期四例２分子病現在是73頁\一共有111頁\編輯于星期四DNA……TGTGGGCTTCTTTTT……正常mRNA……ACACCC

GAAGAAAAA……

HbA（亞基）N…—Thr—Pro—Glu

—Glu—Lys—…DNA……TGTGGGCAT

CTTTTT……異常mRNA……ACACCCGUAGAAAAA……

Hbs（亞基）N…—Thr—Pro—Val—Glu—Lys—…鐮刀狀紅細胞性貧血的血紅蛋白的異常鐮刀形紅細胞貧血現是由于血紅蛋白發生了遺傳突變引起的鏈第6位的aa線基由正常的Glu變成了疏水性的Val現在是74頁\一共有111頁\編輯于星期四一級結構的種屬差異與分子進化同源蛋白質：在不同的生物體內行使相同或相似功能的蛋白質。

如：血紅蛋白在不同的脊椎動物中都具有輸送氧氣的功能，細胞色素在所有的生物中都是電子傳遞鏈的組分。通過比較同源蛋白質的氨基酸序列的差異可以研究不同物種間的親源關系和進化。

親源關系越遠，同源蛋白的氨基酸順序差異就越大；反之，就越小。現在是75頁\一共有111頁\編輯于星期四一些哺乳動物胰島素一級結構的差異名稱A8

A9A10B30與人的差異數活性人蘇氨酸絲氨酸異亮氨酸蘇氨酸-

豬--

丙氨酸1

抹香鯨--

丙氨酸1

馬-甘氨酸

丙氨酸2↓象-甘氨酸纈氨酸

2↓牛丙氨酸-纈氨酸丙氨酸3↓例１現在是76頁\一共有111頁\編輯于星期四不同生物和人的細胞色素c中氨基酸組成的差異生物名稱不同氨基酸數生物名稱不同氨基酸數黑猩猩0恒河猴1豬、牛、羊10馬12雞13海龜15金槍魚21小蠅25小麥35酵母44例２現在是77頁\一共有111頁\編輯于星期四細胞色素C的一級結構與物種進化間的關系物種進化樹（phylogenetictree）現在是78頁\一共有111頁\編輯于星期四蛋白質空間結構決定蛋白質功能；蛋白質空間結構相似其功能也相似；蛋白質空間結構改變導致蛋白質功能改變，嚴重時導致疾病蛋白質構象病：蛋白質空間結構與功能的關系現在是79頁\一共有111頁\編輯于星期四構象病構象病：蛋白質一級結構沒有改變，而由蛋白質的構象發生改變而影響其功能，嚴重時導致疾病。瘋牛病：由朊病毒蛋白（prionprotein,PrP）引起的一組人和動物神經退行性疾病，具有傳染性、遺傳性和散發的特點。現在是80頁\一共有111頁\編輯于星期四NormalfoldingpatternofPrPAlternativefoldingpatternofPrP朊病毒蛋白?現在是81頁\一共有111頁\編輯于星期四核酸組成單位種

類連接方式一級結構空間結構功能蛋白質兩種重要的生物大分子比較氨基酸核苷酸20種A、C、G、T(DNA)A、C、G、U(RNA)肽鍵磷酸二酯鍵AA排列順序堿基序列二、三、四級結構螺旋、超螺旋、蛋白-核酸非共價結合生命活動直接執行者遺傳信息貯存、傳代、表達,決定蛋白結構現在是82頁\一共有111頁\編輯于星期四4PrimaryProperty現在是83頁\一共有111頁\編輯于星期四（1）變性

天然蛋白質的嚴密結構在某些理化因素的作用下，其特定的空間結構破壞，從而導致質理化性質改變和生物學活性喪失。變性本質:空間構象的改變或破壞,不涉及一級結構的改變和肽鍵斷裂主要理化性質1、蛋白質的變性（denaturation）和復性現在是84頁\一共有111頁\編輯于星期四穩定蛋白質分子結構的作用力現在是85頁\一共有111頁\編輯于星期四氫鍵現在是86頁\一共有111頁\編輯于星期四鹽鍵現在是87頁\一共有111頁\編輯于星期四二硫鍵現在是88頁\一共有111頁\編輯于星期四FoodvsProtein現在是89頁\一共有111頁\編輯于星期四角蛋白變性？現在是90頁\一共有111頁\編輯于星期四現在是91頁\一共有111頁\編輯于星期四燙發原理現在是92頁\一共有111頁\編輯于星期四（2）復性

若蛋白質變性程度較輕，去除變性因素后，有些蛋白質仍可恢復或部分恢復其原有的構象和功能。現在是93頁\一共有111頁\編輯于星期四

2、紫外吸收性質：蛋白質分子中含有共軛雙鍵色氨酸、酪氨酸，在280nm處有特征吸收峰。利用此特點可用分光光度法測定蛋白質含量（在波長范圍內，蛋白質的OD280與其濃度成正比關系），也可粗略估計核酸中蛋白質污染程度(A260/A280)。應用：測定生物樣品中蛋白質的含量現在是94頁\一共有111頁\編輯于星期四5IsolationandPurification現在是95頁\一共有111頁\編輯于星期四鹽析、透析、電泳、層析和超速離心等溫和的物理方法提取不含雜蛋白的單一蛋白質，測定氨基酸組成，分析氨基酸順序，通過X射線衍射等方法確定空間結構。現在是96頁\一共有111頁\編輯于星期四一、超速離心（ultracentrifugation）原理：蛋白質在高達50萬g的重力作用下，在溶液中逐漸沉降，直至其浮力與離心所產生的力相等，此時沉降停止。不同蛋白質其密度與形態各不相同，因此用上述方法可以將它們分開。種類：差速離心、密度梯度區帶離心等。現在是97頁\一共有111頁\編輯于星期四差速離心(differentialcentrifugation)

溶液在不同的速度下離心，從而分離和收集大小不同的蛋白質顆粒。現在是98頁\一共有111頁\編輯于星期四密度梯度區帶離心(densitygradientzonalcentrifugation)〔

速率區帶離心(rate-zonalcentrifugation)〕密度梯度(densitygradient)：密度隨距離不同而改變，尤其指在試管或小室中，溶液的密度從一端向另一端改變。密度梯度離心(densitygradientzonalcentrifugation)：為了制備或分析，將大分子通過密度梯度進行離心的方法。氯化銫梯度離心(cesiumchloridegradient):又稱為等密度梯度離心，將含有大分子的氯化銫鹽溶液進行離心，在氯化銫的分布達到平衡后，容器中形成密度梯度，大分子在與其密度相等的梯度處形成帶，從而達到分離的目的。蔗糖密度梯度(sucrosedensitygradient)：用不同濃度的蔗糖溶液配制的密度梯度（5%-25%）。現在是99頁\一共有111頁\編輯于星期四lowhighsucrosecocktail現在是100頁\一共有111頁\編輯于星期四蔗糖密度梯度現在是101頁\一共有111頁\編輯于星期四二、電泳（electrophoresis）原理：蛋白質在高于或低于其等電點（pI）的溶液中為帶電的顆粒，在電場中能向正極或負極移動。通過蛋白質在電場中泳動而達到分離各種蛋白質的目的。種類：薄膜電泳、凝膠電泳等。現在是102頁\一共有111頁\編輯于星期四PNH2COO-NH3+NH3+COOHCOO-PP+OH-+H++H++OH-兼性離子（pI）陽離子陰離子蛋白質的兩性離解電場電場現在是103頁\一共有111頁\編輯于星期四凝膠電泳－SDSSDS－十二烷基磺酸鈉：攜帶負電荷，覆蓋在蛋白質表面，使其分子間的電荷差異消失。PAGE－聚丙烯酰胺凝膠：分子篩效應。用途：常用于蛋白質分子量的測定。現在是104頁\一共有111頁\編輯于星期四Electrophoresis-SDS現在是105頁\一共有111頁\編輯于星期四(a)Differentsamplesareloadedinwellsordepressionsatthetopofthepolyacrylamidegel.Theproteinsmoveintothegelwhenanelectricfieldisapplied.Thegelminimizesconvectioncurrentscausedbysmalltemperaturegradients,anditminimizesproteinmovementsotherthanthoseinducedbytheelectricfield.(b)ProteinscanbevisualizedafterelectrophoresisbytreatingthegelwithastainsuchasCo