微生物實驗室的質量控制第1頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的配制

培養基是絕大多數微生物試驗的基礎。因此，培養基的質量是微生物試驗成功與否的關鍵因素。

適宜的培養基制備方法、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證。第2頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的配制

培養基可按處方制備也可使用按處方生產的符合規定的商品化成品培養基，脫水培養基除附有處方和使用說明外還應注明有

效期、貯存條件、適用性試驗的質控菌株和用途。

配制時應按使用說明上的要求操作，受潮結塊不能使用，確保培養基的質量符合要求。第3頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的配制

使用容器配制培養基使用的容器應是玻璃器皿或搪瓷器皿等。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器。

實驗室指南

含代謝藥物或抑制劑的培養基應使用專用的玻璃器皿，使用器皿的洗滌程序進行驗證。

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培養基的配制

用蒸餾水或純化水沖洗，并進行清除污物的確認。非潔凈器皿，導致抑菌物質進入培養基中。抑菌物質可能是殘留的玻璃器皿清潔用的清潔劑或之前玻璃器皿所盛裝的物質。實驗室指南溶劑應無菌、無抑制或無干擾物質。

第5頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的配制

對配制培養基的過程作詳細的記錄

記錄內容

配制日期、名稱、成分、數量、質量監控結果等進行全面詳細記錄。實驗室應確保所有的試劑（包括儲備溶劑）、培養基、稀釋劑和其它懸浮液都要有標簽進行充分標記。實驗室指南實驗室應確保所有的試劑（包括儲備溶劑）、培養基、稀釋劑和其它懸浮液都要有標簽進行充分標記。標記內容名稱、濃度、貯存條件、配制日期、驗證的有效期或建議的貯存期限。制備者應做好相關記錄。第6頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的制備方法

稱量

為保證培養基質量的穩定可靠，在配制培養基時，按說明書的規定稱量，各稱量物的重量應記錄。

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培養基的制備方法

配制將準確稱量的各組分加入溶劑中，完全溶解，如需要可適當加熱。但不要加熱過度。添加其它組分時，應充分混勻。實驗室指南因加熱不均勻，微波設備不能用來溶解培養基。

第8頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的制備方法分裝根據試驗需要分裝試管、傾注平皿、制備斜面。經滅菌的培養基，應在無菌環境下分裝，避免污染。實驗室指南在無菌室內進行分裝，減少被污染。這第9頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的制備方法

對熱敏感的培養基容器應預先進行滅菌，以保證培養基的無菌性。第10頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的制備方法

矯正pH

配制培養基必須矯正pH，并進行驗證。

矯正pH后的培養基應加熱、過濾，使培養基澄清。第11頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的滅菌

滅菌方法及條件，應進行無菌性和促生長試驗進行驗證.驗證方法同《中國藥典2010年版》附錄滅菌法。否則會引起變色、透明度降低、瓊脂凝固力或PH的變化。第12頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的滅菌

培養基的滅菌應按照生產商提供或使用者驗證的參數進行。商品化的成品培養基必須附有所用滅菌方法的資料。第13頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的貯藏

-根據使用說明書的要求進行儲存。-培養基標簽上應標有批號，生產日期、有效期及培養基的有關特性。-所采用的保藏和運輸條件應使培養基最低限度失去水分并提供機械保護。第14頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的貯藏

配制好的培養基應在驗證的條件下貯藏

保存在2～25℃避光的環境。

若保存于非密閉容器中，一般在三周內使用。

若保存于密閉容器中，一般在一年內使用。

第15頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的貯藏

-瓊脂培養基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷凍破

壞凝膠特性。

-瓊脂平板最好現配現用，如置冰箱保存，一般不超過一周，且應密

閉包裝，若延長保存需經驗證確定。

-培養基滅菌后應立即取出，不得儲藏在高壓滅菌器中。

第16頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的貯藏

-固體培養基滅菌后的再融化應在水浴中或流通蒸汽進行，只允許一次，放在45～50℃的水浴中，不得超過8小時。

-使用過的培養基按照國家污染廢物處理相關規定進行。第17頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

實驗室配制的培養基監控項目外觀、性狀、pH、適用性試驗、定期的穩定性檢查以及培養基有效期的確定。第18頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

驗證時間

-由同一批脫水培養基配制培養基時，若采用已驗證的配制和滅菌程序，那么可不進行批批適用性試驗。否則配制的每一批培養基必須進行適用性試驗。

試驗方法

-《中國藥典2015版》有關規定進行。

第19頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制實驗室指南每一批培養基都要進行適用性實驗;適用性試驗方法和項目和標準同我國藥典規定第20頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制實驗室指南照射的培養基照射的培養基驗證照射和無照射培養基的促生長比對試驗。貯存條件保質期的驗證應確定配的制培養基在貯存條件下的保質期。第21頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

培養基的有效期

是指已通過適用性試驗的培養基在整個有效期內均需符合這些相應的標準。

每批培養基儲存的時間將取決于一定存放條件（包括容器和密封性）的培養基組成成分的穩定性。第22頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

試驗結果處理-適用性試驗不符合，應找造出原因，采取行動，防止重復出現，否則不能使用。第23頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

鑒定微生物的診斷試劑質量控制試驗與培養基質

量控制試驗相似選擇正確的質控菌株

。

第24頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

環境監控的培養基應小心防護。最好是終端滅菌，否則使用前應進行100%的預培養。防止將外來的污染帶到環境中及避免出現假陽性結果。第25頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

測定PH值滅菌后測定PH值；冷卻至室溫（25℃）后，進行測定。培養基的PH的范圍不得超過規定的±0.2。第26頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

一般性狀

-制成平板或分裝于試管的培養基應檢查；容器和蓋子的破裂，裝量。

-固體培養基因水分流失而造成表面產生裂縫或漣漪。

-其他如溶血，可能冷藏溫度下形成的結晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化還原指示劑的狀況，批數量和有效期的檢查和記錄，培養基的無菌檢查等。第27頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

液體培養基觀察培養基的顏色，是否有沉淀，

微生物污染，氧化還原指示劑的狀況等。第28頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

無菌檢查用培養適用性試驗

適用性試驗無菌性檢查和靈敏度檢查檢查方法同現行版藥典規定

第29頁，共30頁，2023年，2月20日，星期四

培養基的質量控制

無菌檢查培養基的靈敏度檢查