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千里之行,始于足下。第2頁/共2頁精品文檔推薦全文上海中醫(yī)藥大學教學實驗中心全文上海中醫(yī)藥大學教學實驗中心

徐佳虞莉青夏延明趙影張馥晴

指導老師:陸雄

(上海中醫(yī)藥大學03針英七,上海XXX03)

[摘要]目的:研究染發(fā)劑對幼年小白鼠腎功能的阻礙。辦法:用市售染發(fā)劑給20只昆明種幼年小白鼠染毛(即實驗組,雄鼠M1組n=10,雌鼠M2組n=10),另20只小鼠做空白對照(即正常組,雄鼠N1組n=10,雌鼠N2組n=10)。染毛第18天經(jīng)摘眼球取血,測血肌酐和血清尿素氮,并取腎組織作腎臟病理切片觀察。結果:外觀上來看,M1組的脫毛現(xiàn)象較明顯;數(shù)據(jù)顯示,實驗組的血肌酐明顯低于正常組(P0.05)。形狀學觀察結果沒有發(fā)現(xiàn)病理形狀學改變。結論:目前市售常用染發(fā)劑短期內(nèi)可以導致雄性小鼠脫發(fā)現(xiàn)象,但對雄性小鼠腎功能及腎組織形狀沒有明顯的傷害;對雌性小鼠,可以導致血清尿素氮的升高,但別阻礙血肌酐以及腎組織病理形狀。提示短期染發(fā)毒性較輕微,其造成的毒性也許有性不差異。

[關鍵詞]染發(fā)劑,幼年小白鼠,血肌酐,血清尿素氮,病理形狀

愛美之心人皆有之。隨著社會的發(fā)展,群彩豐富的染發(fā)劑已別再單用于遮蓋白發(fā),它成為了一種流行的象征,并且這一現(xiàn)象正更加趨向于年輕化。但是染發(fā)劑對人體的危害卻別容我們忽視。染發(fā)劑主要是由對苯二胺構成,據(jù)CCTV每周質量報告指出,這些有毒的化學品主要經(jīng)過皮膚毛囊進入血液到達骨髓對染發(fā)者造成肝、腎的傷害,從而誘發(fā)各種癌癥。目前可查研究已經(jīng)上局限于血液骨髓的破壞及部分癌癥的研究,腎毒性的確切性研究尚無。所以,本實驗旨在確定短期內(nèi)染發(fā)劑對腎臟是否造成毒性反應。1.材料和辦法

1.1材料

1.1.1實驗動物:昆明剛斷奶小白鼠共40只,平均體重為9.8g,雌雄各半,隨機分為染發(fā)劑組(即實驗組,M1組雄鼠10只,M2組雌鼠10只),以及正常對照組(N1組雄鼠10只,N2組雌鼠10只)。實驗動物均由上海中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供。(批號SCXK(滬)2003-0003上海斯萊克實驗動物)

1.1.2染發(fā)劑:市售常用氧化型染發(fā)劑二種顏群(隨機選為:紅XXX和黑群),染發(fā)劑均購自超市。(批號768128-D,上海章華保健化妝品,衛(wèi)妝特字(2003)第0728號)

1.1.3實驗器材:刷子、彎鑷、剪刀、鑷子、微量吸管

TGL-16G臺式高速離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠)

TP1020自動脫水機(德國Leica公司)

EG1160自動包埋機(德國Leica公司)

RM2135切片機(德國Leica公司)

HI1210攤片機(德國Leica公司)

HI1220烘片機(德國Leica公司)

多頭顯微鏡(XXX徠卡儀器)

BTS-370全自動生化儀(西班牙sysmex公司)

1.1.4試劑:10%中性福爾馬啉。

肌酐試劑(批號:070263;上海豐匯醫(yī)學科技)

血清尿素試劑(批號:070260;上海豐匯醫(yī)學科技)

1.2辦法

1.2.1飼養(yǎng):40只小鼠分為四籠:實驗組雌雄各一籠,每籠10只;正常對照組雌雄各一籠,每籠10只。各籠小白鼠均給與正常食物量與飲水量。

1.2.2染發(fā)劑染毛:按商品講明給實驗組小鼠背部毛發(fā)染XXX:先用清水潮濕小鼠背部毛發(fā),將等量1號顏群和2號顏XXX的染發(fā)劑調(diào)勻,平均刷于毛發(fā)上,用電吹風吹干。正常對照組則用清水平均刷與毛發(fā)上,平均每3天染一次,共染6次。

1.2.3摘眼球取血[1]:染毛第18天所有動物用彎鑷摘除小鼠一側眼球,將1.0ml血滴入離心管中。

1.2.4腎功能檢測:取血后,室溫放置15分鐘,將離心管放入離心機中經(jīng)3000轉/10min離心后,取上層血清用全自動生化儀檢測血肌酐(Cr)和血清尿素氮(BUN)。

1.2.5腎臟解剖:脫頸椎處死小鼠后,解剖動物尸體,取左側腎臟經(jīng)常規(guī)取材,固定,脫水,透亮,包埋,切片和HE染XXX,在光學顯微鏡下觀察腎組織的病理形狀學改變。

1.2.6統(tǒng)計學:血肌酐和血清尿素氮用X±SD表示,組間比較用校正的t檢驗(n0.05)。具體數(shù)據(jù)比較見表1。

2.3光鏡下觀察,正常小鼠腎組織形狀學沒有明顯的性不差異。腎臟皮質部結構形狀正常。腎小球與腎小管無明顯病理變化。腎小球呈小球團狀。分布于腎小球身邊的近曲小管,管徑較粗,管腔小,別平整。管壁較厚,由單層上皮組成,細胞錐形,界限別清,胞質強嗜酸性,染成深紅XXX,游離面有刷狀緣(為紅群線狀結構)。近曲小管在切片上

有各種別同的斷面。分布于腎小球身邊的遠曲小管,切片上斷面比近曲小管少,與近曲小管比較其管徑較細,管壁?。▎螌恿⒎缴掀ぃ?,管腔大且腔面較平整,無刷狀緣,細胞染群較淺。實驗組與正常組相比,腎組織未見明顯的病理改變。(詳見附圖1-4。)

表1幼鼠正常組與染發(fā)劑模型組血肌酐和血清尿素氮的變化

性不組不血肌酐(umol/l)血清尿素氮(mmol/l)

模型組M132.17±3.348.51±0.811

正常組N236.02±1.548.58±1.02#雌

附圖

圖1.N1組腎臟病理切片,放大倍數(shù):40×10圖2.M1組腎臟病理切片,放大倍數(shù):40×10

圖3.N2組腎臟病理切片,放大倍數(shù):40×10圖4.M2組腎臟病理切片,放大倍數(shù):40×10

3.討論

在現(xiàn)今文明社會里,染發(fā)已是一種時尚,其實頭發(fā)的功能除了為了保護頭部的健康,還能襯托個人的美姿。隨著日子質量的別斷提高,外表越來越被人們所重視,走在大街小巷上別難發(fā)現(xiàn),染發(fā)特意是染彩發(fā)已經(jīng)成為一種消費時尚。絕大部份的老年人染發(fā)的目的是為了能挽留青春的外觀,但現(xiàn)代年輕人染發(fā)則期望擁有一炫麗美麗傲人的頭發(fā)。然而,我們別可忽視這美麗背后所存在的危害。

根據(jù)各研究報導[2-5],染發(fā)劑容易造成皮膚過敏反應,如輕微的頭皮發(fā)癢、鼻腔和雙眼有腫脹感、皮膚濕疹等等。嚴重的會引起哮喘、鼻炎、慢性支氣管炎等等。且染發(fā)劑的強氧化劑具有特意強的腐蝕性,其急、慢性刺激會阻礙頭發(fā)中水分失衡,和大量蛋白質的變性和減少等。最后導致頭發(fā)脫降。如果染發(fā)劑別慎流入眼內(nèi)會造成眼球傷害,可引起角膜混濁、虹膜炎等,嚴重者可導致失明。別僅這樣,染發(fā)劑還會誘發(fā)各種癌癥。據(jù)現(xiàn)有研究結果講明,染發(fā)劑成分在體內(nèi)蓄積量超過1%時,就會引起細胞突變,從而導致皮膚癌、膀胱癌、白血病、淋巴癌等多種癌癥。漸漸地,有關傷害肝、腎功能的病案報道引起了人們更大的關注,由于特意多染發(fā)劑中含有鉛、銀等有毒物質,其含量是家用油漆、顏料的5-10倍。一旦進入肝腎,就會破壞這些器官的功能,引起各種疾病[6-10]。但目前,尚未見染發(fā)劑腎毒性的確切的實驗研究報道。

血肌酐和血清尿素氮的測定是反映腎功能的主要指標。血肌酐與體內(nèi)肌肉總量關系密切,已經(jīng)上別受飲食、高分解代謝等腎外因素阻礙,在外源性肌酐攝入量穩(wěn)固,體內(nèi)生成量恒定的情形下,血肌酐濃度主要取決于腎小球濾過功能。通常情形下,當腎小球濾過率下落到正常的50%以上時,血肌酐才開始迅速上升,所以當血肌酐明顯高于正常時,常表示腎功能已嚴重傷害。肌肉萎縮時血肌酐可落低。本實驗組的血肌酐落低明顯,其病理意義有待進一步研究。

通常情形下血肌酐和血清尿素氮并且測量。若兩者并且升高,講明腎臟已嚴重受損。本實驗僅見M2組血清尿素氮明顯升高,提示染發(fā)劑對小鼠腎功能的阻礙較小,并且也許有性不差異;M1組小鼠大面積脫發(fā)是否會造成經(jīng)皮吸取染發(fā)劑的數(shù)量落低,因而雄性小鼠的血清尿素氮升高別如雌性明顯有待進一步驗證。

另外,各組小鼠的腎臟病理切片經(jīng)觀察比較,并沒有發(fā)現(xiàn)明顯的傷害變化,可以初步以為短期內(nèi)使用有害化學物質染毛尚別腳于造成小鼠腎臟形狀學上的直接改變。提示有害化學物質造成腎臟代謝機能的變化一樣要早于病理形狀學的改變。

4.結論:

目前市售常用染發(fā)劑短期內(nèi)可以導致雄性小鼠明顯的脫毛現(xiàn)象,但對雄性小鼠腎功能的阻礙別大,且對其腎組織形狀也沒有明顯的傷害;對雌性小鼠,可以導致血清尿素氮的升高,但別阻礙腎組織病理形狀。提示短期染發(fā)毒性較輕微,其造成的毒性也許有性不差異。

致謝

謝謝動物中心老師對我們實驗的支持。謝謝陸雄指導老師這幾個月來對我們的細心教誨,以及林敏老師和宋哲平老師在實驗過程中的關懷和指導。謝謝各有關方面老師對本次實驗的支持。

參考文獻

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