（優選）細菌的耐藥性機制當前1頁，總共25頁。細菌耐藥性機制小組成員：張沛露劉杰范鎏向雪萍當前2頁，總共25頁。知識回顧：耐藥性固有耐藥性獲得性耐藥性染色體介導的耐藥性質粒介導的耐藥性當前3頁，總共25頁。固有耐藥：是指某一病原微生物對某種抗微生物藥物的天然耐藥性，此耐藥性由大多數細菌染色體基因決定。

獲得性耐藥性：是指某一病原微生物接觸抗微生物藥物以后，通過多種方式使自己具有抵抗微生物藥物抑殺作用的能力耐藥性(drugresistance)：是指細菌對抗菌藥物所具有的相對抵抗性，是細菌的一種抗生現象。當前4頁，總共25頁。細菌耐藥性產生的機制（一）、細菌產生滅活酶(二)作用靶位改變(三)細菌細胞膜通透性改變(四)細菌主動藥物外排機制（五）細菌生物被膜的形成1.β一內酰胺酶(β-lactamase)

2.氨基糖苷類杭菌藥物鈍化酶

3.MLS(macrolide-lincosamide-streptogramins)類鈍化酶

4氯霉素乙化酶(chloramphenicolacetyltransferase，CAT)

1、β-內酰胺類杭菌藥物的作用靶位改變2、萬古霉素的作用靶位改變

3、大環內酯類林可霉素鏈陽菌素四環素類氨基糖替類藥物的作用靶位改4.、利福霉素類的作用靶位改變5、喹諾類杭菌藥物的作用靶位改變

6、磺胺類藥物的作用靶位改變當前5頁，總共25頁。抗菌藥物作用靶位

抗菌藥物作用部位作用靶分子青霉素類細胞壁cellwall轉肽酶，內肽酶頭孢菌素類轉肽酶，內肽酶糖肽類D-丙氨酸-D-丙氨酸，多聚酶磷霉素類丙酮酸UDP-NAG轉移酶環絲氨酸丙氨酸消旋酶/合成酶桿菌肽異丙基磷酸鹽核糖體氯霉素類核糖體ribosome肽鏈轉移酶大環內酯類轉位酶林可霉素類肽鏈轉移酶四環素類核糖體亞基A位氨基糖苷類初始合成階段和轉運過程喹諾酮類核酸nucleicacidDNA旋轉酶，拓撲異構酶Ⅳ利福霉素類（DNA、RNA）RNA聚合酶硝基咪唑類nitroimidazoles

DNA支架結構呋喃類furaneDNA支架結構多黏菌素polymyxin細胞膜cellmembrane磷脂磺胺類sulfonamides葉酸合成二氫葉酸合成酶甲氧芐氨嘧啶trimethoprim二氫葉酸還原酶當前6頁，總共25頁。抗生素作用示意圖：當前7頁，總共25頁。（一）細菌產生滅活酶滅活酶

1.β一內酰胺酶

2.氨基糖苷類抗菌藥物鈍化酶3.MLS(macrolide-lincosamide-streptogramins)類鈍化酶4氯霉素乙酰化酶(chloramphenicolacetyltransferase，CAT)當前8頁，總共25頁。1、產生β內酰胺酶

β內酰胺酶抗菌藥活性部位水解β內酰胺酶基本機制細菌對β內酰胺酶的耐藥約80%都是通過產生β內酰胺酶實現的。β內酰胺酶通過與β一內酰胺酶上的羰基共價結合，水解活性中心而使β內酰胺酶抗菌藥失活。當前9頁，總共25頁。當前10頁，總共25頁。2、氨基糖苷類產生鈍化酶抗菌藥物氨基糖苷類鈍化酶修飾使其破壞抗生素的不同和作用點，從而耐藥①乙酰基轉移酶(AAC)，使游離氨基乙酰化

②磷酸轉移酶(APH)，使游離羥基磷酸化;

③核苷轉移酶(AAD或ANT)，使游離羥基核苷化當前11頁，總共25頁。3.MLS(macrolide-lincosamide-streptogramins)類鈍化酶MLS類抗生素即為大環內酯類一林可霉素類一鏈陽霉素類抗生素，這類抗生素盡管在化學結構上的差異很大，但其對細菌的作用機制基本相同可使林可霉素類分子的羥基磷酸化或核苷酰化4氯霉素乙化酶(chloramphenicolacetyltransferase，CAT)氯霉素鈍化酶是酰基轉移酶，該酶存在于葡萄球菌、D組鏈球菌、肺炎鏈球菌、腸桿菌屬和奈瑟菌中，其編碼基因可以定位在染色體上，也可以定位在質粒上。該酶除了能夠酰化氯霉素外，對具有羥基的不同結構的化合物都具有酰化作用。其他兩類鈍化酶：當前12頁，總共25頁。（二）作用靶位的改變①通過改變靶蛋白結構使藥物不能與靶蛋白結合②增加靶蛋白的表達

③生成新的對抗生素親和力低的耐藥靶蛋白

當前13頁，總共25頁。1、β-內酰胺類杭菌藥物的作用靶

青霉素結合蛋白.PBPs是一組位于細菌的細胞膜具有催化作用的酶，參與細菌細胞壁的合成、形態維持和細菌糖肽結構調整等功能。β-內酰胺類抗生素通過抑制PBPs而干擾細菌細胞壁的合成，使細菌變為球形體、絲狀體以及分裂障礙，從而達到殺滅細菌的作用。當前14頁，總共25頁。2、萬古霉素的作用位點改變原因：萬古霉素抗藥性腸球菌(vancomycin-resistantEnterococcus，簡稱VRE)可通過DNA獲得質粒或轉座子以及突變株的發生，而產生耐藥性。將已出現的VRE分為VanA,VanB,VanC,VanD,VanE基因型VanC為固有耐藥性，VanA,VanB,VanD,VanE為獲得耐藥型，其耐藥機制主要與萬古霉素結合靶位改變有關

當前15頁，總共25頁。萬古霉素作用點萬古霉素作用點當前16頁，總共25頁。①大環內酯耐藥菌合成甲基化酶，使位于核糖體50S亞單位的23SrRNA的腺嘌呤甲基化，導致抗菌藥物不能與結合部位合。3、大環內酯類、林可霉素、鏈陽菌素、四環素類、氨基糖苷類藥物的作用靶位改：當前17頁，總共25頁。②大環內酯類抗菌藥物、林可霉素及鏈陽菌素的作用部位相仿，所以耐藥菌對上述3類抗菌藥物常同時耐藥，稱MLS(macRolide,lincosamide，Steptogramins)耐藥。此類耐藥菌的耐藥基因為位于質粒或染色體上的erm(erythromycinresistancemethylase)基因，目前已發現多種erm基因，常見的有ermA、ermC(葡萄球菌屬耐藥基因)、ermAM(鏈球菌屬耐藥基因)③細菌對四環素耐藥的主要原因之一是產生基因tetM編碼的6.8×103‘及7.5×103的可溶性蛋白，該蛋白與核糖體結合，保護核糖體或其他決定簇，從而阻止四環素對蛋白合成的抑制作用。該基因亦與多西環素、米諾環素耐藥有關。④細菌對氨基糖苷類耐藥的主要原因是細菌產生鈍化酶，而有些細菌也可通過編碼核糖體蛋白的基因突變導致核糖體結構改變，從而阻止細菌與抗菌藥物的結合，如抗藥結核分枝桿菌、金葡菌、大腸埃希菌等對鏈霉素的耐藥當前18頁，總共25頁。4喹諾類杭菌藥物的作用靶位改變：

喹諾酮類藥物的主要作用靶位是DNA拓撲異構酶Ⅱ和拓撲異構酶Ⅳ。革蘭陰性菌中DNA拓撲異構酶Ⅱ是.喹諾酮類的第一靶位，而革蘭陽性菌拓撲異構酶Ⅳ是第一靶位。喹諾酮類抗菌藥物通過抑制DNA拓撲異構酶活性而發揮殺菌作用。DNA拓撲異構酶Ⅱ基因突變可引起細菌耐藥，常見于大腸埃希菌:大腸埃希菌的突變發生于gyrA基因序列殘基67-106區域。另外，因DNA拓撲異構酶Ⅱ改變而對喹諾酮類抗菌藥物產生耐藥的細菌還有金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸桿菌屬和假單胞菌等。gyrA蛋白的變異.是DNA旋轉酶變異的主要表現。gyrB蛋白的變異引起的耐藥程度低于gyrA蛋白的變異，臨床分離菌中也不常見。DNA拓撲異構酶Ⅳ一的改變，產生低水平耐藥。當拓撲異構酶Ⅱ,Ⅳ均發生變化時則產生高水平耐藥。當前19頁，總共25頁。切斷環狀結構在對側連接切口（A）DNA回旋酶作用機制正超螺旋DNA負超螺旋DNA喹諾酮類藥物（-）（-）（B）拓撲異構酶Ⅳ作用機制環鏈體（-）異環體當前20頁，總共25頁。5、利福霉素類的作用靶位改變：利福霉素類通過與RNA聚合酶結合，抑制細菌轉錄過程而達到抗菌效果。耐利福霉素細菌如大腸埃希菌、結核分枝桿菌，編碼RNA聚合酶β亞基的基因(rpoB)可產生突變，導致其不易與利福霉素類藥物相結合而產生耐藥性6、磺胺類藥物的作用靶位改變由于細菌不能使用外源性葉酸，磺胺類藥物可通過抑制二氫葉酸合成酶或二氫葉酸還原酶·使細菌發生葉酸代謝障礙，而發揮抑菌作用。耐磺按類藥物的細菌的二氫葉酸合成酶或二氫葉酸還原酶與磺胺類藥物親和力降低，從而產生耐藥。當前21頁，總共25頁。(三