血球計數板使用及相關計算第一頁，共十八頁，2022年，8月28日第二頁，共十八頁，2022年，8月28日第三頁，共十八頁，2022年，8月28日血球計數板的使用方法步驟1．鏡檢。在加樣前，先對計數板的計數室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數；2．加樣。將清潔干燥的血球計數板的計數室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行緩緩滲入，一次性充滿計數室，防止產生氣泡，多余培養液可用濾紙吸去；3．計數。稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部后，將計數板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數室所在位置后，再轉換高倍鏡觀察、計數并記錄。4．清潔。血球計數板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風機吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復清洗直到干凈為止。第四頁，共十八頁，2022年，8月28日計數培養液中酵母菌種群數量的要點：1．每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數板計數酵母菌個數，并作記錄，連續觀察7天。2．從試管中吸出培養液進行計數之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，求得的培養液中的酵母菌數量誤差小。3．如果一個小方格內酵母菌過多，難以數清，應當對培養液進行稀釋。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計數板計數，所得數值乘以稀釋倍數。以每小方格內含有4—5個酵母細胞為宜。第五頁，共十八頁，2022年，8月28日4．活酵母有出芽生殖現象，若芽體達到母細胞大小的一半時，即可作為兩個菌體計數，若芽體小于母細胞一半時為1個酵母細胞。5．對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數同側相鄰兩邊上的菌體數，一般可采取“數上線不數下線，數左線不數右線”的原則處理，另兩邊不計數。6．計數一個樣品要從兩個計數室中計得的平均數值來計算，對每個樣品可計數三次，再取其平均值。第六頁，共十八頁，2022年，8月28日例1、有關“探究培養液中酵母菌數量動態變化”的實驗，正確的敘述是A．改變培養液的pH值不影響K值（環境容納量）大小B．用樣方法調查玻璃容器中酵母菌數量的變化C．取適量培養液滴于普通載玻片后對酵母菌準確計數D．營養條件并非影響酵母菌種群數量變化的唯一因素（參考答案：D）

第七頁，共十八頁，2022年，8月28日例2、為探究培養液中酵母菌種群數量的動態變化，某同學進行了如下操作。其中操作正確的有▲(填下列操作的序號)。①將適量干酵母放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中，在適宜條件下培養②靜置一段時間后，用吸管從錐形瓶中吸取培養液③在血球計數板中央滴一滴培養液，蓋上蓋玻片④用濾紙吸除血球計數板邊緣多余培養液⑤將計數板放在載物臺中央，待酵母菌沉降到計數室底部，在顯微鏡下觀察、計數參考答案：①④⑤第八頁，共十八頁，2022年，8月28日例3、（2008江蘇高考31．）（4）在探究培養液中酵母菌種群數量的動態變化整個實驗過程中，直接從靜置的培養瓶中取培養原液計數的做法是錯誤的，正確的方法是▲和▲。（5）實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是錯誤的，正確的方法是▲。（參考答案（4）搖勻培養液后再取樣樣液稀釋后再計數（5）浸泡和沖洗）第九頁，共十八頁，2022年，8月28日推導：1mm×1mm方格的計數

1mm×1mm表示計數室的邊長，即一個大方格的邊長。由于計數室厚度為0.1mm，所以計數室的總體積為0.1mm3。

1．16×25型的計數公式：

酵母細胞個數／1mL=100個小方格細胞總數/100×400×10000×稀釋倍數

2．25×16型的計數公式：

酵母細胞個數／1mL＝80個小方格細胞總數/80×400×10000×稀釋倍數

假設：計數室內酵母菌為a個，稀釋倍數為b，則10mL培養液中酵母菌總數為：a×105×b

第十頁，共十八頁，2022年，8月28日例4、通常用血球計數板對培養液中酵母菌進行計數，若計數室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個小方格組成，如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數，應先▲后再計數。若多次重復計數后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養液中酵母菌總數有▲個。（參考答案：稀釋；2×108）5×400×10000×10＝2×108。第十一頁，共十八頁，2022年，8月28日例5、檢測員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數量；將蓋玻片放在計數室上，用吸管吸取少許培養液使其自行滲入計數室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3。現觀察到圖中該計數室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻▲個／mL。（參考答案：5n×105）第十二頁，共十八頁，2022年，8月28日例6、在用血球計數板（2mm×2mm方格）對某一稀釋50倍樣品進行計數時，發現在一個計數室內（蓋玻片下的培養液厚度為0.1mm）酵母菌平均數為16個，據此估算10mL培養液中有酵母菌

▲個。（參考答案：2×107）

第十三頁，共十八頁，2022年，8月28日總結：2mm×2mm方格的計數

2mm×2mm表示計數室的邊長，即一個大方格的邊長。由于計數室厚度為0.1mm，所以計數區的總體積為0.4mm3。

計數室通常也有兩種規格：一種是16×25型，另一種是25×16型。

假設：計數室內酵母菌為a個，稀釋倍數為b，則10mL培養液中酵母菌總數為：a/4×105×b1．16×25型的計數公式為：

酵母細胞個數／1mL=100個小方格細胞總數/100×100×10000×稀釋倍數

2．25×16型的計數公式為：

酵母細胞個數／1mL

＝80個小方格細胞總數/80×100×10000×稀釋倍數

第十四頁，共十八頁，2022年，8月28日例7、跳蟲、甲螨和線蟲是土壤中的主要動物類群，對動植物的分解起重要作用。請回答：（1）由于跳蟲和甲螨活動能力

，身體

，不適合用手直接捕捉，常采用吸蟲器等進行采集。(2)現要采集大量的跳蟲用于實驗室培養，最好選擇下圖中的吸蟲器

，理由是

。若要采集大量的甲螨作為標本保存，最好選擇吸蟲器

，理由是

。（3）現在一培養罐內同時培養跳蟲、甲螨和線蟲三個種群，若他們均僅以罐內已有的酵母菌為食，則跳蟲與甲螨之間的關系是

，線蟲與酵母菌之間的關系是

。若跳蟲種群所含能量增長nKJ，則跳蟲消耗的酵母菌所儲存的能量至少為

KJ。第十五頁，共十八頁，2022年，8月28日參考答案：（1）較強微小（2）B該吸蟲器中的濕棉花模擬了土壤濕潤環境，利于跳蟲存活D該吸蟲器中的酒精可將收集的甲螨及時固定，防止腐爛（3）競爭捕食5n第十六頁，共十八頁，2022年，8月28日解析：從例5