1.卵2.—齡幼蟲3.1.卵2.—齡幼蟲3.二齡幼蟲4.三齡幼蟲 5.蛹 6.成前端背面伸出一，附著在食物上。果蠅的性狀觀察及飼養管理—■實驗目的了解果蠅的生活習慣，掌握果蠅飼養管理的方法，學習鑒定果蠅的雌雄性別和某些遺傳性狀。二■實驗原理及預備知識1.果蠅廣泛存在于全球溫帶及熱帶氣候區，且由于其主食為腐爛水果，在人類的棲息地如果園、菜市場等地皆可見其蹤跡。目前已發現1000多種果蠅，果蠅以酵母菌為主要食料，能發酵的水果或植物基質，都可用作果蠅的飼料。2?黑腹果蠅屬于雙翅目，果蠅屬，且具有以下特點：（1） 生活史短，每12天左右即可完成一個世代；（2） 飼養容易，以玉米粉等做飼料就可以生長繁殖；（3） 繁殖能力強，每只受精的雌蠅可以產卵500個左右；（4） 突變型多，突變性狀多，多數是形態變異，容易觀察；（5） 染色體少、個體小，是一種很好的遺傳學實驗材料，是一種模式生物。3.1908年，遺傳學家摩爾根把果蠅帶上了遺傳學研究的歷史舞臺，約在此后30年的時間中，果蠅成為經典遺傳學的“主角”。摩爾根提出了基因在染色體上直線排列以及連鎖交換定律，并于1933年被授予諾貝爾獎。1946年，摩爾根的學生，被譽為“果蠅的突變大師”的米勒，證明X射線能使果蠅的突變率提高150倍，因而成為諾貝爾獎獲得者。在近代發育生物學研究領域中，果蠅的發生遺傳學獨領風騷。1995年，諾貝爾獎再次授予三位在果蠅研究中辛勤耕耘的科學家。4.果蠅的生活史。果蠅是完全變態昆蟲，生活周期可分為4個時期：卵、幼蟲、蛹和成蟲。最適培養溫度20?25°C，溫度越高，生長越快，但高于30C不育甚至死亡。（1） 卵：白色，橢圓形，長約0.5mm,三齡，三齡體長4-5mm，幼蟲頭尖尾鈍，頭上有（三齡，三齡體長4-5mm，幼蟲頭尖尾鈍，頭上有（3）蛹：化蛹前三齡幼蟲停止攝食，爬到相對干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形狀由淡黃、柔軟逐漸硬化為深褐色。（4）成蟲：剛羽化的果蠅蟲體較肥大，體表呈半透明，顏色逐漸加深，硬化。三■實驗材料黑腹果蠅品系：野生型、突變型（三隱性、黑體）突蟹戡梟翅一rniri四、實驗儀器與試劑實驗儀器：培養箱、高壓滅菌鍋、電磁爐、解剖鏡、搪瓷杯、玻棒、鑷子、培養瓶、海綿塞、濾紙、酒精棉球、毛筆、麻醉瓶、白紙板。實驗試劑：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、瓊脂、玉米粉、白糖。五■實驗內容1.果蠅的飼養管理。使用高溫滅菌的培養瓶培養，酵母菌是果蠅的主要食物，凡能發酵的物質都可以用來培養，常用的為玉米飼料。果蠅培養基的配制。清潔指管，蓋上適當大小的棉塞，置高壓滅菌鍋內，以121°C,1.5大氣壓消毒15分鐘，冷卻備用。按配方稱取培養基各組分。先取一半水加入瓊脂于電磁爐上加熱溶解，再加入蔗糖煮沸。取剩余的水將玉米粉調成糊狀邊攪拌邊加入到瓊脂糖溶液中，煮沸。待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分調勻、分裝。（20ml/管）。玉米粉11.2g蔗糖8.9g干燥酵母粉1g瓊脂1g水100mL果蠅培養基配方果蠅的操作方法：（1）果蠅可用乙醚麻醉，以方便實驗操作。麻醉方法：取一麻醉瓶，瓶口應與培養瓶大小相仿，使兩瓶口相對，培養瓶在上，用手拍擊培養瓶，使果蠅落入麻醉瓶內，迅速蓋上棉塞，滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上，約一分鐘左右果蠅倒臥于瓶底，即可將果蠅倒出進行操作。（注意：過度麻醉將導致果蠅死亡。如果果蠅的翅膀與身體呈45度角翹起，表明麻醉過度，不能復蘇。）（2）果蠅觀察、計數取白瓷板平置于桌面，將麻醉的果蠅倒于白瓷板上，解剖鏡或低倍顯微鏡下進行性狀觀察，并將雌雄果蠅分開放置。接種觀察過的果蠅（2-3對）到新配置的培養瓶中，為避免麻醉的果蠅直接掉落于培養基表面而粘著于培養基表面致死，先將培養瓶橫放，將麻醉的果蠅用毛筆轉移到瓶壁，待其蘇醒后再將培養瓶正立。（3）再麻醉觀察或計數過程中，果蠅可能蘇醒，可準備一玻璃培養皿，內以膠帶貼一小塊棉球，滴入適量乙醚，培養皿口朝下置于一旁備用，如見果蠅翻身走動可將培養皿口朝下，蓋于果蠅上方待其麻醉后再移開。果蠅形態觀察果蠅具有豐富的外表形態差異，包括眼色、眼形、翅形，剛毛形狀與數目等。進行果蠅雜交實驗時必須區分性別，務必熟悉雌雄果蠅的差異。雌果蠅特征為：個體較大、腹部末端較尖、腹部背面有五條黑條紋、腹部腹面有6個腹片、無性梳。雄果蠅特征為：個體較小、腹部末端較鈍、腹部背面有三條黑條紋，最后一條極寬，并延伸到腹面、腹部腹面有4個腹片、前腿跗節上有性梳。\5比較個體大小體節個體較大的為節果腹部底部為產卵管，呈現圓錐狀凸出。雄果蠅在前肢跗節基部外側具有性梳野生型果蠅體色灰，翅膀呈卵圓形，靜止時平放交叉重疊，長度約為腹部長度兩倍。紅眼長翅度兩倍。紅眼長翅突變體果蠅為果蠅的某幾個性狀發生突變，多為眼色，翅型等的變化。六.實驗結果1?所觀察的果蠅有野生型及突變型（三隱性及黑體的果蠅），下圖是野生型果蠅的雌雄果蠅雄性& 雌性早黑斑雄性& 雌性早黑斑2野生型果蠅的主要特征是：體色灰；眼睛眼色磚紅；飽滿的圓形;頭胸部及復眼的周圍具有平直，先端略彎的長型粗黑硬毛-剛毛；翅膀呈圓卵型，有橫隔脈。對于雌蠅，其體型較大，腹部末端較尖，腹部背面有五條黑色條紋,腹部腹面上有較明顯的六個腹片;對于雄性果蠅而言，其腹部橢圓,末端較鈍，觀察期腹部末端有一黑斑，腹部背面有三條黑色條紋,靠近末端的一條最寬，腹部腹面有明顯的四個腹片，第一節足底側最上部有黑色的性疏。2?黑體果蠅體色發黑，眼色亮紅3?三隱性果蠅的表現型為白眼，小翅，焦剛毛。七.實驗結論及問題拓展。1.配置培養基時需注意：配置培養基用的飼養瓶及瓶塞要經過嚴格的高溫消毒，否則瓶中飼料極易染菌，導致實驗失敗；要嚴格按照配方調配培養基各組分，并按規定順序添加，要注意PH不能調過頭，否則影響培養基中各離子的濃度；在加熱過程中要不斷攪拌，防止底部燒焦變黑，同時也防止培養基溢出搪瓷缸；要趁熱將培養基移入培養瓶中，防止瓊脂在搪瓷缸中固化；分裝時注意不要將培養基沾染在管口和瓶口，以免浸濕棉塞，引起污染；配好的培養基應該放置在干凈地方保存。2?果蠅觀察是需注意：在接放果蠅時，注意正確使用乙醚麻醉劑，用完后蓋好，同時實驗室注意通風；麻醉要適度，過度麻醉將導致果蠅死亡；如果果