《基因工程制藥》期終考試試卷號學題號一二三四五號學題號一二三四五六總分核分人分數注意：請將所有答案填到答題紙上。一、選擇題（每小題只有一個正確的答案,每小題1分,閱卷人共30分）.天然限制性內切酶HindIII的來源是:A.BacillusamyloliquefaciensB.Escherichiacoli名姓A.BacillusamyloliquefaciensB.Escherichiacoli名姓C.HaemophilusinfluenzaeD.Providenciastuartii.天然限制性內切酶BamHI的來源是:A．BacillusamyloliquefaciensB．EscherichiacoliA．BacillusamyloliquefaciensB．EscherichiacoliC．HaemophilusinfluenzaeD．Providenciastuartii.堿法提取質粒DNA時，為了去除RNA,常采用哪種酶水解RNA。D．DNaseA.DNA連接酶 B.核酸內切酶CD．DNase級班4級班4.T4-DNA連接酶需要的輔助因子分別是:A．NAD B．ATP C．ADP D．NADHTOC\o"1-5"\h\z5.至今發現的限制性核酸內切酶可分為3種類型，真正用于基因工程操作的是裝哪種核酸內切酶： （）A.I型酶 B.II型酶C.I型酶 D.3種類型都有用6.限制性核酸內切酶作用的底物是： （ ）A.單鏈DNA B.雙鏈DNAC.單鏈RNA D.雙鏈RNA7.具互補黏性末端的兩DNA片段間的連接可用以下哪種連接酶： （ ）A.大腸桿菌DNA連接酶或T4DNA連接酶 B.大腸桿菌DNA連接酶C.T4DNA連接酶 D.兩者都不能用8.某一雙鏈環狀DNA含有n個限制性核酸內切酶HindIII的識別序列，用HindIII完全酶切該雙鏈環狀DNA后，產生的片段數為： （）A.n B.n+1 C.n-1 D.n+29.提高重組率的方法包括： （）I加大外源DNA與載體的分子之比II載體分子除磷III連接酶過量IV延長連接反應時間A.I+II B.I+II+IIIC.I+III+IV D.I+II+III+IVSouthern印跡雜交作用的對象是： （ ）A.DNAB.RNA C.蛋白質 D.以上都不對DNA分子在電場作用下，可在凝膠中向正極方向移動，對其遷移率描述正確的是： （ ）A.遷移率與DNA分子的構型和大小相關，而與DNA分子中的堿基組成和順序無關B.遷移率與DNA分子的構型和大小以及DNA分子中的堿基組成和順序都相關C.遷移率與DNA分子的構型和大小無關，而與DNA分子中的堿基組成和順序相關D.遷移率與DNA分子的構型和大小以及DNA分子中的堿基組成和順序都無關TOC\o"1-5"\h\z以下哪種細胞是真核生物受體菌： （ ）A.大腸桿菌 B.枯草桿菌C.藍細菌D.酵母菌限制性核酸內切酶以雙鏈DNA為底物，在合適的反應條件下，識別一定的核甘酸序列，使兩條核甘酸鏈上特定位置的什么鍵斷開，產生具有3,-OH基團和5,-P基團的片段： （）A.氫鍵B.磷酸二酯鍵 C.磷酸三酯鍵 D.其他化學鍵PCR循環中采用的酶是： （ ）A.Klenowfragment B.大腸桿菌DNA聚合酶2.TaqDNA聚合酶 D.T4DNA聚合酶.熱激法轉化大腸桿菌的溫度是多少：A.37℃ B.42℃ C.56℃D.72℃TOC\o"1-5"\h\z.在最優PCR反應條件下，經過4次循環后，待擴增的特異性DNA片段可達到多少個拷貝數： （ ）A.4 B.8 C.16 D.32.雙鏈DNA的兩條脫氧核甘酸鏈中，以下堿基互補配對正確的是：（ ）A.A與T、G與C B.A與C、G與TC.A與G、C與T D.A與T、G與U.基因工程操作的三大基本元件是： （ ）I供體II受體III載體IV抗體V配體A.I+II+III B.I+III+IVC.II+III+IV D.II+IV+V.瓊脂糖電泳中DNA用什么染色： （ ）A.EBB.考馬斯亮藍 C.澳酚藍D.二甲苯青T4-DNA連接酶是通過形成磷酸二酯鍵將兩段DNA片段連接在一起，其底物的關鍵基團是： （ ）A.2'-OH和5'-P B.2'-OH和3'-PC.3'-OH和2'-P D.3'-OH和5'-P21.下列哪個試劑可以用于制備感受態大腸桿菌： （ ）A.KCl B.CaSO4C.CaCl2 D.CuSO4DNA在多少波長處有最大吸收峰： （ ）A.260nm B.280nmC.560nmD.600nm.限制性內切酶切割方式有： （ ）A.切成平頭 B.切成5‘端突出黏性末端C.切成3?端突出黏性末端 D.以上都對.下列五個DNA片段，最可能含有BglII酶切位點的是： （ ）3A.GAAACTGCTTTGACBA.GAAACTGCTTTGACB.GAAAAGATCTACTGC.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC25.下列哪一個不是II型限制性內切酶的特點:A.A.通常識別4-8個相連的核甘酸B.識別序列為旋轉對稱C.序列內通常富含C.序列內通常富含GC26.關于PCR說法錯誤的是:D.切割位點一定在識別序列內A.原理類似于體內DNA復制A.原理類似于體內DNA復制C.循環次數越多越好B.D.需要鎂離子的參與延伸溫度是72℃.下列哪一個不是重組子的篩選鑒定方法:B.電泳鑒定AB.電泳鑒定C.PCRDC.PCR.蛋白質分子量的測定可以用哪個方法:A.A.瓊脂糖凝膠電泳B.SDSC.PCR29.基因工程常用的載體有:A.質粒B.病毒C.人工染色體DC.PCR29.基因工程常用的載體有:A.質粒B.病毒C.人工染色體D.以上都是30.細菌耐藥性基因位于：質粒B.染色體DNAC.RNA D.小的線性DNA閱卷人A.二、填空題（每空1分，共12分）D.Northernblot1.至今發現的限制性核酸內切酶可分為3種類型，即I型酶、II型酶和III型酶，它們各具特性；在基因工程操作中真正有用的是。2.2.PCR的中文全稱是，其基本過程包括，應用的聚合酶是。.同一質粒不同構型在電泳中由快至慢依次為.克隆載體基本要點是閱卷人三、判斷題（每小題閱卷人三、判斷題（每小題1分，共30分）.蛋白質在260nm處有最大吸收峰。TOC\o"1-5"\h\z.DNA在瓊脂糖凝膠電泳是由正極向負極移動。 （ ）.SDS中蛋白質用考馬斯亮藍染色。 （ ）.分子剪刀是DNA連接酶。 （ ）.通常用雙倍體積的無水乙醇沉淀溶液中的DNA。 （ ）.平末端的連接效率比黏性末端的連接效率高。 （ ）.大腸桿菌表達系統能對表達的蛋白進行后加工。 （ ）.DNA的OD260/280為1.6時說明有RNA污染。 （ ）.SDS中蛋白質的遷移率與蛋白質的結構有關。 （ ）.PCR的變性溫度為72℃。 （ ）.藍白斑篩選時重組菌為白色。 （ ）.藍白斑篩選時IPTG為誘導劑。 （ ）.堿裂解法提取.質粒DNA時溶液H的作用是復性。 （ ）.蛋白質分子量的測定可用瓊脂糖凝膠電泳法。 （ ）.內含子不參與編碼蛋白質。 （ ）.引物決定了PCR的特異性。 （ ）.PCR中退火溫度與引物的長度和堿基組成有關。 （ ）.基因組中非編碼區對基因的表達沒有任何作用。 （ ）.電擊轉化的效率比熱激法高。 （ ）.原核表達系統的主要缺點是表達的蛋白基本無活性。 （ ）.酵母表達系統的缺點是容易過糖基化。 （ ）.酶切反應溫度都是37℃。 （ ）.連接反應溫度都是37℃。 （ ）.瓊脂糖電泳中跑得最快的是線性質粒。 （ ）.PCR中循環次數越多越好。 （ ）.病毒不能作為基因工程載體。 （ ）.基因工程中常用的是松弛型質粒。 （ ）.瓊脂糖凝膠電泳中瓊脂糖的濃度通常為0.8%。 （ ）.任何質粒都可以作為基因工程載體。 （ ）5.任何大腸桿菌都可以作為基因工程受體。閱卷人 三、名詞解釋（每小題2分，共8分）.感受態細胞.MCS.限制性內切酶.引物閱卷人| 「四、簡答題（每小題5分，共10分）.簡述堿裂解法提取質粒的過程。.簡述藍白斑篩選的原理。閱卷入五、論述題（每小題10分，共10分）1.真核生物基因用大腸桿菌表達系統表達有哪些弊端？你認為外源真核基因最理想的表達系統是什么，為什么？《基因工程制藥》期終考試試卷題號二三四五-i-八總分核分人分數號-學二線閱卷人一、選擇題（每小題只有一個正確的答案，請將其代碼填入下面表格中，每小題1分，共30分）名I題號12345678910答案題號11121314151617181920答案題號21222324252627282930姓二答案訂閱卷人二、填空題（每空1