生物化學試驗基本操作一.生物化學試驗基本操作——玻璃儀器的洗滌洗滌干凈的標準：在生化試驗中，玻璃儀器干凈與否，是獲得精確結果的重要環節。干凈的玻璃儀器內壁應特殊光明光滑，無水珠附著在玻壁上。㈠常用的洗滌方法：1.一般儀器（如燒杯、試管等）：可用毛刷蘸肥皂液、合成洗滌劑細致刷洗。然后用自來水反復沖洗，最終用少量蒸餾水沖洗2~3次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干備用。2.容量分析儀器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）：不能用毛刷刷洗。用后應剛好用自來水多次沖洗，細心檢查干凈程度，依據掛不掛水珠實行不同處理方法。（1）如不掛水珠，用蒸餾水沖洗、干燥，方法同上；（2）如掛水珠，則應瀝干后用重鉻酸鉀洗液浸泡4~6小時，然后按上法依次操作，即先用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，最終干燥。

3.粘附有血漿的刻度吸量管等，有三種洗滌方法：（1）先用45%尿素溶液浸泡，使血漿蛋白溶解，然后用自來水沖洗；（2）也可用1%氨水浸泡，使血漿溶解，然后再依次用1%稀鹽酸溶液、自來水沖洗；（3）以上二法如達不到清潔要求，可浸泡于重鉻酸鉀洗液4~6小時，再用大量自來水沖洗，最終用蒸餾水沖洗2~3次。4.新購置的玻璃儀器:應先置于1~2%稀鹽酸溶液中浸泡2~6小時，除去附著的游離堿，再用自來水沖洗干凈，最終用蒸餾水沖洗2~3次。

凡用過的玻璃儀器，均應立刻洗滌，久置干枯后洗滌特殊困難。如不能剛好洗滌，先用流水初步沖洗后浸泡在清水中，待后按常規處理。

二.生物化學試驗基本操作——吸量管的運用吸量管和定量吸(移)液器(微量加樣器)均為用來轉移確定體積溶液的量器。㈠吸量管：生化試驗中常用的有三種，最常用的是刻度吸量管。

1.刻度吸量管：⑴刻度吸量管的種類：①按容量規格來分，有0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、5、10ml等數種。其精密度按不同的容積可達移取量的0.1~1%。通常將管身標明的總容量分刻為100等分。因此，10ml的吸量管一格代表0.1ml；1ml的吸量管一格代表0.01ml,其余類推。②按“零”點位置來分，有“0”點在吸量管上端的（即讀數從上而下漸漸增大），也有“0”點在吸量管下端的（讀數從下而上漸漸增大)。兩種標示方法，在運用時各有便利之處。③按刻度方法來分，刻度吸量管也有兩種，一種是刻度刻到尖端的，將液體放出時，應吹出殘留在吸量管尖端的少量液體，另一種是刻度不刻到尖端的。

⑵刻度吸量管的正確運用方法：用右手拇指和中指夾住管身，將吸量管的尖端伸入試液深處，左手持洗耳球把試液吸入管內至高過刻度以上時，快速用右手食指按住吸量管的上口，以限制試液的泄放。吸液后應盡量使吸量管保持垂直，使右眼與刻度等高，略微輕抬食指或輕輕轉動吸量管，使試液面緩慢著陸，至管內試液彎月面的最低點與吸量管的刻度線相齊為止。

然后將吸量管插到需加試劑的容器中，讓尖端與容器內壁靠緊，松開食指讓液體流出。液體流完后再等15秒鐘，捻動一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，則吹出尖端的液體后再捻轉一下吸量管移去）。

⑶運用刻度吸量管的留意事項：①選擇適當規格的吸量管：吸量管的最大容積應等于或略大于所需容積（ml數）。②細致看清吸量管的刻度狀況：刻度是否包括吸量管尖端的液體？讀數方向是從上而下，還是從下而上？③拿吸量管時，刻度確定要面對自己，以便讀數。④吸取試劑時應留意三點：一是先吹去吸量管內可能存在的殘留液體，二是將吸量管插入試劑液面深部(以免吸液過程中因液面降低而吸入空氣產生氣泡或管內試劑進入洗耳球)，三是運用洗耳球(不行干脆用口吸)。

⑤按吸量管上口時應當用食指，不能用拇指。⑥吸取粘滯性大的液體(如血液、血漿、血清等)時，除選用合適的吸管(奧氏管)外，應留意拭凈管尖附著的液體，盡量減慢放液速度(用食指壓力限制)，待液體流盡后吹出管尖殘留的最終一滴液體。⑦運用的吸量管應干凈、干燥無水。如急用而又有水時，可用少量欲取試劑沖洗3次，以免試劑被稀釋。

㈡定量吸(移)液器(微量加樣器)：定量吸液器是吸量管的革新產品。由塑料制成。目前，因產地廠家不同其質量、價格差異特殊懸殊。1.定量吸液器的優點：運用便利，取、加樣快速，計量精確，不易破損，能吸取多種樣品（只換吸嘴即可）。

2.定量吸液器的類型：有兩種類型。⑴固定式：只能取加確定容量的試劑，不能隨意調整取加樣量。其規格有10μl、20μl、25μl、30μl、50μl、100μl、200μl、250μl、300μl、400μl、500μl、1000μl等。

⑵可調式：在確定容量范圍內可依據須要進行調整取加樣量。例如規格為50～200μl的可調式定量吸液器，可以在50到200μl的范圍內依據須要調整成設計容許的各種取加樣容量（60μl、85μl、110μl、170μl、200μl等）。一般來講，固定式吸液器比較精確，可調式吸液器運用較為便利。

3.定量吸液器的運用方法：⑴選擇適當的吸液器。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要輕輕旋緊一下，以保證結合嚴密。⑵持法：右手四指（除大拇指外）并攏握住吸液器外殼（使外殼突起部分搭在食指近端），大拇指輕輕放在吸液器的按鈕上。⑶取樣(吸液)：用大拇指按下按鈕到第一停止點，以排出確定容量的空氣，隨后把吸嘴尖浸入取樣液內，緩緩松開大拇指，讓按鈕漸漸自行復原，取樣即告完成。

⑷排液：將吸液器的吸嘴尖置于加樣容器壁上，用大拇指漸漸地將按鈕按下到第一停止點，停留1秒鐘（粘性較高的溶液停留時間應適當延長）。然后再把按鈕按到其次停止點上，讓吸嘴沿管壁向上滑動。當吸嘴尖與容器壁或溶液離開時，方可釋放按鈕，使其復原到初始位置。⑸吸液器用后應剛好取下吸嘴。將吸嘴用自來水沖洗后浸入盛水的容器內（以防干枯），待試驗結束后集中細致清洗。

三.生物化學試驗基本操作——溶液的混勻㈠混勻的目的：⒈使反應體系內的各種物質分子很好地相互接觸，充分進行反應；⒉使欲稀釋的溶液成為濃度均一的溶液。

㈡混勻的方法通常有以下幾種：⒈使盛器作離心運動。⒉左手持試管上端，用右手指輕擊試管下半部，使管內溶液作旋轉運動。⒊利用旋渦混合（振蕩）器混勻。⒋不得已時可用干燥清潔的玻璃棒攪勻。

㈢混勻的留意事項：⒈防止盛器內的液體濺出或被污染。⒉嚴禁用手指堵塞管口或瓶口震蕩混勻。

四.生物化學試驗基本操作——離心機的運用離心法是分別沉淀的一種方法。它是利用離心機轉動產生的離心力，使比重較大的物質沉積在管底，以達到與液體分別的目的。因液體在沉淀的上部，故稱清亮的液體部分為上清液。

電動離心機的運用方法：1.將欲離心的液體，置于離心管或小試管內。并檢查離心管或小試管的大小是否與離心機的套管相匹配。2.取出離心機的全部套管，并檢查套管底部是否鋪有軟墊，有無玻璃碎片或漏孔（有玻璃碎片必需取出，漏孔應當用蠟封住）。檢查合格后，將盛有離心液的兩個試管分別放入套管中，然后連套管一起分置于粗天平的兩側，通過往離心管與套管之間滴加水來