抗生素類(lèi)藥物的分析§1概述§2-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素§3氨基糖苷類(lèi)抗生素§4四環(huán)素類(lèi)抗生素§5大環(huán)類(lèi)酯類(lèi)抗生素原料及制劑（原料）％％(*/1967）青霉素類(lèi)36（13）10.3％1.83％頭孢菌素類(lèi)44（16）12.6％2.24％氨基糖苷類(lèi)38（14）10.9％1.93％四環(huán)素類(lèi)18（6）5.2％0.92％大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)43（11）12.4％2.19％其他（>）169（61）48.6％8.59％總計(jì)（>）348（124）17.69％中國(guó)藥典（2005年版二部）收載抗生素類(lèi)藥物§1概述抗生素？抗菌藥物？抗微生物藥物？？一、概念三、常規(guī)分析項(xiàng)目（一）性狀（二）鑒別試驗(yàn)理化方法、生物學(xué)方法。（三）檢查影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的指標(biāo)控制雜質(zhì)的指標(biāo)與臨床安全性密切相關(guān)的指標(biāo)（四）效價(jià)測(cè)定（抗生素有效成分含量）微生物檢定法、理化方法效價(jià)測(cè)定方法微生物檢定法以抗生素對(duì)微生物的抑制或殺傷程度為指標(biāo)來(lái)衡量抗生素效價(jià)理化方法根據(jù)抗生素的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，利用其特有的化學(xué)或物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定特點(diǎn)適用于提純的、化學(xué)結(jié)構(gòu)已明確的抗生素。操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、方法準(zhǔn)確、一定專(zhuān)屬性特點(diǎn)靈敏度高；測(cè)定原理與臨床應(yīng)用的要求一致；適用范圍廣.操作步驟繁多，測(cè)定時(shí)間長(zhǎng),誤差較大.§2

-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素-內(nèi)酰胺抗生素的發(fā)現(xiàn)AlexanderFleming發(fā)現(xiàn)接種青霉菌的培養(yǎng)物可產(chǎn)生抑制金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，1929年，他在英國(guó)圣瑪麗醫(yī)院宣讀一篇論文，引入“青霉素”(Penicilin)名稱(chēng)并論述該物質(zhì)具有非常明確的抗菌活性。1941年臨床證實(shí)青霉素對(duì)多種細(xì)菌感染有效。

Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素頭孢菌素C是Abraham于1948年發(fā)現(xiàn)。一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)1.青霉素族和頭孢菌素族基本結(jié)構(gòu)

青霉素族頭孢菌素族

青霉素Penicilins頭孢菌素Cephalosporins(1)強(qiáng)酸性(2)旋光性(3)UV吸收(3)如有共軛系統(tǒng)則有UV吸收，否則沒(méi)有（4）-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性2.青霉素類(lèi)和頭孢菌素類(lèi)理化性質(zhì)-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性見(jiàn)P313青霉素降解反應(yīng)（分解、分子重排）

強(qiáng)酸性

中強(qiáng)酸、弱酸

堿性或青霉素酶完全水解

（pH=2）（pH=4）分子重排

D-青霉胺青霉酸青霉烯酸青霉噻唑酸

青霉醛二氧化碳脫羧青霉噻唑酸

D-青霉胺

青霉醛

金屬離子(鉛、銅、汞、銀);

催化作用

分光光度法

紅外吸收光譜法*-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素共有特征峰-內(nèi)酰胺羰基伸縮振動(dòng)：1750～1800cm-1仲酰胺氨基、羰基伸縮振動(dòng)：3300cm-1，1525cm-1，1680cm-1

羧酸離子的伸縮振動(dòng)：1600cm-1，1410cm-1供試品的紅外吸收光譜標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品圖譜紫外分光光度法

λmax和水解產(chǎn)物的λmax呈色反應(yīng)H+FeNH4（SO4）21.羥肟酸鐵反應(yīng)a.茚三酮反應(yīng)b.裴林試劑反應(yīng)2.類(lèi)似肽鍵反應(yīng)(-CONH-,-氨基酸結(jié)構(gòu)）呈色反應(yīng)a.重氮苯磺酸(-C6H5-OH)b.變色酸-硫酸c.H2SO4-HNO3d.銅鹽3.其它呈色反應(yīng)色譜法1.薄層色譜法青霉素、頭孢菌素TLC鑒別

結(jié)果判定：供試品所顯主斑點(diǎn)的顏色和位置應(yīng)與對(duì)照品的主斑點(diǎn)相同2.高效液相色譜法

在相同實(shí)驗(yàn)條件下，用高效液相色譜法分別測(cè)定供試品和對(duì)照品的色譜圖，其主峰的保留時(shí)間應(yīng)一致。三、特殊雜質(zhì)檢查1.聚合物2.有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體3.吸光度4.有機(jī)溶劑5.結(jié)晶性1.聚合物Ch.p2005：青霉素V鉀、青霉素鈉、青霉素鉀、頭孢他啶、頭孢拉啶、頭孢曲松鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢哌酮鈉、頭孢唑林鈉、頭孢噻肟鈉等主成分自身對(duì)照面積歸一化法限量法自身對(duì)照外標(biāo)法原理：分子排阻色譜方法：2.有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體*頭孢呋辛酯

異構(gòu)體異構(gòu)體A、異構(gòu)體B、反式異構(gòu)體、頭孢呋辛酯Δ3-異構(gòu)體*頭孢氨芐有關(guān)物質(zhì)α-苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（7-ADCA）頭孢呋辛鈉頭孢呋辛酯7-ADCAα–苯甘氨酸

頭孢氨芐cefalexin測(cè)定一定波長(zhǎng)處雜質(zhì)吸收度來(lái)控制雜質(zhì)量3.吸光度4.有機(jī)溶劑氨芐西林納——二氯甲烷（GC法）頭孢哌酮鈉——丙酮（GC法）頭孢硫脒——?dú)埩羧軇℅C法）頭孢他啶——砒啶（HPLC法）含量=?(1)碘量法青霉素或頭孢菌素分子不消耗碘,其降解產(chǎn)物消耗碘A.OH-水解B.pH4.5.溫度在24260C(3)UV-Vis法A.硫醇汞鹽法B.酸水解法C.羥肟酸比色法(與羥胺作用,在稀酸或中性溶液中加Fe3+)生成紅色絡(luò)合物,測(cè)A(4)HPLC法(2)電位滴定法（汞量法）(青霉素類(lèi)化合物的堿性水解產(chǎn)物可與Cu2+或Hg2+形成穩(wěn)定的絡(luò)合物)。Hg(NO3)2滴定劑（一）碘量法原理青霉素青霉噻唑二鈉第1步第2步青霉噻唑二鈉碘量法討論(1)操作應(yīng)嚴(yán)格遵守規(guī)定條件影響因素多水解條件;反應(yīng)溫度;緩沖液濃度;放置時(shí)間;加碘量;氧化時(shí)間(2)與碘作用溫度和放置時(shí)間

室溫不經(jīng)水解的青霉素分子與碘不起作用,在38°C時(shí)能消耗碘溫度不可過(guò)高,否則空白試驗(yàn)失去意義.(3)淀粉指示劑加入時(shí)間(4)空白試驗(yàn)?zāi)康?消除供試品中可能存在的降解產(chǎn)物及其它能消耗碘的雜質(zhì)的干擾.硝酸汞電位滴定法青霉素堿性條件水解青霉噻唑酸水解青霉胺

硝酸汞

定量反應(yīng)

青霉素:硝酸汞=1:1（第二個(gè)突躍）優(yōu)點(diǎn)：不需青霉素標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照應(yīng)用：中國(guó)藥典（2000年版）收載的青霉素鈉、普魯卡因

青霉素等采用