C50中華人民共和國衛生行業標準WS/T231一2002用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水Mueller-Hintoni瓊脂的檢驗規程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobiallsusceptibilitytesting2002-04-20發布2002-07-01實施中華人民共和國衛生部發布

WS/T231-2002前本標準是在衛生部頒發的《全國臨床檢驗操作規程》第二版)的基礎上，參考NCCLS標準，結合中國國情及衛生系統的實際情況和要求而制定。本標準從2002年7月1日起實施。本標準由衛生部醫政司提出。本標準的附錄A是標準的附錄，附錄B、附錄C都是提示的附錄。本標準由北京大學人民醫院負責起草。本標準主要起草人：張正、楊婧、趙曉濤本標準由衛生部委托衛生部臨床檢驗中心負責解釋。

中華人民共和國衛生行業標準用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水WS/T231-2002Mueller-Hinton瓊脂的檢驗規程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobialsusceptibilitytesting1范圍本規程規定了評價Mueller-Hinton瓊脂(M-H瓊脂)產品批號的要求，包括制造商評價(M-H瓊脂)產品批號的規則及評價新的參考培基的規則、本規程僅適用于評價紙片擴散法抗生素敏感試驗用M-H瓊脂的檢驗，而不能保證M-H瓊脂在其他試驗中的質量，例如瓊脂稀釋或抗生素梯度試驗。材料2.1質控標準菌株用ATCC的凍干標準菌株制備質控菌株，根據ATCC的規定復蘇菌種。所需的菌種有：金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853,類腸球菌ATCC33186(或ATCC29212），金黃色葡萄球菌ATCC43300和大腸埃希菌ATCC35218。2.2菌林TSA培基培養將質控菌種的復蘇液接種于兩或三個含5%羊血的大豆-酪蛋白消化瓊脂(TSA)平板上，置35℃環境中孵育18h~24h。2.3肉湯增菌孵育結束后檢查純度并收獲平板上的全部生長物。在含有15%甘油的大豆-酪蛋白消化肉湯（TSB)中懸浮。(15%TSB的制備：將脫水肉湯培養基30g溶于大約500ml.去離子水中，并添加150mL的甘油，定容至1L,混勾,121℃15min高壓滅菌)。2.4標準菌株復蘇接種平板的前一天，將所需的質控菌種每種各融化一瓶，接種至含5%羊血的TSA平板上，在35℃環境中孵育18h～24h。解育后，如果檢查純度滿意，這些菌林就可以用于接種待測M-H培養基，按WS/T125—1999《紙片法抗菌藥物敏感試驗標準》操作。2.5質控菌種的更新定期用ATCC的新鮮凍干標準菌株更新財存菌種。試驗方法及流程3.1嚴格按照我國已有標準(WS/T125)中規定的步驃和時間進行紙