標準解讀

《GB/T 40458-2021 用于病原微生物高通量檢測的核酸提取技術規范》是由中國國家標準化管理委員會發布的一項國家標準，該標準主要針對病原微生物高通量檢測過程中核酸提取的技術要求進行了詳細規定。其內容涵蓋了核酸提取的基本原則、實驗室環境要求、人員技能與培訓、試劑和耗材的選擇、樣本處理流程以及質量控制等多個方面。

首先，在基本原則部分，強調了實驗操作的安全性、準確性及可重復性的重要性，指出了在整個核酸提取過程中需要遵循的最佳實踐指南。

其次，對于實驗室環境，提出了明確的要求，包括但不限于空氣凈化等級、溫度濕度控制等條件，以確保實驗結果不受外界因素干擾。

在人員技能與培訓章節中，則詳細描述了從事此類工作的技術人員所需具備的專業知識水平及其接受定期培訓的重要性，旨在保證所有操作均由合格人員執行。

關于試劑和耗材的選擇，《GB/T 40458-2021》提供了指導方針，建議根據實際應用場景選擇合適的商業產品或自制方案，并對關鍵參數如純度、穩定性等進行了限定。

樣本處理流程是整個標準的核心內容之一，它系統地介紹了從樣品收集到最終獲得可用于下游分析的高質量核酸樣品的一系列步驟，包括但不限于裂解細胞、去除蛋白質及其他雜質、濃縮目標分子等環節的具體操作方法和技術要點。

此外，為了保證實驗數據的真實性和可靠性，《GB/T 40458-2021》還特別設立了質量控制部分，通過設置內部對照、外部驗證等多種手段來監測并優化整個過程中的表現。

總之，這份文件為相關領域內從業者提供了一份詳盡的操作手冊，有助于提升我國在病原微生物快速篩查領域的技術水平和服務能力。


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  • 正在執行有效
  • 2021-08-20 頒布
  • 2022-03-01 實施
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文檔簡介

ICS6602001

CCSB.16.

中華人民共和國國家標準

GB/T40458—2021

用于病原微生物高通量檢測的

核酸提取技術規范

Specificationofnucleicacidextractionusedforhigh-throughput

detectionofpathogenicmicroorganisms

2021-08-20發布2022-03-01實施

國家市場監督管理總局發布

國家標準化管理委員會

GB/T40458—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規則的規定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文的發布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中山海關技術中心

:、。

本文件主要起草人姜帆張永江陳健岳巧云邱德義

:、、、、。

Ⅰ

GB/T40458—2021

用于病原微生物高通量檢測的

核酸提取技術規范

1范圍

本文件規定了利用二代測序技術對病原微生物進行高通量檢測的核酸的提取要求描述了對應的

,

提取方法

。

本文件適用于植物及其產品的植物病原細菌真菌病毒和病媒生物攜帶的細菌的核酸提取方法

、、。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

實驗室生物安全通用要求

GB19489

衛生檢疫人員的自我防護規范第部分實驗室人員

SN/T2752.44:

國境口岸醫學媒介生物監測實驗室管理要求

SN/T2776

國境口岸醫學媒介昆蟲條形碼鑒定操作規程

SN/T4278—2015DNA

條形碼篩選與質量要求

SN/T4625—2016DNA

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

光密度

OD:(OpticalDensity)

聚合酶鏈式反應

PCR:(PolymeraseChainReaction)

核糖核酸

RNA:(RibonucleicAcid)

5總體要求

核酸提取主要包括生物樣品的裂解和純化兩大步驟裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的

。

過程純化則是使核酸與裂解體系中的其他成分如蛋白質多糖脂類等其他組織或者細胞成分徹底分

,,、、

離的過程

。

核酸提取應保證核酸一級結構的完整性排除其他分子如蛋白質多糖脂類有機溶劑等的污

。,、、、

染保證下游高通量檢測試驗順利進行

,。

試驗過程中應防止外界環境如灰塵氣溶膠酶等對

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