標準解讀

《GB/T 35909-2018 豬肺炎支原體PCR檢測方法》是一項國家標準，規定了使用聚合酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR）技術對豬肺炎支原體進行檢測的具體步驟與要求。該標準適用于疑似感染豬肺炎支原體的豬只樣本，包括但不限于肺組織、鼻拭子等生物材料的病原學診斷。

根據文件內容，首先明確了實驗所需的基本條件和設備，比如核酸提取試劑盒、PCR擴增儀以及電泳系統等，并對這些儀器設備提出了具體的技術參數要求。對于樣本采集，標準詳細描述了不同類型的樣本應該如何正確地收集與保存，以確保后續分析過程中的準確性與可靠性。

在核酸提取環節，標準推薦了幾種常用的DNA提取方法，并給出了每一步操作的具體指導，如裂解細胞、去除蛋白質污染、沉淀DNA等步驟的操作細節。此外，還特別強調了如何避免交叉污染，保證實驗結果的真實有效性。

PCR擴增部分，則是整個檢測流程的核心所在。這里不僅列出了引物序列的設計原則及其選擇依據，還提供了詳細的反應體系配置表，包括各種組分的比例關系及最終體積大小。同時，對于退火溫度、循環次數等關鍵參數也給予了明確指示，以便于實驗室人員能夠按照統一的標準執行實驗。

最后，在產物分析階段，標準介紹了如何通過瓊脂糖凝膠電泳來觀察并判斷目標片段是否成功擴增出來。如果出現預期大小的條帶，則可以認為樣本中含有豬肺炎支原體；反之，則為陰性結果。此外，為了進一步提高檢測靈敏度和特異性，還可以采用熒光定量PCR或巢式PCR等更為先進的技術手段。


如需獲取更多詳盡信息，請直接參考下方經官方授權發布的權威標準文檔。

....

查看全部

  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2018-02-06 頒布
  • 2018-09-01 實施
?正版授權
GB/T 35909-2018豬肺炎支原體PCR檢測方法_第1頁
GB/T 35909-2018豬肺炎支原體PCR檢測方法_第2頁
GB/T 35909-2018豬肺炎支原體PCR檢測方法_第3頁
GB/T 35909-2018豬肺炎支原體PCR檢測方法_第4頁
免費預覽已結束，剩余8頁可下載查看

下載本文檔

GB/T 35909-2018豬肺炎支原體PCR檢測方法-免費下載試讀頁

文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T35909—2018

豬肺炎支原體PCR檢測方法

DetectionofmycoplasmahyopneumoniaeusingPCRmethod

2018-02-06發布2018-09-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

豬肺炎支原體PCR檢測方法

GB/T35909—2018

*

中國標準出版社出版發行

北京市朝陽區和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20182

*

書號

:155066·1-59535

版權專有侵權必究

GB/T35909—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位江蘇省農業科學院

:。

本標準起草人邵國青馮志新熊祺琰劉茂軍張磊王海燕武昱孜韋艷娜劉蓓蓓甘源華利忠

:、、、、、、、、、、、

王佳王麗

、。

Ⅰ

GB/T35909—2018

豬肺炎支原體PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了豬肺炎支原體檢測的操作方法

PCR。

本標準適用于實驗室對豬臨床樣品豬鼻拭子肺組織和支氣管肺泡灌洗液細菌培養物和動物產

(、)、

品中豬肺炎支原體核酸的快速檢測

。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

實驗室生物安全通用要求

GB19489

實驗室質量控制規范動物檢疫

GB/T27401

病死及病害動物無害化處理技術規范農醫發號

[2017]25

獸醫實驗室生物安全管理規范中華人民共和國農業部公告第號

(302)

3術語和定義及縮略語

31術語和定義

.

下列術語和定義適用于本文件

。

311

..

豬肺炎支原體MycoplasmahyopneumoniaeMHP

;

支原體科支原體屬Mycoplasma成員是豬支原體肺炎的主要病原體

(),(MPS)。

注豬支原體肺炎又稱豬氣喘病是一種經呼吸道感染的慢性病對養豬業造成嚴重危害

:,,。

32縮略語

.

下列縮略語適用于本文件

。

聚合酶鏈式反應

PCR(polymerasechainreaction)

磷酸鹽緩沖液

PBS(phosphate-bufferedsalinebuffer)

電泳緩沖液

TAETAE(tris-acetate-ethylenediaminetetraaceticacidbuffer)

電泳緩沖液

TBETBE(tris-borate-ethylenediaminetetraaceticacidbuffer)

Taq酶Taq聚合酶Taq

DNA(DNApolymerase)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs(deoxyribonucleosidetriphosphates)

脫氧核糖核酸

DNA(deoxyribonucleicacid)

溫馨提示

  • 1. 本站所提供的標準文本僅供個人學習、研究之用，未經授權，嚴禁復制、發行、匯編、翻譯或網絡傳播等，侵權必究。
  • 2. 本站所提供的標準均為PDF格式電子版文本（可閱讀打印），因數字商品的特殊性，一經售出，不提供退換貨服務。
  • 3. 標準文檔要求電子版與印刷版保持一致，所以下載的文檔中可能包含空白頁，非文檔質量問題。

評論

0/150

提交評論