ICS6502030

B41..

中華人民共和國國家標準

GB/T286304—2012

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白斑綜合征WSD診斷規程

()

第4部分組織病理學診斷法

:

Diagnosticprotocolsforwhitespotdisease—

Part4Histoatholomethod

:pgy

2012-07-31發布2012-11-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T286304—2012

.

前言

白斑綜合征診斷規程分為五個部分

GB/T28630《(WSD)》:

第部分核酸探針斑點雜交檢測法

———1:;

第部分套式檢測法

———2:PCR;

第部分原位雜交檢測法

———3:;

第部分組織病理學診斷法

———4:;

第部分新鮮組織的染色法

———5:T-E。

本部分為的第部分

GB/T286304。

本部分按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中華人民共和國農業部提出

。

本部分由全國水產標準化技術委員會歸口

(SAC/TC156)。

本部分起草單位中國水產科學研究院黃海水產研究所農業部全國水產技術推廣總站

:、。

本部分主要起草人黃倢楊冰陳愛平宋曉玲史成銀楊叢海魏琦劉莉

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T286304—2012

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白斑綜合征WSD診斷規程

()

第4部分組織病理學診斷法

:

1范圍

的本部分規定了白斑綜合征組織病理學診斷法所需試劑與材料儀器設備操作步驟

GB/T28630、、

和結果判定

。

本部分適用于對發病的對蝦或其他敏感宿主的確診和對懷疑染病宿主的診斷

。

本部分不適用于對潛伏性感染或病毒的非感染性攜帶的標本進行病毒檢測

。

2原理

21白斑綜合征的病原和病理學特征

.

白斑綜合征又稱白斑病白斑綜合癥對蝦暴發性流行

(whitespotsyndrome)(whitespotdisease)、、

病白斑綜合征具有發病急和死亡率高的特征其癥狀是發病對蝦停止攝食反應遲鈍或臥于池邊或

。,,,

在水面浮游某些瀕死對蝦在甲殼上出現白色的斑塊有時伴隨對蝦腹節微微變紅

,,。

白斑綜合征的病原是白斑綜合征病毒或稱白斑病毒

(whitespotsyndromevirus,WSSV)(white

它是一種雙鏈病毒能對大多數養殖對蝦造成有致命的感染病毒

spotvirus,WSV),DNA(dsDNA),。

粒子為長橢圓形具有囊膜和獨特的尾狀物直徑長其基因組大小

,,120nm~150nm,270nm~290nm,

約病毒在細胞核內復制不形成封閉體

300kb。,(occlusionbody)。

瀕死蝦在全身外胚層和中胚層起源的組織中呈現出病灶病毒主要感染的組織包括甲殼下上皮包

,(

括體表和附肢的甲殼下表皮胃上皮和后腸上皮造血組織鰓結締組織觸角腺血細胞和淋巴器官

、)、、、、、

等感染早期在核內形成的包涵體呈嗜酸性隨著病毒的快速復制造成核內染色質邊移

。(inclusion),,,

細胞核肥大包涵體的嗜堿性也越來越強

,。

22技術原理

.

蘇木精伊紅染色在組織學和病理學中是一種常規染色方法通過染色液蘇木精伊紅

-(H-E)。———-

與組織細胞的不同組分分別相結合使細胞核細胞質和細胞內其他結構產生反差明顯的藍紫色和紅

,、

色而可清晰地觀察到各種不同的組織結構病理變化

,。

3試劑和材料

31除非另有說明在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當純度的水

.,。

32石蠟熔點切片級

.(52℃~54℃):。

33二甲苯

.。

34無水乙醇

.。

35乙醇

.95%。

36過濾海水鹽度為的海水在室內放置周后經濾紙和濾膜過濾

.