標準解讀

《GB/T 40249-2021 斑節對蝦桿狀病毒病診斷規程 PCR檢測法》是一項國家標準，旨在通過聚合酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR）技術來診斷斑節對蝦中的桿狀病毒感染情況。該標準詳細規定了從樣品采集到最終結果分析的全過程要求。

首先，在樣品采集方面，標準明確了適合進行PCR檢測的樣本類型以及如何正確地收集這些樣本以確保后續實驗的有效性。這包括但不限于活體或冷凍保存的斑節對蝦組織樣本的選擇與處理方法。

接著是核酸提取步驟，此部分介紹了使用何種試劑盒或者手工操作流程來進行高質量DNA的提取，并強調了避免污染的重要性，因為即使是微量的外源DNA也可能導致假陽性結果。

然后進入PCR擴增階段，這里描述了推薦使用的引物序列、反應條件設置等關鍵參數，同時也指出了選擇合適對照組（如陰性對照和陽性對照）對于驗證實驗系統可靠性的必要性。

最后是對PCR產物的檢測與結果判定環節。根據擴增曲線及熔解曲線特征，結合凝膠電泳圖像或其他形式的數據展示方式，可以準確判斷樣品中是否存在斑節對蝦桿狀病毒DNA片段。此外，還提供了重復性和再現性指標，用以評估不同實驗室之間采用相同方法時的一致性水平。

整個文件不僅為從事水產動物疾病研究的專業人士提供了一套科學嚴謹的操作指南，也促進了行業內關于斑節對蝦健康監測技術交流與發展。


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  • 正在執行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實施
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GB/T 40249-2021斑節對蝦桿狀病毒病診斷規程PCR檢測法_第1頁
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文檔簡介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國國家標準

GB/T40249—2021

斑節對蝦桿狀病毒病診斷規程

PCR檢測法

CodeofdiagnosisforinfectionwithPenaeusmonodon-typebaculovirus—

PCRmethod

2021-05-21發布2021-12-01實施

國家市場監督管理總局發布

國家標準化管理委員會

GB/T40249—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規則的規定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農業農村部提出

。

本文件由全國水產標準化技術委員會歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國水產科學研究院黃海水產研究所全國水產技術推廣總站

:、。

本文件主要起草人楊冰萬曉媛黃倢李清史成銀張鋒宋曉玲余衛忠張慶利李晨劉莉

:、、、、、、、、、、、

許華

。

Ⅰ

GB/T40249—2021

斑節對蝦桿狀病毒病診斷規程

PCR檢測法

1范圍

本文件規定了斑節對蝦桿狀病毒病診斷規程中普遍適用的核酸檢測技術的要求針對斑節對蝦桿

,

狀病毒Penaeusmonodon給出了檢測法所需試劑或材料儀器設備

(-typebaculovirus,MBV),PCR、、

樣品試驗步驟和結果判定

、。

本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進行斑節對蝦桿狀病毒病的流

MBV,

行病學調查診斷檢疫和監測

、、。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

白斑綜合征診斷規程第部分組織病理學診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

堿基對

bp:(basepair)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙啶

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

鹽酸

HCl:(hydrogenchloride)

斑節對蝦桿狀病毒Penaeusmonodon

MBV:(-typebaculovirus)

氫氧化鈉

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶鏈式反應

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Taq水生棲熱菌

:(thermusaquaticus)

鹽酸和緩沖液

TE:TrisE

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