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文檔簡介
會計學1布洛芬在體內的分布改進課前準備取小鼠2只,稱重,編號。2號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。3號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。計時第1頁/共13頁實驗目的掌握測定藥物分布的方法和臨床意義。了解藥物在體內的分布動力學規律。第2頁/共13頁相關知識——藥物分布藥物分布的概念:藥物從血液向組織、細胞間液和細胞內液轉運的過程。藥物分布影響因素:血漿蛋白結合率器官血流量組織細胞結合體液pH和藥物解離度體內屏障血腦屏障、胎盤屏障和血眼屏障第3頁/共13頁小鼠灌胃給予同等劑量的布洛芬溶液后,在不同時間點測量血液、腦、腎、肝中布洛芬的濃度,繪出不同時點的布洛芬的組織分布圖。測量血液、肝中布洛芬濃度采用比色法。實驗原理第4頁/共13頁實驗步驟1標準管的制備:0.00125%布洛芬溶液第5頁/共13頁取小鼠3只(已禁食12h),稱重,編號。1號用生理鹽水灌胃0.1ml/10g,立即斷頭取血搖勻。2號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,30min斷頭取血搖勻。3號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,60min斷頭取血搖勻。取離心管3支編號,分別于1管(對照)、2管(給藥30min)和3管(給藥60min)內加肝素0.1ml,斷頭取血,立即搖勻。分別從3支管中取抗凝血各0.5ml加入已預加無水乙醇4.5ml試管中,搖勻。稱取各小鼠300mg肝組織,分別置于研磨器中,加無水乙醇(0.4ml/100mg)研碎后再加入無水乙醇(0.5ml/100mg)搖勻,制成勻漿后全部傾入試管中。實驗步驟2第6頁/共13頁實驗步驟3編號采樣時間離心管內容物1-1立即取血0.5ml+無水乙醇4.5ml1-2立即取肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)2-130min后血0.5ml+無水乙醇4.5ml2-230min后肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)3-160min后血0.5ml+無水乙醇4.5ml3-260min后肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)第7頁/共13頁實驗步驟4將對照鼠和各給藥鼠的血及組織勻漿離心5min(3500轉/分),分別取上清液3.0ml放入比色杯中(稀釋)如果液體太濃,可用蒸餾水按比例稀釋,得到的光密度值乘以稀釋倍數即實際光密度值。第8頁/共13頁實驗步驟5用分光光度計在222nm波長下以對照鼠樣品管作空白管,測定各用藥樣品管的光密度值,代入到公式換算出血藥濃度(μg/ml)和組織藥物濃度(μg/g)。
血藥濃度(μg/ml)=樣品管濃度×稀釋倍數(10)組織內濃度(μg/g)=樣品管濃度×稀釋倍數(10)第9頁/共13頁實驗后處理利用計算機繪制給藥后血液和肝臟組織中的藥物分布圖。第10頁/共13頁注意事項取血:每次的取血量要準確血樣加至無水乙醇試管應該立即搖勻勻漿:勻漿器上的數字應對應組織勻漿后應立即離心勻漿器應清洗干凈離心:離心前一定要用水配平,離心管不要弄混離心后將轉速和時間歸零
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