歡迎光臨遺傳學實驗

遺傳學實驗日常要求1.課前預習,課間做好實驗記錄,課后詳細總結實驗結果并按時提交實驗報告2.嚴格遵守實驗室的各種規章制度3.

維持實驗臺面、地面衛生,實驗儀器有序、整潔

實驗一、果蠅的形態觀察及性別鑒定(3學時)

Drosophilamelanogaster一、實驗目的1.熟悉果蠅的形態特征、生活史及常見突變性狀;2.區別雌雄果蠅；3.掌握實驗果蠅的飼養、管理及實驗處理方法和技術二、實驗材料、用具及試劑材料:黑腹果蠅(D.

melanogaster）

18﹟,2﹟(vg)

,6﹟(w、sn3、m),10﹟(e),14﹟(vg、e),22﹟(w)

用具:雙目解剖鏡、放大鏡、鑷子、麻醉瓶、白瓷板、毛筆、酒精棉球試劑:乙醚、瓊脂粉、白糖、丙酸、酵母粉、玉米粉等果蠅作實驗材料的優點生活史短繁殖率高突變類型多CS少,唾腺CSbee+

w、m、snwm三、實驗內容1.

生活史觀察2.果蠅的麻醉3.雌雄果蠅的辨別4.突變性狀的觀察1.果蠅的生活史完全變態半天交尾,1d產卵1-2d孵化3d,兩次蛻皮2-3d化蛹4d羽化果蠅的生活周期長短與溫度有關.

30℃以上果蠅不育和死亡,低溫則使它的生活周期延長,生活力降低;最適溫度為20-25℃10℃15℃20℃25℃卵幼蟲

8d

5d幼蟲成蟲

57d

18d6.3d4.2d25℃時,從卵到成蟲約10d,成蟲約活15d

卵:長0.5mm,橢圓形,腹面稍扁平,被絨毛膜,在背面的前端伸出一對觸絲,使卵附著在食物(或瓶壁)上幼蟲:三齡幼蟲長4-5mm,頭部稍尖,黑斑為口器;其后有一對透明的唾液腺;一對生殖腺位于軀體后半部上方,精巢較大,似明顯的黑點,而卵巢則較小,可以此作為鑒別.幼蟲活動力強而貪食,爬行時留下很多條溝,溝多而且寬時,表明幼蟲生長良好.

蛹:化蛹前從培養基爬出,附著在瓶壁上,形成一梭形的蛹.起初蛹殼顏色淡黃而柔軟,以后逐漸硬化,變為深褐色,即將羽化成蟲:剛羽化的蟲體較長,翅膀尚未展開,體表未完全幾丁質化,呈半透明的乳白色;透過腹部體壁,可見黑色的消化系統,漸變為短粗圓形,雙翅展開,體色加深;如WT初為淺灰色,后呈灰褐色果蠅的寄生蟲—螨蟲2.形態構造頭部:一對復眼,一對觸角胸部:三對足,一對翅腹部:背面有黑色環紋,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身被體毛和剛毛

3.

成蟲雌雄的鑒別♀♂體形較大體形較小腹部橢圓,末端稍尖腹部末端鈍圓背面5條黑紋背面3條黑紋,前兩條細,后一條寬且延續至腹面腹面6個腹片(剛毛圍成一圈)4個腹片無性梳第一對跗節基部有性梳外生殖器比較簡單外生殖器較復雜,剛羽化的幼蠅可觀察到生殖弧、肛口板等4.

果蠅常見的幾種突變類型突變性狀基因符號性狀特征所在CS白眼w復眼白色X檀黑體e體呈烏木色,黑亮IIIR黑體b體呈深色IIL殘翅vg翅退化,部分殘留IIR小翅焦剛毛msn翅較短剛毛卷曲XX四、實驗步驟1.果蠅的飼養(1)

培養基的配制

成蠅以酵母菌為食.常用玉米粉配制培養基玉米培養基成份(100ml)水80ml玉米粉8.25g白糖6.2g瓊脂0.62g丙酸0.5ml酵母少許配制方法水分成兩份：一份用于溶解瓊脂和糖,另一份煮玉米粉,待兩份分別溶解煮好后再合到一起煮沸,滅火后加入丙酸;充分攪拌后再分裝培養瓶待培養基冷卻后,在其表面灑稍許酵母粉,插一滅菌的濾紙片作為幼蟲化蛹的干燥場所培養瓶的滅菌準備培養瓶棉塞濾紙包好棉塞滅菌鍋121℃20min配制好的培養基2）果蠅繼代培養果蠅轉移到新配制的培養基中繁殖.轉移時要注意,不要使果蠅從兩個瓶口的接縫處飛出.一般用黑紙包住帶有親本果蠅的培養瓶,使其飛入新培養瓶內準備轉移果蠅的親本及培養基幼蟲化蛹時爬到瓶璧或濾紙上2.

果蠅性狀的觀察1)果蠅的麻醉處理準備一只與培養瓶口徑相同的空瓶作為麻醉瓶,并配以脫脂棉塞去掉培養瓶棉塞,立即與麻醉瓶口相對,培養瓶在上,一手穩住兩瓶,另一手輕輕震拍培養瓶,使果蠅落入麻醉瓶中滴數滴乙醚于麻醉瓶棉塞內,迅速將兩瓶塞住,約30s,麻醉瓶內的果蠅即處于麻醉狀態.不能麻醉過度麻醉后的果蠅放在白瓷板上,用毛筆移動檢查,根據需要用肉眼、放大鏡或解剖鏡觀察;不再用的果蠅務必倒入死蠅盛留器中及時處死,防止品系間混雜果蠅的麻醉滴加乙醚的方法果蠅的麻醉劑轉入麻醉瓶中觀察結果死亡果蠅的標志2）果蠅♀♂識別

♀♂體形大小腹紋53腹部末端尖圓性梳無有果蠅♀♂識別

果蠅♀♂識別

果蠅♀♂識別

果蠅♀♂識別果蠅♀♂識別果蠅性狀觀察3.眼色2.翅大小1.體色wmewvgwm剛毛形態剛毛形態觀察后的結果填入下表類型特征

黑身白眼小翅白眼殘翅紅眼黑檀體wmsn體色黑色(b)正常(+)正常(+)黑色(e)正常眼色白色(w)白色(w)紅色(+)紅色(+)白色翅形正常(+)小翅(m)殘翅(vg)正常(+)小翅剛毛正常(+)正常(+)正常(+)正常(+)卷毛注意事項配制培養基時要將玉米粉及瓊脂分開煮轉移果蠅時要防止果蠅飛走