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熒光探針綜述當紫外或可見光照射到某些物質上時,這些物質就發射出波長和強度各不相同的光線,停止照射光照射時,這種光線馬上或逐漸消失,這就是熒光。1、熒光相關知識簡介反映熒光特性的幾個主要參數:Stokes位移(Δλ)
Δλ=λem-λex熒光強度(F)F=0.23ΦFIοεbcΦF熒光量子產率ΦF=發射的熒光光子數/吸收激發光的光子數ε摩爾消光系數Iο激發光的強度b檢測池厚度c物質濃度熒光壽命(τ)2、熒光探針綜述熒光探針是與氨基酸、多肽、蛋白質和DNA等生物大分子結構以共價鍵或其他形式結合形成發熒光的絡合物或聚集體的一類物質。近年來,熒光標記技術在生物技術領域得到了廣泛而重要的應用。譬如,熒光探針在DNA自動測序,蛋白質檢測,抗體免疫分析,疾病診斷,抗癌藥物分析等方面應用廣泛。2.1分類按照制備方法分:化學熒光探針:用化學方法合成有機小分子熒光探針納米熒光探針基因熒光探針:可遺傳、由DNA編碼、蛋白質組成熒光蛋白(GFP、YFP、DsRed等)2.2有機小分子熒光探針
有機熒光試劑都含有熒光團,熒光團必須含有共軛大π鍵,共軛π鍵達到一定程度才能發射熒光,比如:(—CH=CH—)n(n>2)有機熒光試劑與結構的關系分子共軛體系大小對熒光的影響共軛大π鍵共平面及其剛性的影響取代基對熒光的影響取代基的種類取代基的數量取代基的位置有機小分子熒光探針在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,對環境變化非常敏感,按照熒光發射波長(λem),分類如下:紫外可見區熒光探針近紅外區熒光探針2.2.1紫外可見區熒光探針按照化學結構,主要有以下幾類:香豆素類萘衍生物類啡啶和吖啶類熒光素類羅丹明類BODIPY類芘類2.2.2近紅外區熒光探針噻嗪和噁嗪類酞菁類方酸菁類TO和YO類3、花菁類熒光探針研究思路3.1結構及特點近紅外區熒光探針結構特點是中間為多亞甲基橋,兩端為吲哚、苯并噻唑、苯并噁唑和苯并咪唑等。
為了提高探針的穩定性,常將母體中的多亞甲基鏈改變為方酸環、環戊烯、環己烯等剛性環結構。3.2研究思路思路1:提高光穩定性和水溶性思路2:制成熒
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