第五節定性和定量分析一、定性分析二、定量分析

定性鑒別純度檢查和雜質限量測定單組分的定量方法多組分的定量方法第五節定性和定量分析一、定性分析定性鑒別單組分的定量方法1一、定性分析（一）定性鑒別

定性鑒別的依據→吸收光譜的特征吸收光譜的形狀吸收峰的數目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強度相應的吸光系數一、定性分析（一）定性鑒別定性鑒別的依據→吸收光譜的特征2續前1．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，與標準對照物譜圖或標準譜圖進行對照比較續前1．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，3續前2．對比吸收光譜的特征值續前2．對比吸收光譜的特征值4續前3．對比吸光度或吸光系數的比值：例：續前3．對比吸光度或吸光系數的比值：例：5續前（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）峰位不重疊：

找λ→使主成分無吸收，雜質有吸收→直接考察雜質含量2）峰位重疊：

主成分強吸收，雜質無吸收/弱吸收→與純品比較，E↓雜質強吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形續前（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）6續前2．雜質限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質——腎上腺酮含量計算2mg/mL-0.05mol/L的HCL溶液，λ310nm下測定規定A310≤0.05即符合要求的雜質限量≤0.06%續前2．雜質限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質——腎上腺酮含7二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數法2．標準曲線法3．對照法：外標一點法二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數法8續前1．吸光系數法（絕對法）續前1．吸光系數法（絕對法）9練習例：維生素B12的水溶液在361nm處的百分吸光系數為207，用1cm比色池測得某維生素B12溶液的吸光度是0.414，求該溶液的濃度（見書P201例1）解：練習例：維生素B12的水溶液在361nm處的百分吸光系數為10練習例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm處測定吸光度為0.507，求B12的百分含量？（見書P61例2）解：練習例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100m11練習例：解：練習例：解：12續前2．標準曲線法續前2．標準曲線法13示例

蘆丁含量測定0.710mg/25mL示例蘆丁含量測定0.710mg/25mL14續前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數相同時續前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的15練習例：

維生素B12的含量測定精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀釋至10.00mL；另配制對照液，精密稱定對照品25.00mg，加水稀釋至1000mL。在361nm處，用1cm吸收池，分別測定吸光度為0.508和0.518，求B12注射液注射液的濃度以及標示量的百分含量（該B12注射液的標示量為100μg/mL）見書P203例題解：1）對照法練習例：維生素B12的含量測定解：1）對照法16練習2）吸光系數法練習2）吸光系數法17續前（二）多組分的定量方法三種情況：1．兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）

兩組分在各自λmax下不重疊→分別按單組分定量續前（二）多組分的定量方法三種情況：18續前2．兩組分吸收光譜部分重疊

λ1→測A1→b組分不干擾→可按單組分定量測Caλ2→測A2→a組分干擾→不能按單組分定量測Ca

續前2．兩組分吸收光譜部分重疊19續前3．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測定（1）解線性方程組法（2）等吸收雙波長消去法（3）系數倍率法續前3．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測定（1）解線性方201．解線性方程組法步驟：1．解線性方程組法步驟：212．等吸收雙波長法步驟：

消除a的影響測b2．等吸收雙波長法步驟：消除a的影響測b22續前消去b的影響測a注：須滿足兩個基本條件選定的兩個波長下干擾組分具有等吸收點選定的兩個波長下待測物的吸光度差值應足夠大續前消去b的影響測a注：須滿足兩個基本條件233．系數倍率法前提：干擾組分b不成峰形無等吸收點3．系數倍率法前提：干擾組分b不成峰形24續前步驟：b曲線上任找一點→λ1另一點→λ2優點：同時將待測組分和干擾組分放大信號K倍，提高了待測組分測定靈敏度abλ1

λ2續前步驟：b曲線上任找一點→λ1優點：同時將待測組分和干擾組25練習解：1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密稱取10.00mg，加少量乙醇溶解，轉移至200mL容量瓶中，加水至刻度線，取此溶液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL4mL，加水至刻度線。取此溶液于1cm比色池中，在323nm處測定吸光度為0.463，已知該波長處的，求咖啡酸百分含量（見書后P215題16）練習解：1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密稱取10.026練習解：2．精密稱取0.0500g樣品，置于250mL容量瓶中，加入0.02mol/LHCL溶解，稀釋至刻度。準確吸取2mL，稀釋至100mL。以0.02mol/LHCL為空白,在263nm處用1cm吸收池測定透光率為41.7%，其摩爾吸光系數為12000，被測物分子量為100.0，試計算263nm處和樣品的百分含量。

（見書后P215題17）練習解：2．精密稱取0.0500g樣品，置于250mL容量瓶27第五節定性和定量分析一、定性分析二、定量分析

定性鑒別純度檢查和雜質限量測定單組分的定量方法多組分的定量方法第五節定性和定量分析一、定性分析定性鑒別單組分的定量方法28一、定性分析（一）定性鑒別

定性鑒別的依據→吸收光譜的特征吸收光譜的形狀吸收峰的數目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強度相應的吸光系數一、定性分析（一）定性鑒別定性鑒別的依據→吸收光譜的特征29續前1．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，與標準對照物譜圖或標準譜圖進行對照比較續前1．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，30續前2．對比吸收光譜的特征值續前2．對比吸收光譜的特征值31續前3．對比吸光度或吸光系數的比值：例：續前3．對比吸光度或吸光系數的比值：例：32續前（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）峰位不重疊：

找λ→使主成分無吸收，雜質有吸收→直接考察雜質含量2）峰位重疊：

主成分強吸收，雜質無吸收/弱吸收→與純品比較，E↓雜質強吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形續前（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）33續前2．雜質限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質——腎上腺酮含量計算2mg/mL-0.05mol/L的HCL溶液，λ310nm下測定規定A310≤0.05即符合要求的雜質限量≤0.06%續前2．雜質限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質——腎上腺酮含34二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數法2．標準曲線法3．對照法：外標一點法二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數法35續前1．吸光系數法（絕對法）續前1．吸光系數法（絕對法）36練習例：維生素B12的水溶液在361nm處的百分吸光系數為207，用1cm比色池測得某維生素B12溶液的吸光度是0.414，求該溶液的濃度（見書P201例1）解：練習例：維生素B12的水溶液在361nm處的百分吸光系數為37練習例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm處測定吸光度為0.507，求B12的百分含量？（見書P61例2）解：練習例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100m38練習例：解：練習例：解：39續前2．標準曲線法續前2．標準曲線法40示例

蘆丁含量測定0.710mg/25mL示例蘆丁含量測定0.710mg/25mL41續前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數相同時續前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的42練習例：

維生素B12的含量測定精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀釋至10.00mL；另配制對照液，精密稱定對照品25.00mg，加水稀釋至1000mL。在361nm處，用1cm吸收池，分別測定吸光度為0.508和0.518，求B12注射液注射液的濃度以及標示量的百分含量（該B12注射液的標示量為100μg/mL）見書P203例題解：1）對照法練習例：維生素B12的含量測定解：1）對照法43練習2）吸光系數法練習2）吸光系數法44續前（二）多組分的定量方法三種情況：1．兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）

兩組分在各自λmax下不重疊→分別按單組分定量續前（二）多組分的定量方法三種情況：45續前2．兩組分吸收光譜部分重疊

λ1→測A1→b組分不干擾→可按單組分定量測Caλ2→測A2→a組分干擾→不能按單組分定量測Ca

續前2．兩組分吸收光譜部分重疊46續前3．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測定（1）解線性方程組法（2）等吸收雙波長消去法（3）系數倍率法續前3．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測定（1）解線性方471．解線性方程組法步驟：1．解線性方程組法步驟：482．等吸收雙波長法步驟：

消除a的影響測b2．等吸收雙波長法步驟：消除a的影響測b49續前消去b的影響測a注：須滿足兩個基本條件選定的兩個波長下干擾組分具有等吸收點選定的兩個波長下待測物的吸光度差值應足夠大續前消去b的影響測a注：須滿足兩個基本條件503．系數倍率法前提：干擾組分b不成峰形無等吸收點3．系數倍率法前提：干擾組分b不成峰形51續前步驟：b曲線上任找一點→λ1另一點→λ2優點：同時將待測組分和干擾組分放大信號K倍，提高了待測組分測定靈敏度abλ1

λ2續前步驟：b曲線上任找一點→λ1優點：同時將待測組分和干擾組52練習解：1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密稱取10.00mg，加少量乙醇溶解，轉移至200mL容量瓶中，加水至刻度線，取此溶液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL4mL，加水至刻度線。取此溶液于1cm比色池中，在323nm處測定吸光度為0.463，已知該波長處的，求咖啡酸百分含量（見書后P215題16）練習解：1．取咖啡酸