新版GMP對無菌隔離技術的要求與應用華北制藥2010-8無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件講課內容摘要一、隔離技術簡介二、隔離技術應用依據----法規/指南三、隔離系統的分類四、隔離系統組成要素與關鍵技術介紹五、用戶需求說明（URS）六、隔離器的安裝環境七、隔離系統的驗證八、隔離系統的無菌維持與環境監測技術九、隔離系統的運行維護講課內容摘要一、隔離技術簡介一、隔離技術簡介1、隔離技術的定義2、隔離技術的發展背景3、隔離技術的應用目的4、隔離技術與傳統潔凈技術的比較5、隔離技術的一些典型用途6、主要制造商一、隔離技術簡介1、隔離技術的定義1、隔離技術概述：定義

隔離：采用物理屏障的手段將受控空間與外部環境相互

隔絕的技術。為一種絕對隔離。用于無菌藥品生產的隔離器：能夠利用可再生并且有效的方式去除污染，密封的或是通過高效空氣過濾器（HEPA）實現空氣交換，以此防止周圍環境中微生物的進入及人員帶有的污染物進入受控的環境。系統允許物料通過設計和驗證過的通路進入及（或）排出，并排除污染物的進入。主要用于無菌處理或無菌測試。

1、隔離技術概述：定義隔離：采用物理屏障的手段將受控2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景隔離技術的背景1）源于第二次世界大戰時的手套箱主要用于放射性物質處理。2）戰后核工業制藥工業醫療領域電子工業航天工業食品工業航天工業2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景隔離技術的背景核工業制藥2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景生物學試驗無菌生產制藥工業無菌分裝致敏性\毒性物質圍堵無菌試驗生物安全防護SPF級實驗動物飼養2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景生物學試驗無菌生產制藥工無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件3、隔離技術概述：應用目的滿足產品質量改進的需要安全防護的改進要求降低運行成本提供特殊環境GMP/cGMP資格“可移動的無菌室”

3、隔離技術概述：應用目的滿足產品質量改進的需要4、隔離技術VS傳統潔凈技術項目傳統潔凈室無菌隔離技術消毒/滅菌方法消毒劑擦拭/薰蒸/紫外線照射等方法，受空間等諸多因素影響，效果難以驗證自動氣體滅菌器滅菌，省時省力，氣體分布均勻，效果較好，容易驗證潔凈環境的控制易受人員、物料等諸多因素影響，易受污染，難以控制與外界完全隔離，僅通過HEPA進行空氣交換并可恒定艙內壓力以阻絕外界污染對操作人員的防護取決于操作人員自身完全物料傳送方式傳統的傳遞窗，易導致無菌室環境破壞雙門快速傳遞系統保證在無菌環境中傳遞人員進出需復雜的換鞋/工作服更換等步驟，帶來額外工作量僅通穿戴手套/半身工作服即可運行所需能耗高低誤操作導致的無菌環境污染的風險大，與操作人員有關可能性極小操作和維護成本高低4、隔離技術VS傳統潔凈技術項目傳統潔凈室無菌隔離技術消毒4、隔離技術VS傳統潔凈技術局部100級工作臺工作區的無菌保護無菌隔離器傳統潔凈室隔離器Class10000

Cleanroom4、隔離技術VS傳統潔凈技術局部100級工作區的無菌保護無無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件關鍵操作區氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100級10000級關鍵操作區氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二

MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關鍵點操作者不能進入Grade”A”區域。關鍵操作區氣流方向示例二

MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關鍵點操作者不能進入Grade”A”區域。關鍵操作區氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.4生產用隔離器示例一生產用隔離器示例一生產用隔離器示例二生產用隔離器示例二生產用隔離器示例三生產用隔離器示例三4、無菌隔離技術VS傳統潔凈技術≥5KW0.3~3KW傳統潔凈室隔離器能耗4、無菌隔離技術VS傳統潔凈技術≥5KW0.3~3KW傳隔無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件潔凈區環境監控要求比較WHO美國歐盟中國關鍵操作區的塵粒為控制各級別的潔凈區操作時的塵粒數，應對塵粒進行監測每一生產班次應定期進行監控；粒子計數探頭的安放位置應能取到有代表性的樣品

應對A級區的空氣粒子進行連續測定，并建議對B級區也連續進行測定潔凈室(區)內空氣的微生物數和塵粒數應定期監測，監測結果應記錄存檔。潔凈室(區)在靜態條件下檢測的塵埃粒子數、浮游菌數或沉降菌數必須符合規定，應定期監控動態條件下的潔凈狀況。關鍵操作區的微生物無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態監測；關鍵操作結束后，應對表面和人員的微生物進行監測；應制定微生物監控的警戒和糾偏標準，以監控空氣質量的趨勢關鍵區出現微生物污染時，要進行必要的調查無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態監測；除在生產過程中需進行微生物監控外，系統驗證、清潔和消毒等操作后，也應進行微生物監控；應對塵粒和微生物監控制定適當的警戒和糾偏標準關鍵操作區的壓差應設送風故障報警系統；壓差十分重要的毗鄰級別區之間應安裝壓差表并定期記錄壓差每一班操作過程中，房間的壓差應連續監控并經常記錄。所有報警應有記錄，超過設定限度的各種偏差應進行調查。可列入批記錄中應設送風故障報警系統；壓差十分重要的毗鄰級別區之間應安裝壓差表；壓差數據應定期記錄或者歸入有關文檔中無要求潔凈區環境監控要求比較WHO美國歐盟中國關鍵操作區的塵粒為控潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較5、隔離技術概述：典型用途無菌測試無菌生產（填充、分裝、取樣等）毒性物質圍堵生物安全防護實驗動物飼養5、隔離技術概述：典型用途無菌測試6、隔離技術概述：隔離系統主要制造商

美國沃克公司

德國skan公司

法國LaCalhene公司無菌隔離系統

6、隔離技術概述：隔離系統主要制造商

美國沃克公司二、法規和指南1中國新版GMP二、法規和指南1中國新版GMP二、法規和指南二、法規和指南二、法規和指南FDACDER/CBER（藥物評估與研究中心/生物制品評估與研究中）2004年版《無菌操作指南》鼓勵使用隔離器，

“與傳統的無菌操作方式相比，使用隔離器具有切實的優勢，比如可降低操作過程中被微生物污染的機率。

在生產區采用人員方面的隔離技術,在無菌產品的生產中,會顯著降低周圍環境微生物污染的風險。有很多隔離和傳遞設施可供選擇,隔離和背景環境的設計,必須保證各區域相應的空氣質量要求。二、法規和指南FDACDER/CBER（二、法規和指南PIC/S的縮寫和標志，是用來形容這兩種藥品監察公約（PIC）和藥品檢查合作計劃（PIC的計劃）一起并行運作。PIC/S（藥物檢查合作計劃委員會）recommendationstotheinspectorsfor?Isolatorsusedforasepticprocessingandsterilitytesting?PIC/S

關于《隔離器用于無菌處理和無菌測試》對于檢查員的建議二、法規和指南PIC/S的縮寫和標USP<1208>?Sterilitytesting-Validationofisolatorsystems?---美國藥典EuropeanPharmacopoeia

2.6.1.Sterility--歐洲藥典USP<1208>?Sterilitytesting二、法規和指南*2207生物制品生產過程中使用某些特定活生物體階段的設備應專用，應在隔離或封閉系統內進行。認證檢查指南（2008年版）二、法規和指南*2207生物制品生產過程中使用某些特定活三、隔離器的類型隔離器硬艙體型屏護材料工作用途壓力控制氣流模式操作模式軟艙體型工作站\實驗艙傳遞艙正壓型負壓型層流型紊流型手套型半身服型全身服型三、隔離器的類型隔離器硬艙體屏工壓氣操軟艙體工作站\實驗艙傳三、隔離器的類型軟艙體手套式硬艙體手套式三、隔離器的類型軟艙體手套式硬艙體手套式三、隔離器的類型傳遞艙實驗艙內置無菌檢測系統三、隔離器的類型傳遞艙實驗艙內置無菌檢測系統三、隔離器的類型正壓隔離器負壓隔離器三、隔離器的類型正壓隔離器負壓隔離器三、隔離器的類型手套型半身服型全身服型三、隔離器的類型手套型半身服型全身服型無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件四、隔離系統結構與關鍵技術介紹1、屏護材料2、傳遞/轉移技術3、空氣調節系統4、滅菌/去污技術四、隔離系統結構與關鍵技術介紹1、屏護材料1、屏護材料柔韌性塑膠薄膜（多用于檢測）透明聚氯乙烯（PVC）剛性材質（多用于生產）

1）聚碳酸酯（PC）

2）丙烯酸樹酯/亞克力（Acrylic）

3）鋼化玻璃

4）不銹鋼

1、屏護材料2、傳遞/轉移技術簡易通道氣室物料通道艙門廢物門快速傳遞門2、傳遞/轉移技術簡易通道2、傳遞/轉移技術快速轉移通道系統（RTPs）用于將傳遞隔離器連接至通常不移動的隔離器（工作站）上，將物料送入或廢物移出。RTPs的密封性能非常重要，密封條的完整性；密封圈表面需要擦拭等輔助方式清潔/消毒；物料轉移過程中盡可能避免碰到RTPs表面。2、傳遞/轉移技術快速轉移通道系統（RTPs）2、傳遞/轉移技術快速傳遞通道系統RTPs2、傳遞/轉移技術快速傳遞通道系統RTPs2、傳遞/轉移技術雙門傳遞系統傳遞過程2、傳遞/轉移技術雙門傳遞系統傳遞過程無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件3、空氣調節系統內部氣流模式：1）紊流

常規型隔離器采用，應用于無菌測試居多

2）單向流垂直單向流

水平單向流

以應用于無菌生產居多，但用來處理粉末類或氣霧劑等藥品時，必須考慮如何防止這些原料通過空氣回路再次進入系統。

隔離器的制造者和使用者不應該拘泥于傳統的潔凈室空氣調節系統（HAVC）的設計要求。使用者僅需要論證他們的特殊選擇在此應用/運行條件下能夠有效的運行即可。

3、空氣調節系統內部氣流模式：3、空氣調節系統空氣過濾單元：空氣過濾單元最重要的，亦是唯一的功能是實現隔離器內部無菌狀態的維持進、排氣口必須安裝HEPA級別的過濾器，亦可選用更高級別的ULPA無菌維持階段通過進、排氣口的風機系統連續的充入經過濾的空氣以維持內部設定的壓力滅菌/去污結束，考慮到安全因素和滅菌/消毒劑的快速排空，隔離器必須具有一個獨立的通風管道系統。該系統并須被證實對隔離器的完整性沒有影響3、空氣調節系統空氣過濾單元：3、空氣調節系統溫度和濕度采用VHPS技術滅菌/去污的隔離器自身適宜于極低濕度環境中運行。循環過程中，溫度和濕度應該作為很重要的考慮事項。通常，在考慮操作員的舒適度的情況下，溫度控制在20-25℃，濕度為50％±10％范圍內。若不考慮操作員的舒適度，溫度和濕度的控制范圍僅由加工要求確定。3、空氣調節系統溫度和濕度3、空氣調節系統換氣次數和風速

隔離器系統的換氣次數規范應該針對具體情況進行確定。通常不需要遵照傳統潔凈室所建議的每小時最低20次的要求。通常，氣流量能夠維持一個設定的壓力（單向流型隔離器能夠基本維持單向的氣流）。無論目的是防止污染物進入隔離器內部（應用于無菌）或將污染物圍堵在隔離器內部（應用于防護），更少的換氣次數顯然能簡化隔離器的設計和操作，并提高整個系統性能的穩定性。單向流隔離器的氣流速度（風速），僅需要保持充足以維持內部空氣的穩定。紊流隔離器一般無風速要求。3、空氣調節系統換氣次數和風速4、滅菌/去污技術

4.1概述現在：低溫氣體自動化滅菌技術自動化氣體發生器1）STERIS、BIOQUELL、

SKAN、Gaodetailin2）Plazlyte、Citomat3）Gaodetailin4）Johnson&Johnson早期：

擦拭、噴霧、薰蒸滅菌劑：1）汽化過氧化氫(VHP)2）過氧乙酸(PAA)3）臭氧(Ozone)4）二氧化氯(CD)4、滅菌/去污技術

4.1概述現在：自動化氣體發生器1）ST4、隔離器的去污/滅菌技術BIOQUELLVPHPSTERISVHP

HTYVHPS最新的自動化滅菌系統4、隔離器的去污/滅菌技術BIOQUELLVPHPSTER4、隔離器的去污/滅菌技術Citomat型過氧乙酸滅菌系統HTY型臭氧消毒系統HTY簡易型VHPS

簡易型滅菌/消毒單元4、隔離器的去污/滅菌技術Citomat型過氧乙酸滅菌系統

4.2汽化過氧化氫滅菌(VHPS)技術VHP（Vaporized/VaporousHydrogenPeroxide)汽化過氧化氫發生消毒系統VPHP（VaporPhaseHydrogenPeroxide）隔離器循環使用氣相參數釋放過氧化氫（VPHP）消毒器HPV（HydrogenPeroxideVapor）過氧化氫蒸氣（HPV）的消毒系統VHPS（Vaporized/VaporousHydrogenPeroxideSterilization）過氧化氫蒸氣（VHPS）的消毒系統

4.2汽化過氧化氫滅菌(VHPS)技術VHP（Vapori五、用戶需求細則（URS）如何制定URS？以項目的形式制定專門的計劃，專人負責；以文件形式逐項詳細列出要求；與供應商及技術工程師進行充分溝通非常重要；安裝輔助設備規格的及時提交；進行必要的現場考察；培訓；驗證與再驗證計劃及實施安排。五、用戶需求細則（URS）如何制定URS？五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：材質與結構1、基本結構2、關鍵部件材質3、送風系統及空氣過濾4、接口5、控制單元6、.附加設備五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：材質與五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：性能生產/檢測處理量無菌保證要求清潔和清潔確認密封性能環境控制泄漏測試監控系統環境微生物監測過程模擬試驗五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：性能六、隔離器的安裝環境是否需要特定的潔凈度？PDATR34技術報告建議：不必有特定的潔凈度，合理設計的隔離器不會允許內部氣體與外部環境對流。注意：某些監管機構對無菌生產用隔離器提出了背景環境要求，如歐盟GMP規定：隔離器背景環境的潔凈級別，視隔離區的設計和應用而定。要控制無菌生產隔離器的背景環境，并且最低為D級（10萬級）。用于無菌測試的隔離器：普遍共識是無需放置于潔凈室內。六、隔離器的安裝環境是否需要特定的潔凈度？FDAcGMP：“無菌生產用隔離器周圍環境潔凈級別應根據其接口（如傳遞接口）的設計和數目決定。通常要求環境達到10萬級（ISO8）或更高的標準。無菌生產用隔離器不得安裝于未進行潔凈度分級的房間內。”

USP：用于無菌測試的隔離器無需安裝于潔凈室內，但應控制無關人員進入。房間內的溫度、濕度等條件需要控制。EUGMP：“隔離器背景環境應為受控環境。無菌生產用隔離器安裝環境應至少達到GradD（10萬級）要求。”PDA：建議隔離器安裝于受控環境中，但對環境沒有級別要求。六、隔離器的安裝環境六、隔離器的安裝環境六、隔離器的安裝環境無菌測試隔離器房間設計充足的室內空間以保證空氣交換，以便隔離器的去除污染隔離器與VHP均接有應急電源有VHP在緊急情況下自動關閉和排氣系統最好裝有HEPA過濾器，HEPA安裝在遠離隔離器排風口處蒸汽滅菌接口物料接口保證傳遞艙有效的移動距離。六、隔離器的安裝環境無菌測試隔離器房間設計七、隔離器的驗證驗證分類：設計驗證（DQ）安裝驗證（IQ）操作驗證（OQ）性能驗證（PQ）七、隔離器的驗證驗證分類：7.0無菌檢查用隔離系統的驗證安裝確認(IQ)設計與安裝檢查運行確認(OQ)系統完整性溫度分布控制系統驗證滅菌循環開發芽孢殺滅試驗微生物監測負載量模擬VHP濃度及分布VHP排殘7.0無菌檢查用隔離系統的驗證安裝確認設計與安裝檢查運行7.0無菌檢查用隔離系統的驗證包裝完整性VHP侵入試驗（CI或BI）促生長試驗無菌狀態維持空氣取樣表面取樣手套完整性監測過程模擬培養基分裝或無菌檢查試驗7.0無菌檢查用隔離系統的驗證包裝VHP侵入試驗（CI或B7.1隔離系統的驗證:安裝驗證主要驗證項目文件資料（訂購合同、供應商提供的文件等）結構與構造材料安裝環境、公用介質測量儀表HEPA及其它除菌過濾器易耗部件計算機軟件（適用時）7.1隔離系統的驗證:安裝驗證主要驗證項目7.2隔離系統的驗證:操作驗證1、控制有效性2、參數設定3、報警功能4、記算機系統（適用時）5、塵埃微粒6、系統完整性1）壓力下降試驗2）檢漏氣體探測試驗

3）HEPA粒子掃描7、滅菌器功能與過程參數8、滅菌循環程序（步驟、運行值與設定值的符合性）7.2隔離系統的驗證:操作驗證1、控制有效性7.2隔離系統的驗證:操作驗證塵埃微粒：用于無菌測試的隔離器在空載靜態條件下需達到100級要求7.2隔離系統的驗證:操作驗證塵埃微粒：7.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發要求：

所采用的滅菌參數及循環程序應能使隔離器內表面或無菌器具暴露的外表面上高耐受性的生物指示劑下降6個對數單位，并具有重現性。7.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發要求：7.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發隔離器內物料裝載模式與要求開發與驗證最壞裝載模式下的循環盡可能利用傳遞艙

以提高效率BI的放置位置需標明7.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發隔離器內物料裝載模式與7.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發BI放置數量要求：“根據隔離器體積大小，每立方米放置5-10個BI是足夠的，均勻分布于內表面，以證實殺菌劑的分布均勻性”

PDATR347.3隔離系統的驗證:滅菌循環的開發BI放置數量要求：汽化過氧化氫滅菌過程采用的生物指示劑（BI）

菌種：嗜熱脂肪芽胞桿菌

ATCC12980或ATCC7953

載體：一般選用玻璃片或不銹鋼片

（不能選用濾紙片）D值：由BI供應商提供的數據是可接受的。7.3隔離系統驗證：滅菌循環開發汽化過氧化氫滅菌過程采用的生物指示劑（BI）7.3隔離系統7.5隔離系統驗證：清潔驗證無菌試驗用隔離器的清潔驗證并非關鍵，清潔至無目視污染的程度即可。抗生素類別的粉劑應予重視，防止其擴散而影響其它產品或批次中低污染微生物的檢出。（可行的辦法，盡可能在密閉的容器中操作）清潔方法、頻率、材料等應進行文件規定并形成記錄。7.5隔離系統驗證：清潔驗證無菌試驗用隔離器的清潔驗證并非八、無菌狀態維持與環境監測建立隔離器內部環間的監測系統和程序：環境物理監測：塵埃微粒、壓差等環境微生物監測：1）主動空氣取樣（浮游菌）2）被動空氣取樣（沉降菌）3）表面取樣（棉簽、RODAC）4）手套測試（棉簽、指印）八、無菌狀態維持與環境監測建立隔離器內部環間的監測系統和程序環境物理監測

1）塵埃粒子檢測確認HEPA的有效性，

非層流隔離器注意自凈方法；計數器不能放入艙內，應通過采樣管采樣。2）壓差3）換氣量、風速（有要求時）4）溫度、濕度8.1系統內環境物理監測環境物理監測8.1系統內環境物理監測8.2系統內環境微生物監測微生物監測培養基要求：TSA、TSB、營養瓊脂平板等均可使用。

最好含卵磷酯等抗VHP的中和劑；所用平板最好用抗VHP包裝的經輻射滅菌，以避免VHP殘留對培養基靈敏度造成的不良影響。靈敏度有限，監測結果要求不得有微生物生長。8.2系統內環境微生物監測微生物監測8.2系統內環境微生物監測適用不適用8.2系統內環境微生物監測適用不適用隔離器應用于無菌測試優點:提供更可靠的無菌環境

由于VHP具有較強的殺菌效力(尤其對芽孢的殺滅)，使隔離艙內的無菌環境更有保障，無菌測試的假陽性結果幾乎不可能出現；隔離系統能支持兩種無菌測試的方法，直接接種法和薄膜過濾法，具有廣泛的適用范圍；保護樣品與試驗器具，亦保護操作者免受有毒樣品的傷害，雙重保護功能。內置式集菌儀（蠕動泵）

隔離器應用于無菌測試優點:九、日常使用維護1）避免接觸傳遞門的邊緣和密封圈。

2）實驗前后用殺孢子劑對手套及關鍵部位進行消毒。

3）更換手套時先對新手套檢漏。

4）帶雙層手套。

5）不得將無塵布、紗布等多纖維物品直接放入隔離器內。存在不能有效滅菌的風險。

6）根據日常使用經驗制定手套、袖套更換周期表在手套、袖套老化前就給予更換。

7）每次實驗均放環境監測培養基瓶并做手套擦拭。

8）擺放物品時戴手套，通過操作口進行艙內位置調整。九、日常使用維護1）避免接觸傳遞門的邊緣和密封圈。9.1預防性維護程序根據使用頻次，考慮制定維護、校準及再驗證計劃重點確認：壓力、濕度、VHP濃度隔離器應定期進行完整性測試報警系統—需維護并定期測試出現報警事件—發生后需進行評估、調查、記錄每次使用前及使用后均應檢查手套的完整性定期檢查傳遞系統、進料門處—墊圈、接縫出現故障前，事先明確配件的更換頻率9.1預防性維護程序根據使用頻次，考慮制定維護、校準及再驗隔離器對無菌檢查操作人員的要求經過系統的培訓并了解設備性能非常重要執行確認過的工作循環程序能意識到風險并做好預防性措施，如手套可能會有潛在的漏洞，戴雙層手套以避免有針孔式漏洞無菌操作技術仍然非常重要操作過程中使用經過滅菌的工具負載量與負載方式的惡劣性不超過驗證模式隔離器對無菌檢查操作人員的要求經過系統的培訓并了解設備性能非謝謝!無菌隔離技術2010課件新版GMP對無菌隔離技術的要求與應用華北制藥2010-8無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件講課內容摘要一、隔離技術簡介二、隔離技術應用依據----法規/指南三、隔離系統的分類四、隔離系統組成要素與關鍵技術介紹五、用戶需求說明（URS）六、隔離器的安裝環境七、隔離系統的驗證八、隔離系統的無菌維持與環境監測技術九、隔離系統的運行維護講課內容摘要一、隔離技術簡介一、隔離技術簡介1、隔離技術的定義2、隔離技術的發展背景3、隔離技術的應用目的4、隔離技術與傳統潔凈技術的比較5、隔離技術的一些典型用途6、主要制造商一、隔離技術簡介1、隔離技術的定義1、隔離技術概述：定義

隔離：采用物理屏障的手段將受控空間與外部環境相互

隔絕的技術。為一種絕對隔離。用于無菌藥品生產的隔離器：能夠利用可再生并且有效的方式去除污染，密封的或是通過高效空氣過濾器（HEPA）實現空氣交換，以此防止周圍環境中微生物的進入及人員帶有的污染物進入受控的環境。系統允許物料通過設計和驗證過的通路進入及（或）排出，并排除污染物的進入。主要用于無菌處理或無菌測試。

1、隔離技術概述：定義隔離：采用物理屏障的手段將受控2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景隔離技術的背景1）源于第二次世界大戰時的手套箱主要用于放射性物質處理。2）戰后核工業制藥工業醫療領域電子工業航天工業食品工業航天工業2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景隔離技術的背景核工業制藥2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景生物學試驗無菌生產制藥工業無菌分裝致敏性\毒性物質圍堵無菌試驗生物安全防護SPF級實驗動物飼養2、隔離技術概述：隔離技術的發展背景生物學試驗無菌生產制藥工無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件3、隔離技術概述：應用目的滿足產品質量改進的需要安全防護的改進要求降低運行成本提供特殊環境GMP/cGMP資格“可移動的無菌室”

3、隔離技術概述：應用目的滿足產品質量改進的需要4、隔離技術VS傳統潔凈技術項目傳統潔凈室無菌隔離技術消毒/滅菌方法消毒劑擦拭/薰蒸/紫外線照射等方法，受空間等諸多因素影響，效果難以驗證自動氣體滅菌器滅菌，省時省力，氣體分布均勻，效果較好，容易驗證潔凈環境的控制易受人員、物料等諸多因素影響，易受污染，難以控制與外界完全隔離，僅通過HEPA進行空氣交換并可恒定艙內壓力以阻絕外界污染對操作人員的防護取決于操作人員自身完全物料傳送方式傳統的傳遞窗，易導致無菌室環境破壞雙門快速傳遞系統保證在無菌環境中傳遞人員進出需復雜的換鞋/工作服更換等步驟，帶來額外工作量僅通穿戴手套/半身工作服即可運行所需能耗高低誤操作導致的無菌環境污染的風險大，與操作人員有關可能性極小操作和維護成本高低4、隔離技術VS傳統潔凈技術項目傳統潔凈室無菌隔離技術消毒4、隔離技術VS傳統潔凈技術局部100級工作臺工作區的無菌保護無菌隔離器傳統潔凈室隔離器Class10000

Cleanroom4、隔離技術VS傳統潔凈技術局部100級工作區的無菌保護無無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件關鍵操作區氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100級10000級關鍵操作區氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二

MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關鍵點操作者不能進入Grade”A”區域。關鍵操作區氣流方向示例二

MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二關鍵操作區氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關鍵點操作者不能進入Grade”A”區域。關鍵操作區氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.4生產用隔離器示例一生產用隔離器示例一生產用隔離器示例二生產用隔離器示例二生產用隔離器示例三生產用隔離器示例三4、無菌隔離技術VS傳統潔凈技術≥5KW0.3~3KW傳統潔凈室隔離器能耗4、無菌隔離技術VS傳統潔凈技術≥5KW0.3~3KW傳隔無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件潔凈區環境監控要求比較WHO美國歐盟中國關鍵操作區的塵粒為控制各級別的潔凈區操作時的塵粒數，應對塵粒進行監測每一生產班次應定期進行監控；粒子計數探頭的安放位置應能取到有代表性的樣品

應對A級區的空氣粒子進行連續測定，并建議對B級區也連續進行測定潔凈室(區)內空氣的微生物數和塵粒數應定期監測，監測結果應記錄存檔。潔凈室(區)在靜態條件下檢測的塵埃粒子數、浮游菌數或沉降菌數必須符合規定，應定期監控動態條件下的潔凈狀況。關鍵操作區的微生物無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態監測；關鍵操作結束后，應對表面和人員的微生物進行監測；應制定微生物監控的警戒和糾偏標準，以監控空氣質量的趨勢關鍵區出現微生物污染時，要進行必要的調查無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態監測；除在生產過程中需進行微生物監控外，系統驗證、清潔和消毒等操作后，也應進行微生物監控；應對塵粒和微生物監控制定適當的警戒和糾偏標準關鍵操作區的壓差應設送風故障報警系統；壓差十分重要的毗鄰級別區之間應安裝壓差表并定期記錄壓差每一班操作過程中，房間的壓差應連續監控并經常記錄。所有報警應有記錄，超過設定限度的各種偏差應進行調查。可列入批記錄中應設送風故障報警系統；壓差十分重要的毗鄰級別區之間應安裝壓差表；壓差數據應定期記錄或者歸入有關文檔中無要求潔凈區環境監控要求比較WHO美國歐盟中國關鍵操作區的塵粒為控潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較潔凈區環境監控要求比較5、隔離技術概述：典型用途無菌測試無菌生產（填充、分裝、取樣等）毒性物質圍堵生物安全防護實驗動物飼養5、隔離技術概述：典型用途無菌測試6、隔離技術概述：隔離系統主要制造商

美國沃克公司

德國skan公司

法國LaCalhene公司無菌隔離系統

6、隔離技術概述：隔離系統主要制造商

美國沃克公司二、法規和指南1中國新版GMP二、法規和指南1中國新版GMP二、法規和指南二、法規和指南二、法規和指南FDACDER/CBER（藥物評估與研究中心/生物制品評估與研究中）2004年版《無菌操作指南》鼓勵使用隔離器，

“與傳統的無菌操作方式相比，使用隔離器具有切實的優勢，比如可降低操作過程中被微生物污染的機率。

在生產區采用人員方面的隔離技術,在無菌產品的生產中,會顯著降低周圍環境微生物污染的風險。有很多隔離和傳遞設施可供選擇,隔離和背景環境的設計,必須保證各區域相應的空氣質量要求。二、法規和指南FDACDER/CBER（二、法規和指南PIC/S的縮寫和標志，是用來形容這兩種藥品監察公約（PIC）和藥品檢查合作計劃（PIC的計劃）一起并行運作。PIC/S（藥物檢查合作計劃委員會）recommendationstotheinspectorsfor?Isolatorsusedforasepticprocessingandsterilitytesting?PIC/S

關于《隔離器用于無菌處理和無菌測試》對于檢查員的建議二、法規和指南PIC/S的縮寫和標USP<1208>?Sterilitytesting-Validationofisolatorsystems?---美國藥典EuropeanPharmacopoeia

2.6.1.Sterility--歐洲藥典USP<1208>?Sterilitytesting二、法規和指南*2207生物制品生產過程中使用某些特定活生物體階段的設備應專用，應在隔離或封閉系統內進行。認證檢查指南（2008年版）二、法規和指南*2207生物制品生產過程中使用某些特定活三、隔離器的類型隔離器硬艙體型屏護材料工作用途壓力控制氣流模式操作模式軟艙體型工作站\實驗艙傳遞艙正壓型負壓型層流型紊流型手套型半身服型全身服型三、隔離器的類型隔離器硬艙體屏工壓氣操軟艙體工作站\實驗艙傳三、隔離器的類型軟艙體手套式硬艙體手套式三、隔離器的類型軟艙體手套式硬艙體手套式三、隔離器的類型傳遞艙實驗艙內置無菌檢測系統三、隔離器的類型傳遞艙實驗艙內置無菌檢測系統三、隔離器的類型正壓隔離器負壓隔離器三、隔離器的類型正壓隔離器負壓隔離器三、隔離器的類型手套型半身服型全身服型三、隔離器的類型手套型半身服型全身服型無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件四、隔離系統結構與關鍵技術介紹1、屏護材料2、傳遞/轉移技術3、空氣調節系統4、滅菌/去污技術四、隔離系統結構與關鍵技術介紹1、屏護材料1、屏護材料柔韌性塑膠薄膜（多用于檢測）透明聚氯乙烯（PVC）剛性材質（多用于生產）

1）聚碳酸酯（PC）

2）丙烯酸樹酯/亞克力（Acrylic）

3）鋼化玻璃

4）不銹鋼

1、屏護材料2、傳遞/轉移技術簡易通道氣室物料通道艙門廢物門快速傳遞門2、傳遞/轉移技術簡易通道2、傳遞/轉移技術快速轉移通道系統（RTPs）用于將傳遞隔離器連接至通常不移動的隔離器（工作站）上，將物料送入或廢物移出。RTPs的密封性能非常重要，密封條的完整性；密封圈表面需要擦拭等輔助方式清潔/消毒；物料轉移過程中盡可能避免碰到RTPs表面。2、傳遞/轉移技術快速轉移通道系統（RTPs）2、傳遞/轉移技術快速傳遞通道系統RTPs2、傳遞/轉移技術快速傳遞通道系統RTPs2、傳遞/轉移技術雙門傳遞系統傳遞過程2、傳遞/轉移技術雙門傳遞系統傳遞過程無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件無菌隔離技術2010課件3、空氣調節系統內部氣流模式：1）紊流

常規型隔離器采用，應用于無菌測試居多

2）單向流垂直單向流

水平單向流

以應用于無菌生產居多，但用來處理粉末類或氣霧劑等藥品時，必須考慮如何防止這些原料通過空氣回路再次進入系統。

隔離器的制造者和使用者不應該拘泥于傳統的潔凈室空氣調節系統（HAVC）的設計要求。使用者僅需要論證他們的特殊選擇在此應用/運行條件下能夠有效的運行即可。

3、空氣調節系統內部氣流模式：3、空氣調節系統空氣過濾單元：空氣過濾單元最重要的，亦是唯一的功能是實現隔離器內部無菌狀態的維持進、排氣口必須安裝HEPA級別的過濾器，亦可選用更高級別的ULPA無菌維持階段通過進、排氣口的風機系統連續的充入經過濾的空氣以維持內部設定的壓力滅菌/去污結束，考慮到安全因素和滅菌/消毒劑的快速排空，隔離器必須具有一個獨立的通風管道系統。該系統并須被證實對隔離器的完整性沒有影響3、空氣調節系統空氣過濾單元：3、空氣調節系統溫度和濕度采用VHPS技術滅菌/去污的隔離器自身適宜于極低濕度環境中運行。循環過程中，溫度和濕度應該作為很重要的考慮事項。通常，在考慮操作員的舒適度的情況下，溫度控制在20-25℃，濕度為50％±10％范圍內。若不考慮操作員的舒適度，溫度和濕度的控制范圍僅由加工要求確定。3、空氣調節系統溫度和濕度3、空氣調節系統換氣次數和風速

隔離器系統的換氣次數規范應該針對具體情況進行確定。通常不需要遵照傳統潔凈室所建議的每小時最低20次的要求。通常，氣流量能夠維持一個設定的壓力（單向流型隔離器能夠基本維持單向的氣流）。無論目的是防止污染物進入隔離器內部（應用于無菌）或將污染物圍堵在隔離器內部（應用于防護），更少的換氣次數顯然能簡化隔離器的設計和操作，并提高整個系統性能的穩定性。單向流隔離器的氣流速度（風速），僅需要保持充足以維持內部空氣的穩定。紊流隔離器一般無風速要求。3、空氣調節系統換氣次數和風速4、滅菌/去污技術

4.1概述現在：低溫氣體自動化滅菌技術自動化氣體發生器1）STERIS、BIOQUELL、

SKAN、Gaodetailin2）Plazlyte、Citomat3）Gaodetailin4）Johnson&Johnson早期：

擦拭、噴霧、薰蒸滅菌劑：1）汽化過氧化氫(VHP)2）過氧乙酸(PAA)3）臭氧(Ozone)4）二氧化氯(CD)4、滅菌/去污技術

4.1概述現在：自動化氣體發生器1）ST4、隔離器的去污/滅菌技術BIOQUELLVPHPSTERISVHP

HTYVHPS最新的自動化滅菌系統4、隔離器的去污/滅菌技術BIOQUELLVPHPSTER4、隔離器的去污/滅菌技術Citomat型過氧乙酸滅菌系統HTY型臭氧消毒系統HTY簡易型VHPS

簡易型滅菌/消毒單元4、隔離器的去污/滅菌技術Citomat型過氧乙酸滅菌系統

4.2汽化過氧化氫滅菌(VHPS)技術VHP（Vaporized/VaporousHydrogenPeroxide)汽化過氧化氫發生消毒系統VPHP（VaporPhaseHydrogenPeroxide）隔離器循環使用氣相參數釋放過氧化氫（VPHP）消毒器HPV（HydrogenPeroxideVapor）過氧化氫蒸氣（HPV）的消毒系統VHPS（Vaporized/VaporousHydrogenPeroxideSterilization）過氧化氫蒸氣（VHPS）的消毒系統

4.2汽化過氧化氫滅菌(VHPS)技術VHP（Vapori五、用戶需求細則（URS）如何制定URS？以項目的形式制定專門的計劃，專人負責；以文件形式逐項詳細列出要求；與供應商及技術工程師進行充分溝通非常重要；安裝輔助設備規格的及時提交；進行必要的現場考察；培訓；驗證與再驗證計劃及實施安排。五、用戶需求細則（URS）如何制定URS？五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：材質與結構1、基本結構2、關鍵部件材質3、送風系統及空氣過濾4、接口5、控制單元6、.附加設備五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：材質與五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：性能生產/檢測處理量無菌保證要求清潔和清潔確認密封性能環境控制泄漏測試監控系統環境微生物監測過程模擬試驗五、用戶需求細則（URS）標準型隔離器URS主要內容：性能六、隔離器的安裝環境是否需要特定的潔凈度？PDATR34技術報告建議：不必有特定的潔凈度，合理設計的隔離器不會允許內部氣體與外部環境對流。注意：某些監管機構對無菌生產用隔離器提出了背景環境要求，如歐盟GMP規定：隔離器背景環境的潔凈級別，視隔離區的設計和應用而定。要控制無菌生產隔離器的背景環境，并且最低為D級（10萬級）。用于無菌測試的隔離器：普遍共識是無需放置于潔凈室內。六、隔離器的安裝環境是否需要特定的潔凈度？FDAcGMP：“無菌生產用隔離器周圍環境潔凈級別應根據其接口（如傳遞接口）的設計和數目決定。通常要求環境達到10萬級（ISO8）或更高的標準。無菌生產用隔離器不得安裝于未進行潔凈度分級的房間內。”

USP：用于無菌測試的隔離器無需安裝于潔凈室內，但應控制無關人員進入。房間內的溫度、濕度等條件需要控制。EUGMP：“隔離器背景環境應為受控環境。無菌生產用隔離器安裝環境應至少達到GradD（10萬級）要求。”PDA：建議隔離器安裝于受控環境中，但對環境沒有級別要求。六、隔離器的安裝環境六、隔離器的安裝環境六、隔離器的安裝環境無菌測試隔離器房間設計充足的室內空間以保證空氣交換，以便隔離器的去除污染隔離器與VHP均接有應急電源有VHP在緊急情況下自動關閉和排氣系統最好裝有HEPA過濾器，HEPA安裝在遠離隔離器排風口處蒸汽滅菌接口物料接口保證傳遞艙有效的移動距離。六、隔離器的安裝環境無菌測試隔離器房間設計七、隔離器的驗證驗證分類：設計驗證（DQ）安裝驗證（IQ）操作驗證（OQ）性能驗證（PQ）七、隔離器的驗證驗證分類：7.0無菌檢查用隔離系統的驗證安裝確認(IQ)設計與安裝檢查運行確認(OQ)系統完整性溫度分布控制系統驗證滅菌循環開發芽孢殺滅試驗微生物監測負載量模擬VHP濃度及分布VHP排殘7.0無菌檢查用隔離系統的驗證安裝確認設計與安裝檢查運行7.0無菌檢查用隔離系統的驗證包裝完整性VHP侵入試驗（CI或BI）促生長試驗無菌狀態維持空氣取樣表面取樣手套完整性監測過程模擬培養基分裝或無菌檢查試驗7.0無菌檢查用隔離系統的驗證包裝VHP侵入試驗（CI或B7.1隔離系統的驗證:安裝驗證主要驗證項目文件資料（訂購合同、供應商提供的文件等）結構與構造材料安裝環境、公用介質測量儀表HEPA及其它除菌過濾器易耗部件計算機軟件（適用時）7.1隔離系統的驗證:安裝驗證主要驗證項目7.2隔離系統的驗證:操作驗證1、控制有效性2、參數設定3、報警功能4、記算機系統（適用時）5、塵埃微粒6、系統完整性1）壓力下降試驗2）檢漏氣體探測試驗

3）HEPA粒子掃描7、滅菌器功能與過程參數8、滅菌循環程序（步驟、運行值與設定值的符合性）7.2隔離系統的驗證:操作驗證1、控制有效性7.2隔離系統的驗證:操作驗證塵埃微粒：