腫瘤干細(xì)胞高全立河南省腫瘤醫(yī)院生物治療科1編輯ppt腫瘤干細(xì)胞1編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性干細(xì)胞有自我復(fù)制更新能力：通常情況下只有干細(xì)胞具有分裂產(chǎn)生子代干細(xì)胞的能力干細(xì)胞有定向分化為功能細(xì)胞能力已經(jīng)定向分化的細(xì)胞一般情況下不能逆轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞2編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性2編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類

胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞根據(jù)分化潛能分類：全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞3編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類3編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉細(xì)胞融合基因轉(zhuǎn)染：iPS

OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC小分子化合物誘導(dǎo)：5編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉5編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖

橫向分化亞全能干細(xì)胞？6編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nature.2001.414.105-1117編輯ppt腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nat腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來由骨髓來源的干細(xì)胞與基因發(fā)生改變的組織細(xì)胞融合而來由基因發(fā)生改變已分化的細(xì)胞逆轉(zhuǎn)化而來8編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來8編輯CancerstemcellsshouldbethetherapytargetReya,T.,etal.Nature.2001.414.105-1119編輯pptCancerstemcellsshouldbeth腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長的基礎(chǔ)具有自我更新和多向分化的能力腫瘤組織中含量極低對常用的治療方法耐藥：如化療、放療、分子靶向治療。免疫治療如何？10編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長的基礎(chǔ)10編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖(通過水解ATP將多種化療藥物泵出細(xì)胞外）

11編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞，表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的特性非腫瘤干細(xì)胞可通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞12編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞，表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的EMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化

MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化13編輯pptEMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化

MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT（表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化）是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的主要機(jī)制之一，腫瘤干細(xì)胞易于侵襲和轉(zhuǎn)移。多個實(shí)驗(yàn)證實(shí)腫瘤干細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性。乳腺上皮細(xì)胞系通過EMT可產(chǎn)生乳腺癌干細(xì)胞。14編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT（表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化）是腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44：乳腺癌，頭頸部鱗癌，胰腺癌，肺癌，卵巢癌，前列腺癌，大腸癌

CD133：腦膠質(zhì)瘤，大腸癌，胰腺癌，肺癌，肝癌，惡性黑色素瘤，卵巢癌CD90：肝癌，肺癌CD24：胰腺癌陽性，乳腺癌陰性CD117：卵巢癌CD278：惡性黑色素瘤15編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44：乳腺癌，頭頸部鱗癌，胰腺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44：頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。乳腺癌中12個研究中的898例meta分析，CD44為預(yù)后不良的標(biāo)記。大腸癌中存在爭議。CD133：腦膠質(zhì)瘤高表達(dá)預(yù)后差。大腸癌高表達(dá)預(yù)后差，肺癌有爭議。外周血CD133mRNA的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)（JClinOncol,201129(12):1547-55).

16編輯ppt腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44：頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct4Sox2NANOGKlfBmi1C-Myc17編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct417編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4：肺癌及乳腺癌中高表達(dá)分化差，預(yù)后差Sox2：口腔鱗癌、食管癌高表達(dá)預(yù)后差，而肺鱗癌中高表達(dá)預(yù)后良好的指標(biāo)。NANOG：口腔鱗癌中高表達(dá)預(yù)后差，大腸癌中的表達(dá)與預(yù)后無關(guān)。c-Myc：與多種腫瘤的預(yù)后不良相關(guān)。18編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4：肺癌及乳腺癌中高表達(dá)EMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherinN-cadherinVimentin盡管存在爭議，一些文章支持與腫瘤的預(yù)后相關(guān)19編輯pptEMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherin19編輯腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后ALDH1（乙醛脫氫酶1）：ALDEFLUOR的試劑來分選ALDH-1陽性細(xì)胞。其表達(dá)與多種腫瘤的預(yù)后明顯相關(guān)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子家族蛋白：MDR1，ABCG2，ABCB5等，其功能與SP細(xì)胞相關(guān)。其表達(dá)于預(yù)后的關(guān)系不明確。20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低，而某些腫瘤含有很高比例的腫瘤干細(xì)胞。非腫瘤干細(xì)胞很容易通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞。21編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低，而某些免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理常用酶標(biāo)抗體間接法24編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理24編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：特異性敏感性定位性缺點(diǎn)：假陽性率高設(shè)計好對照是關(guān)鍵：陰性對照、陽性對照、自身對照25編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：特異性敏感性定位性25編輯ppt26編輯ppt26編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt28編輯ppt28編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)腫瘤些免疫學(xué)血液學(xué)藥物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析（散點(diǎn)圖）32編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析（散點(diǎn)圖）32編輯ppt33編輯ppt33編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定

35編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定35編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:-CollagenaseI37oC-2hours-Washing

SINGLECELLSUSPENSIONCULTURING:Serumfreemedium原代肺癌細(xì)胞培養(yǎng)36編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:SINGLEC原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系

Wehaveestablished5squamouscarcinoma(B),4adenocarcinoma(D),1largecelllungcancer(C),1smallcelllungcancer(A),and1lungcarcinoidcelllines.37編輯ppt原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系37編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽性的細(xì)胞Smallcelllungcancer(LC004),largecelllungcancer(LC006)havecd44strongpositivepopulationcells.39編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽性的細(xì)胞39編CD44強(qiáng)陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力

Whenseeded500cells/well,therewasnoobviousdifferencebetweentheCD44++andCD44+/-cells(figureA),butwhenseeded150cells/well,CD44++cellsmuchstrongerproliferativeability(figureB).40編輯pptCD44強(qiáng)陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力40編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力A:largecelllungcancercellline(LC006)B:smallcelllinecellline(LC004)41編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力41編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holocloneWhensinglecellseededinto96wellplate,onlyCD44++CD+cellscouldformholoclone,100CD44++CD90+cellscouldformabout1-3holoclones.42編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holoclone42編輯pp只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球A&C:cellspheresformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.B&D:

no

cellsphereformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.43編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球43編輯部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedbybluefluorescentlight,B:watchedbyredfluorescentlight,C:watchedbywhitelight,D:overlapofAandB44編輯ppt部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedby肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+4maintypesoflungcancer,adenocarcinoma(LC007),squamouscarcinoma(LC021),smallcelllungcancer(LC004)andlargecelllungcancer(LC006)allhadtheCD44++CD90+smallpopulationcells.45編輯ppt肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+45編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD90-細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:CD44++CD90+.B:CD44++CD90-C:CD44+CD90+D:CD44+CD90-46編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD9大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的基因47編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞和間鱗癌細(xì)胞CD44++CD90+和CD44++CD90-具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:LC021-P3beforesorting.B:CD44++CD90+.C:CD44++CD90-.D:CD44+CD90+.E:CD44+CD90-.48編輯ppt鱗癌細(xì)胞CD44++CD90+和CD44++CD90-具CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X線抵抗能力

49編輯pptCD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X

CD44++CD90+的大細(xì)胞肺癌具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X線抵抗能力50編輯pptCD44++CD90+的大細(xì)胞肺癌具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力TGF-β1對腫瘤細(xì)胞的作用

抑制腫瘤細(xì)胞的生長。使腫瘤細(xì)胞惡性程度增強(qiáng)。誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生EMT。51編輯pptTGF-β1對腫瘤細(xì)胞的作用抑制腫瘤細(xì)胞的生長。51編輯

TGF-β1對CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌抑制能力最弱52編輯pptTGF-β1對CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌抑制能TGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞產(chǎn)生EMT53編輯pptTGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞產(chǎn)生EMT53編輯pptTGF-β1增加CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌細(xì)胞的比例54編輯pptTGF-β1增加CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌細(xì)胞的比例5TGF-β1處理過的CD44++CD90+同樣具有最強(qiáng)的X線照射抵抗能力

55編輯pptTGF-β1處理過的CD44++CD90+同樣具有最強(qiáng)的XlungcancercellscouldpartlyreturnoriginalcharactersafterretreatingTGF-β156編輯pptlungcancercellscouldpartlyTGF-β1對CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞抑制能力最弱57編輯pptTGF-β1對CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞抑制能力TGF-β1選擇性地增加CD44++CD90+鱗癌細(xì)胞的比例58編輯pptTGF-β1選擇性地增加CD44++CD90+鱗癌細(xì)胞Tumorcellsformedby“Tip-SP”cellsinNOD/SCIDmicemaintainstableSPratio59編輯pptTumorcellsformedby“Tip-SP”60編輯ppt60編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高全立河南省腫瘤醫(yī)院生物治療科61編輯ppt腫瘤干細(xì)胞1編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性干細(xì)胞有自我復(fù)制更新能力：通常情況下只有干細(xì)胞具有分裂產(chǎn)生子代干細(xì)胞的能力干細(xì)胞有定向分化為功能細(xì)胞能力已經(jīng)定向分化的細(xì)胞一般情況下不能逆轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞62編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性2編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類

胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞根據(jù)分化潛能分類：全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞63編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類3編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程64編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉細(xì)胞融合基因轉(zhuǎn)染：iPS

OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC小分子化合物誘導(dǎo)：65編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉5編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖

橫向分化亞全能干細(xì)胞？66編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nature.2001.414.105-11167編輯ppt腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nat腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來由骨髓來源的干細(xì)胞與基因發(fā)生改變的組織細(xì)胞融合而來由基因發(fā)生改變已分化的細(xì)胞逆轉(zhuǎn)化而來68編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來8編輯CancerstemcellsshouldbethetherapytargetReya,T.,etal.Nature.2001.414.105-11169編輯pptCancerstemcellsshouldbeth腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長的基礎(chǔ)具有自我更新和多向分化的能力腫瘤組織中含量極低對常用的治療方法耐藥：如化療、放療、分子靶向治療。免疫治療如何？70編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長的基礎(chǔ)10編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖(通過水解ATP將多種化療藥物泵出細(xì)胞外）

71編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞，表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的特性非腫瘤干細(xì)胞可通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞72編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞，表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的EMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化

MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化73編輯pptEMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化

MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT（表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化）是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的主要機(jī)制之一，腫瘤干細(xì)胞易于侵襲和轉(zhuǎn)移。多個實(shí)驗(yàn)證實(shí)腫瘤干細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性。乳腺上皮細(xì)胞系通過EMT可產(chǎn)生乳腺癌干細(xì)胞。74編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT（表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化）是腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44：乳腺癌，頭頸部鱗癌，胰腺癌，肺癌，卵巢癌，前列腺癌，大腸癌

CD133：腦膠質(zhì)瘤，大腸癌，胰腺癌，肺癌，肝癌，惡性黑色素瘤，卵巢癌CD90：肝癌，肺癌CD24：胰腺癌陽性，乳腺癌陰性CD117：卵巢癌CD278：惡性黑色素瘤75編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44：乳腺癌，頭頸部鱗癌，胰腺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44：頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。乳腺癌中12個研究中的898例meta分析，CD44為預(yù)后不良的標(biāo)記。大腸癌中存在爭議。CD133：腦膠質(zhì)瘤高表達(dá)預(yù)后差。大腸癌高表達(dá)預(yù)后差，肺癌有爭議。外周血CD133mRNA的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)（JClinOncol,201129(12):1547-55).

76編輯ppt腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44：頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct4Sox2NANOGKlfBmi1C-Myc77編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct417編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4：肺癌及乳腺癌中高表達(dá)分化差，預(yù)后差Sox2：口腔鱗癌、食管癌高表達(dá)預(yù)后差，而肺鱗癌中高表達(dá)預(yù)后良好的指標(biāo)。NANOG：口腔鱗癌中高表達(dá)預(yù)后差，大腸癌中的表達(dá)與預(yù)后無關(guān)。c-Myc：與多種腫瘤的預(yù)后不良相關(guān)。78編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4：肺癌及乳腺癌中高表達(dá)EMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherinN-cadherinVimentin盡管存在爭議，一些文章支持與腫瘤的預(yù)后相關(guān)79編輯pptEMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherin19編輯腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后ALDH1（乙醛脫氫酶1）：ALDEFLUOR的試劑來分選ALDH-1陽性細(xì)胞。其表達(dá)與多種腫瘤的預(yù)后明顯相關(guān)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子家族蛋白：MDR1，ABCG2，ABCB5等，其功能與SP細(xì)胞相關(guān)。其表達(dá)于預(yù)后的關(guān)系不明確。80編輯ppt腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低，而某些腫瘤含有很高比例的腫瘤干細(xì)胞。非腫瘤干細(xì)胞很容易通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞。81編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低，而某些免疫標(biāo)記技術(shù)82編輯ppt免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt抗原抗體反應(yīng)83編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理常用酶標(biāo)抗體間接法84編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理24編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：特異性敏感性定位性缺點(diǎn)：假陽性率高設(shè)計好對照是關(guān)鍵：陰性對照、陽性對照、自身對照85編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：特異性敏感性定位性25編輯ppt86編輯ppt26編輯ppt免疫熒光基本原理87編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt88編輯ppt28編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理89編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀90編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)腫瘤些免疫學(xué)血液學(xué)藥物學(xué)91編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析（散點(diǎn)圖）92編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析（散點(diǎn)圖）32編輯ppt93編輯ppt33編輯ppt流式細(xì)胞分析94編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定

95編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定35編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:-CollagenaseI37oC-2hours-Washing

SINGLECELLSUSPENSIONCULTURING:Serumfreemedium原代肺癌細(xì)胞培養(yǎng)96編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:SINGLEC原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系

Wehaveestablished5squamouscarcinoma(B),4adenocarcinoma(D),1largecelllungcancer(C),1smallcelllungcancer(A),and1lungcarcinoidcelllines.97編輯ppt原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系37編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤98編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽性的細(xì)胞Smallcelllungcancer(LC004),largecelllungcancer(LC006)havecd44strongpositivepopulationcells.99編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽性的細(xì)胞39編CD44強(qiáng)陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力

Whenseeded500cells/well,therewasnoobviousdifferencebetweentheCD44++andCD44+/-cells(figureA),butwhenseeded150cells/well,CD44++cellsmuchstrongerproliferativeability(figureB).100編輯pptCD44強(qiáng)陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力40編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力A:largecelllungcancercellline(LC006)B:smallcelllinecellline(LC004)101編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力41編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holocloneWhensinglecellseededinto96wellplate,onlyCD44++CD+cellscouldformholoclone,100CD44++CD90+cellscouldformabout1-3holoclones.102編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holoclone42編輯pp只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球A&C:cellspheresformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.B&D:

no

cellsphereformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.103編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球43編輯部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedbybluefluorescentlight,B:watchedbyredfluorescentlight,C:watchedbywhitelight,D:overlapofAandB104編輯ppt部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedby肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+4maintypesoflungcancer,adenocarcinoma(LC007),squamouscarcinoma(LC021),smallcelllungcancer(LC004)andlargecelllungcancer(LC006)allhadtheCD44++CD90+smallpopulationcells.105編輯ppt肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+45編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD90-細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:CD44++CD90+.B:CD44++CD90-C:CD44+CD90+D:CD44+CD