項目二病毒（Viruses）一、大小與形態個體?。y量單位：納米）→電鏡觀察不同病毒的毒粒大小差別很大（如痘病毒顆粒直徑約為300nm，口蹄疫病毒顆粒直徑10-22nm）形態大致可分球形、桿形和其他形狀（如蝌蚪狀，卵圓形絲狀、磚形、子彈形等）植物病毒多呈桿形或絲狀，少數呈球狀。噬菌體多呈蝌蚪狀，也有球狀和絲狀。大都病毒可通過細菌濾器。動物病毒多呈球形、卵圓形或磚形。幾種病毒的形態和大小二、毒粒的化學組成脂類基本化學組成碳水化合物核酸蛋白質病毒顆粒在化學上表現為核蛋白三、結構核酸衣殼囊膜纖突統稱核衣殼所有（真）病毒共有衣殼衣殼囊膜核酸纖突衣殼的結構單位位于毒粒中心，構成其基因組。一種病毒只有一種類型的核酸：RNA或DNA。可能單股或雙股；可能線狀或環狀；可能分節段或不分節段。核酸

無衣殼的病毒核酸仍具有感染性，且感染范圍更廣，但感染力較弱。衣殼的功能保護病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞。決定病毒感染的特異性，與易感細胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵。決定病毒的抗原性，能刺激機體產生相應的抗體。毒粒宿主細胞有繁殖性的病毒基因組病毒基因組復制、表達病毒核酸和蛋白質裝配成具感染性的毒粒釋放至細胞外提供原料，能量及生物合成場所三、病毒增殖（一）核酸復制具有感染性的毒粒消失1、吸附毒粒易感細胞靜電吸引無特異性，可逆吸附病毒表面蛋白與細胞受體結合特異性，不可逆吸附2、侵入囊膜與細胞膜融合胞飲作用直接侵入有囊膜病毒無囊膜病毒侵入方式3、脫殼

病毒侵入細胞后，囊膜和/或衣殼除去而釋放出核酸的過程。毒粒消失，失去原有的感染性，進入隱蔽期。脫殼是病毒基因組進行功能表達所必需的。隱蔽期自毒粒在受染細胞內消失到細胞內出現新的感染性毒粒的時間。

不同病毒的隱蔽期長短不同如：DNA動物病毒的隱蔽期為5～20hRNA動物病毒為2～10h（四）動物病毒的繁殖特點①完整病毒穿過細胞膜的移位方式；②細胞的內吞功能；③毒粒包膜與細胞質膜的融合；1、侵入5、裝配與釋放新合成的毒粒結構組分組裝成完整的病毒顆粒，稱做病毒的裝配,亦稱成熟。成熟的子代病毒顆粒依一定的途徑釋放到細胞外。有囊膜病毒在出芽釋放過程中獲得囊膜。出芽細胞溶解裝配與釋放有包膜病毒的裝配與釋放有時也是同時完成的病毒的實驗室檢查一、病料的采集防止病料污染注意問題采集適宜的病料：含毒量最多注意采集病料的時間低溫保存與運送高速離心采集時無菌操作病料處理抗生素細菌濾器過濾除菌幾乎所有的禽源病毒都能在禽胚上增殖常用接種途徑羊膜腔接種絨毛尿囊腔接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊接種細胞類型原代細胞傳代細胞系二倍體細胞株將新鮮動物組織經胰酶等消化獲得的單個細胞染色體數目異常，可在體外無限分裂增殖將原代細胞連續傳代后獲得，染色體數目不變（二）病毒的鑒定1、電鏡（EM）形態觀察：一般不用2、包涵體檢查3、細胞病變效應（CPE）4、免疫學試驗血清學試驗：HA及HI試驗、瓊擴試驗、中和試驗等免疫標記技術：熒光抗體、酶標抗體等包涵體

病毒感染細胞后，于細胞內形成的一種特殊結構，染色后可用光學顯微鏡觀察到.特殊名稱：天花病毒包涵體稱為顧氏小體（Guarnier），狂犬病毒包涵體稱為內基氏小體（Negri），煙草花葉病毒包涵體稱為X體包涵體是某些病毒對敏感機體或細胞的病理學特征，其位置、數量、大小、形態、染色特性等可作為病毒鑒定的依據

包涵體可在細胞核或細胞漿內；可一個或多個；有的較大，有的較??；或圓形或無規律形態；可嗜酸（伊紅染成粉紅色），可嗜堿（蘇木精染成藍色）病毒的包涵體圖病毒蝕斑（plaque）：又稱空斑，是病毒在表面覆蓋有營養瓊脂的細胞單層上形成肉眼可見的局部病損區域。是多數動物病毒經敏感細胞培養引起的細胞顯微表現的改變CPE是病毒在細胞內增殖的重要指標，具有種的特征。病毒的純化及量的測定CPE類型：細胞聚集、圓縮、脫落，形成合胞體細胞病變效應（cytopathiceffect—

CPE）通常認為一顆病毒形成一個蝕斑第四節常見的動物病毒重點：病毒的致病性微生物學檢驗：主要采用免疫學方法口蹄疫病毒（微RNA病毒科口瘡病毒屬）血清型（7個）：A型、0型、C型、SAT（1型、2型、3型）、亞洲I型不耐酸肉品自然酸化去毒致病性自然條件下，偶蹄獸最易感豬、牛、羊等的口蹄疫（口腔黏膜，舌，蹄，間或乳房部位皮膚發生水皰）實驗室檢查動物接種血清定型病料乳鼠（3d、9d）皮下或腹腔注射均死亡區別于豬水皰病病毒（3d死、9d不死）中和試驗狂犬病病毒（彈狀病毒科彈狀病毒屬）從自然病例分離到的病毒街毒家兔毒力減弱固定毒形成胞漿包涵體（內基氏小體）：位于腦組織致病性腦內接種連續傳代可感染各種溫血動物；犬、貓及食肉動物最易感狂犬?。ㄉ窠洶Y狀）帶毒動物咬傷麻痹型興奮型實驗室檢查包涵體檢查熒光抗體檢查腦組織切片或觸片Seller氏染色鏡檢胞漿內基氏小體：鮮紅色（間質呈粉紅色；紅細胞呈橘紅色）腦組織或唾液腺切片或觸片熒光抗體染色熒光顯微鏡觀察：熒光犬細小病毒（細小病毒科細小病毒屬）血凝性：凝集豬、猴紅細胞致病性主要感染犬、以斷奶幼犬最易感腸炎型心肌炎型實驗室檢查免疫試紙條豬瘟病毒（黃病毒科瘟病毒屬）致病性只感染豬典型豬瘟（急性型）非典型豬瘟（亞急性型及慢性型）實驗室檢查典型病例：病毒鑒定（熒光抗體或酶標抗體等）非典型病例：血清抗體檢查豬傳染性胃腸炎病毒（冠狀病毒科冠狀病毒屬）致病性只感染豬，10d以內仔豬高發病率和高致死率表現嘔吐、腹瀉實驗室檢查病毒分離鑒定血清抗體檢查采集發病期及康復期雙份血清中和試驗或ELISA檢測抗體病料熒光抗體或ELISA快速檢測細胞培養中和試驗或熒光抗體鑒定新城疫病毒（副粘病毒科副粘病毒屬）血凝性凝集多種禽類及哺乳動物紅細胞培養致病性雞胚（10日齡）：尿囊腔接種侵害雞、火雞、鵝等病毒毒力型中毒型弱毒型強毒型表現有呼吸道、消化道、神經癥狀，產蛋下降實驗室檢查病毒分離鑒定血清抗體監測病料雞胚培養收集尿囊液HA及HI試驗毒力測定）（HI試驗小鵝瘟病毒（細小病毒科細小病毒屬）培養初分離番鴨胚鵝胚12—14日齡尿囊腔接種致病性侵害1m以內雛鵝，雛番鴨也可感染發病特征病變：回腸部位形成腸栓實驗室檢查病毒分離鑒定病料鵝胚中和試驗陽性血清死亡率大于50%小于10%鴨瘟病毒（皰疹病毒科）培養初分離：鴨胚（9—12日齡）絨毛尿囊接種膜上白色痘斑，胚體食死亡，肝有壞死灶形成核內包涵體致病性主要侵害鴨，鵝也可感染發病腹瀉、流淚、兩腿麻痹、部分鴨頭腫大（病變：消化道充血出血，后