ICS11.220B41備案號：60763-2019

DB54西 藏 自 治 區 地 方 標 準DB54/T0159—2018牛羊東畢吸蟲毛蚴孵化診斷方法2018-07-20發布 2018-08-19實施西藏自治區市場監督管理局 發布DB54/T0159—2018DB54/T0159—2018PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目??次前言 II范圍 1術語和定義 1牛羊東畢吸蟲病的診斷 1診斷結果 2附錄A（規范性附錄）實驗用品與試劑 3附錄B（規范性附錄）樣本采集、保存、送檢 4前??言本標準按照GB/T1.1的規則起草。本標準由西藏自治區農牧業標準化技術委員會提出并歸口。本標準由西藏自治區農牧科學院畜牧獸醫研究所，中國農業科學院上海獸醫研究所負責起草。本標準主要起草人：劉建枝、劉金明、石斌、李浩、夏晨陽、陸珂、唐文強、朱傳剛、單曲拉姆。本標準為首次制定。DB54/T0159—2018DB54/T0159—2018PAGEPAGE4牛羊東畢吸蟲毛蚴孵化診斷方法范圍本標準規定了牛羊東畢吸蟲病及其流行區的定義、臨床診斷、實驗室診斷及結果判定等技術。本標準適用于西藏自治區境內牛羊東畢吸蟲病的診斷、防治效果考核、檢疫和流行病學調查。術語和定義下列術語及定義適用于本標準。2.1牛羊東畢吸蟲病2.2東畢吸蟲病流行區存在東畢吸蟲的中間宿主，有牛和羊感染的地區。牛羊東畢吸蟲病的診斷臨床診斷來源于東畢吸蟲流行區的家畜，有以上癥狀者，列為疑似病例，但確診需進行實驗室診斷。實驗室診斷實驗步驟（只家畜的糞樣分別進行1250g，羊糞10g。羊糞加樣取羊糞10g加入長頸平底燒瓶并編號,往長頸平底燒瓶內加入25℃水至瓶口下4cm～5cm處。牛糞加樣將50克牛糞放入銅篩中，銅篩置塑料量筒上部，加水淹沒糞樣，用竹筷攪拌至稀漿狀，撈出銅篩，瀝干后再次浸入，攪拌，如此3次。再將塑料量筒中的糞樣靜置沉淀15min～20min（室溫超過20℃時靜置時間不超過10min），棄上層清液，將沉淀物倒入長頸平底燒瓶，加水至瓶口下4cm～5cm。毛蚴孵化用玻璃棒將折疊好的1cm～1.5cm厚的松軟脫脂棉推入長頸平底燒瓶,使脫脂棉剛好浸入液面,補加水至液面高出脫脂棉2cm～3cm將裝好糞樣的長頸平底燒瓶放置于20℃～30℃環境中，在光照（日光或燈光）條件下進行孵育，避免陽光直射。如室溫低于20℃，可將長頸平底燒瓶放入25℃溫箱（內加入日光燈）或水浴鍋中進行孵化。毛蚴觀察孵化（或在光線充足的地方結果判定東畢吸蟲毛蚴形態及運動特征毛蚴眼觀為針尖大小、灰白色、梭形，折光性強，在脫脂棉上層清液中作水平或斜向直線運動。陰性、陽性判定發現毛蚴，則判定為陽性；陰性樣本復查1次，如未發現毛蚴，則判定為陰性。診斷結果有流行病學接觸史的動物，出現本病臨床癥狀。確診糞便孵化發現毛蚴。附錄A（規范性附錄）實驗用品與試劑實驗用品孵育室（箱）室溫低于2020℃～25500mL(500ml)40目～80試劑水（瓶50L水加明礬3g～5g，充分攪拌，澄清。用NaOH或HCL調節pH值至6.8～7.2。自來水在盛器中存放去氯過程中需敞口，不能蓋蓋子。附錄B（規范性附錄）樣本采集、保存、送檢樣本采集20g～25g（只