分解尿素地細菌地分離與計數課題2土壤中分解尿素地細菌地分離與計數一,基礎知識.尿素是一種重要地氮肥，農作物丕能（能,不能）直接吸收利用，而是首先通過土壤中地細菌將尿素分解為氨與這是因為細菌能合成胭酶。.科學家能從熱泉中把耐熱細菌篩選出來是因為熱泉地高溫條件淘汰了絕大多數微生物,這樣也適用于實驗室中微生物地篩選,原理是人為提供有利于目地菌株生長地條件（包括營養，溫度,PH度,PH等），同時抑制或阻止其它微生物生長。.在統計菌落數目時，常用來統計樣品中活菌數目地方法是稀釋涂布平板法。除此之外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量地常用方法。.采用稀釋涂布平板法統計菌落數目時,培養基表面生長地一個菌落,來源于1一個菌落,來源于1個活菌。通過統計菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確,一般選擇菌落數在止300地平板進行計數。.統計地菌落數比活菌地實際數目低。這是因為當兩個或多個細胞在一起時,平板上觀察到地只是二±菌落。因此,統計結果一般用菌落數來表示。.設置對照地主要目地是排除實驗組中非測試因素對實驗結果地影響,提高實驗結果地可信度。.對照實驗是指除了被測試條件外,其它條件都相同地實驗。滿足該條件地稱為對照組,未滿足該條件地稱為實驗組。二,實驗設計.實驗設計地內容包括實驗方案,材料用具,實施步驟與時間安排等。.根據圖示2—7填寫以下實驗流程：

配制土壤溶液—> 系列稀釋一涂布平板與培養一 菌落計數.土壤微生物主要分布在距地表3?8地近中性地潮濕土壤中，約70%?90%為細.分離不同地微生物采用不同地稀釋度，其原因是丕回微生物在土壤中含量不同。.培養不同微生物往往需要不同培養溫度與時間。細菌一般在 30?37℃培養1?2d,放線菌一般在 25?28℃培養5?7d,霉菌一般在25?28℃地溫度下培養3?4d。.菌落地特征包括形狀,大小,隆起程度,顏色等方面。1).實驗過程1)取土樣用地小鐵鏟與盛土樣地地信封在使用前都要滅菌。2）應在火焰旁稱取土壤10g。將稱好地土樣倒入盛有90mL無水地錐形瓶中，塞好棉塞。3）在稀釋土壤溶液地過程中，每一步都要在火焰旁進行。4）實驗時要對培養皿作好標記。注明培養基類型,培養時間,稀釋度等。5）為了提高效率，在操作時更加有條不紊，應當事先制jlit劃。三,結果分析與評價.對分離地菌種作進一步地鑒定，還需要借助生物化學地方法。.在細菌分解尿素地化學反應中，細菌合成地胭酶將尿素分解成了氨。氨會使培養基地堿性增強,PH升高。因此，我們可以通過檢測培養基pH變化來判斷該化學反應是否發生。.在以尿素為唯一氮源地培養基中加入酚紅指示劑。培養某種細菌后,如果PH升高,指示劑將變紅,說明該細菌能夠分解尿素。加強練習.從土壤中分離能分解尿素地細菌,可以利用選擇培養基,其成分中一定有(A)。尿素②有機氮化合物③無機鹽④有機碳化合物⑤水⑥無機碳化合物A(1)(3)(4)(5)B(2)(3)(4)(5)C(1)(5)(6)D(2)(3)(5)(6).可用于菌落數目統計地培養基是(A)A固體培養基 B液體培養基 C半固體培養基D天然培養基.產生標準菌落地細菌地最初數目與培養基分別是(C)A一個細菌液體培養基 B許多細菌液體培養基C一個細菌固體培養基 D許多細菌固體培養基.要從多種細菌中分離某種細菌，培養基要用(B)A加入青霉素地培養基 B固體培養基培養基生長狀態SS+V+ZS+U+Y+S+Z+XS+v+Y+S+U+XS+Y+Z+C液體培養基 D加入高濃度食鹽地培養基5.右表資料表明在各種培養基中細菌地生長,S為簡單培養,UVXYZ代表加入培養基地不同物質，問哪一種物質細菌不能合成(C)A.U B.V C.Y D.Z6培養基中濃度過高抑制微生物生長地原因是(B)

A含熱量太多B會使微生物失水C導致微生物休眠 D培養基中地碳源與氮源比例失衡7.不同種類地細菌菌落表現為不同地特征,下列屬于菌落特征地是①菌落大小②菌落形狀⑶菌落地隆起程度④菌落地顏色⑤菌落地透明度(D)A(1)(2)(3)B(2)(3)(4)C(1)(3)D(1)(2)(3)(4)(5).某同學在10,100,1000倍稀釋液地平均菌落數為2760,295,46,則菌落總數為(C)A27600 B29500 C46000 D37750.下列氮肥能被植物直接吸收地是(1)硝酸鹽⑵尿素⑶磷酸二氫氨⑷氨 (B)⑴⑵⑶(4)B⑴⑵⑶(4)B⑴⑶⑷C(2)(3)(4)D(1)(3).將某種細菌接種到徹底滅菌地固體培養基上,經過一段時間后能得到(D)A無一定形態地群體 B菌絲 C單個細菌 D菌落菌 D菌落褥亂菌傷寒菌結核菌11.實驗測定鏈霉素對3種細菌地抗生素效應，用3種細菌在事先準備好地瓊脂平板上畫3條等長地平行線(3條線均與圖中地鏈霉素帶接觸)，將平板置于37。。條件下恒溫培養3天,結果如圖所示。從實驗結果分析，以下敘述不正確地是(D)A.鏈霉素能阻止結核菌地生長B.鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人.測定土壤中細菌數量一般選用10）1（）5與1（）6倍地稀釋液進行平板培養,而測定真菌地數量一般選用10；1（）3與IO,倍稀釋，其原因是（C）A.細菌個體小，真菌個體大 B.細菌易稀釋,真菌不易稀釋C.細菌在土壤中數量比真菌多 D.隨機地，沒有原因.用來判斷選擇培養基是否起到了選擇作用需要設置地對照是（C）A.未接種地選擇培養基 B.未接種地牛肉膏蛋白陳培養基C.接種了地牛肉膏蛋白月東培養基 D.接種了地選擇培養基.下列能選擇出分解尿素地細菌地培養基是（A）KH2Po修Na2HpeMgS04-7H20,葡萄糖，尿素，瓊脂，水KH2P04,Na2HP04,MgS04-7H20,葡萄糖,瓊月旨,水KH2P04,Na2Hp0仆MgS04?7H20,尿素,瓊月旨,水KH2P0仆Na2HP04,MgS04-7H20,牛肉膏，蛋白陳，瓊脂，水.在涂布平板操作時錯誤地是（A）A.將涂布器在酒精燈火焰上灼燒,直到燒紅 B.取少量菌液滴加在培養基表面C.將沾有少量酒精地涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻8二s?10s再用D.涂布時可轉動培養皿，使涂布均勻.在尋找目地菌株時,要根據它對生存環境地要求,到相應地環境中去尋找，下列不屬于厭氧細菌生存環境地是（C）A.土壤深層A.土壤深層生 C.真空B.人或動物體內寄D.池塘淤泥.下列是關于檢測土壤中細菌總數實驗操作地敘述,其中錯誤地是（D）A.用蒸儲水配制牛肉膏蛋白陳培養基,經高溫,高壓滅菌后倒平板B.取10：10*IO,倍地土壤稀釋液與無菌水各o.lmL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組與對照組平板倒置,37℃恒溫培養24?48小時D.確定對照