HPLC法測定小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚含量〔〕:

摘要：目的建立高效液相色譜法測定小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚的含量。方法采用高效液相色譜法。色譜柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流動相：1%醋酸溶液〔用二乙胺調pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；流速：1.0mL-min-1；檢測波長：257nm。結果對乙酰氨基酚在8~120g-mL-1濃度范圍內線性關系良好，相關系數r=0.9998。結論該方法簡便、準確、重現性好，適于小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚含量測定。

關鍵詞：高效液相色譜法；含量；小兒酚氨咖敏顆粒；對乙酰氨基酚

本文引用格式：高翔,王濤,賈首前,等.HPLC法測定小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚含量[J].世界最新醫學信息文摘,2022,19(78):266,276.

0引言

小兒酚氨咖敏顆粒是如今市場上常見的用于兒童的藥物，每袋含對乙酰氨基酚63mg,咖啡因15mg,馬來酸氯苯那敏1mg，氨基比林50mg。國家藥品標準【1】WS-10001-(HD-1107)-2022給出了氨基比林、咖啡因、馬來酸氯苯那敏含量測定的測定標準，但對其另一主要成分，對乙酰氨基酚的含量、限度和測定方法沒有規定。為了更好的控制其質量，本文以高效液相色譜法測定小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚含量，結合中國藥典以及參考相關文獻[2-3],建立了小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚含量的高效液相色譜法，方法學結果說明：本方法簡便易行，精細度高，重現性好，具有很好的可行性。

1儀器與試藥

1.1儀器

美國Waters公司高效液相色譜儀〔AllianceE2695色譜系統，2489紫外檢測器，Empower工作站〕瑞士梅特勒公司ME204型，XPE105型全自動電子分析天平，昆山超聲儀器KQ-500DE型，超聲波清洗器。

1.2試藥

試藥：對乙酰氨基酚對照品〔中國藥品生物制品檢定研究院〕批號100018-202208，小兒酚氨咖敏顆粒〔金花企業〔集團〕股份西安金花制藥廠〕〔批號171213〕。

試劑：冰醋酸〔國藥集團化學試劑，批號：20220425〕分析純，二乙胺〔國藥集團化學試劑，批號：20221031〕分析純，甲醇〔默克公司，批號：1837107.623〕色譜純，水為18.3Mu;Omega;-CM的超純水。

2方法與結

2.1色譜條件

色譜柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流動相：1%醋酸溶液〔用二乙胺調pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；柱溫：30℃;流速：1.0mL-min-1；檢測波長：257nm；進樣量：20l。

2.2溶液的配制

對照品溶液：精細稱取對乙酰氨基酚對照品40.02mg，置于到100mL容量瓶中，加適量的流動相，徹底搖勻使對乙酰氨基酚完全溶解，用流動相稀釋至刻度，制成約400g/mL〔400.2g/mL〕的溶液，制成對照品儲藏液；精細量取5mL上述對照品儲藏液，置50mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

供試品溶液：取本品10袋，研細，精細稱取細粉0.8028g〔約相當于對乙酰氨基酚10mg〕，置50mL容量瓶中，參加適量的流動相，超聲15min，使樣品完全溶解，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精細移取5mL續濾液,置25mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3專屬性試驗

精細量取陰性對照溶液、對照品溶液和供試品溶液按上述2.1色譜條件分別進展測定，結果見圖1.結果說明：供試品溶液在與對乙酰氨基酚對照品溶液保存時間一致處有相應的色譜峰；陰性對照溶液在與對乙酰氨基酚對照品溶液保存時間一致處無相應的色譜峰。本方法的專屬性良好。

2.4線性關系試驗

準確量取上述2.2中對照品儲藏液1.0mL、3.0mL、5.0mL、10.0mL和15.0mL，分別置50mL容量瓶中，參加流動相稀釋至刻度，搖勻即得濃度分別為8.004g/mL、24.012g/mL、40.02g/mL、80.04g/mL和120.06g/mL的系列對照品溶液。分別在2.1色譜條件下測定，記錄色譜圖，以濃度X〔g/mL〕為橫坐標，以峰面積積分值Y為縱坐標，進展線性回歸，得回歸方程為Y=63602X-22557,r=0.9998。結果說明對乙酰氨基酚在8.004~120.06g-mL-1范圍內線性關系良好。

2.5檢測限和定量限試驗

取線性關系試驗項下對乙酰基酚濃度為40.02g/mL的對照品溶液，用流動相逐步稀釋，以上述2.1色譜條件進展進樣，記錄色譜圖，按信噪比為3:1時的對照品濃度為檢測限,結果得對乙酰氨基酚檢測線濃度為0.002g/mL；以信噪比為10:1時的對照品濃度為定量限，結果得對乙酰氨基酚定量限濃度為0.010g/mL。

2.6重復性試驗

取批號為171213的樣品按2.2.2項下供試品溶液制備方法平行制備6份樣品溶液。按上述2.1色譜條件測定，結果6份樣品中對乙酰氨基酚含量平均值為63.33mg/袋，RSD為0.77%。

2.7精細度實驗

精細汲取上述2.2中對照品儲藏液5mL,置50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，，按照上述2.1色譜條件重復測定6次，測定其峰面積積分值的RSD值為0.1%。結果說明，本方法精細度良好。

2.8含量測定

取批號為171213的樣品，按2.2.2項下供試品溶液制備方法制備樣品，按"2.1";項下色譜條件進展測定，結果測定的平均含量為100.3%。

3討論

3.1溶劑的選擇

在挑選含量測定的流動相以及溶劑時有從以下幾個方面考慮，首先本品為多組分藥品，成分較多需要考慮該方法中其他成分對對乙酰基酚的峰面積有無影響；其次需要考慮選擇的溶劑是否能使對乙酰氨基酚完全溶解；最后還需要考慮對乙酰基酚與其他幾種成分的別離度是否良好，綜上考慮故挑選用：1%醋酸溶液〔用二乙胺調節PH值為3.7〕甲醇〔60：40〕為流動相及溶劑。

3.2方法學評價

本文是以高效液相法測定小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚的含量，經過試驗方法學的考察，在本文選定的色譜條件下，小兒酚氨咖敏顆粒中對乙酰氨基酚與其它成分別離度良好，對乙酰氨基酚在8~120g-mL-1濃度范圍內線性關系良好，相關系數r=0.9998。本方法可以方便準確的測出對乙酰氨基酚的含量，且本方法簡便易行，精細度高，重現性好，可以很好的控制產品質量，具有很好的可行性。

參考文獻

【1】國家藥品監視管理局國家藥品標準(化學藥品地方標準上升