尿沉渣分析儀問答發(fā)布日期：2007-09-05 發(fā)布人:ylqxl23 最后更新時(shí)間:2009-05-15 瀏覽次數(shù):12101?為什么要采用尿沉渣計(jì)數(shù)板？答：尿沉渣的量和壓（涂）片厚度是標(biāo)準(zhǔn)化重要環(huán)節(jié)，在普通玻片上隨意滴加沉渣液或加蓋玻片（甚至不加蓋玻片），不能提供標(biāo)準(zhǔn)化的結(jié)果。建議使用標(biāo)準(zhǔn)化的沉渣計(jì)數(shù)板。2?尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括哪些？答：《尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議（討論稿）》中規(guī)定尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括：細(xì)胞：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞（包括腎小管上皮細(xì)胞、移行上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞）、異型細(xì)胞等。管型：透明管型、細(xì)胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型等。結(jié)晶：磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶等。細(xì)菌、寄生蟲（或蟲卵）、真菌、精子、粘液等。臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分。3?干化學(xué)尿分析是怎樣測(cè)定白細(xì)胞的？答：干化學(xué)法檢查尿內(nèi)白細(xì)胞的原理，是基于粒細(xì)胞漿內(nèi)含有酯酶，能水解試劑帶膜塊中的吲哚酚酯生成吲哚酚和有機(jī)酸，進(jìn)一步氧化而顯色，顏色的深淺與白細(xì)胞含量的多少成正比。高比重尿、維生素C、高葡萄糖尿、清蛋白、淋巴細(xì)胞尿、頭抱菌素可造成測(cè)定結(jié)果的假陰性。4?干化學(xué)尿分析是怎樣測(cè)紅細(xì)胞的？答：紅細(xì)胞、血紅蛋白及肌紅蛋白具有類似過氧化物酶的作用，將無色的底物氧化為有色化合物。某些氧化物如漂白粉等可導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。尿路感染，由于細(xì)菌產(chǎn)生過氧化物酶也會(huì)引起假陽性。尿液中大量維生素C的存在而產(chǎn)生還原作用，可抑制試驗(yàn)氧化作用，引起假陰性。甲醛也會(huì)使試驗(yàn)敏感性降低或呈假陰性。5?為什么說干化學(xué)尿分析只能用于“過篩”？答：如前所述，干化學(xué)測(cè)定尿液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞都屬于間接測(cè)量，容易受到各種因素干擾，出現(xiàn)各種假陰性、假陽性報(bào)告。不同廠家、不同型號(hào)的試劑帶敏感度不一樣，而且還有批間誤差的影響。6?尿沉渣分析儀分成哪幾類？答：盡管近年來在尿沉渣檢查中發(fā)展了一些新的方法（例如用單克隆抗體識(shí)別各種細(xì)胞），但就商品化的尿沉渣分析儀而言，按測(cè)量原理分類，目前只分成鏡檢圖像式和流式細(xì)胞法兩類。在鏡檢圖像式尿沉渣分析儀中按測(cè)量池的不同，又可分為一次性標(biāo)準(zhǔn)定量板式和流動(dòng)池式兩種。7?尿沉渣分析儀發(fā)展情況如何？答：經(jīng)典的尿沉渣顯微鏡檢查已伴隨檢驗(yàn)界渡過了漫長歲月，至今仍是最直接最權(quán)威的方法。尿沉渣分析儀的歷史還是短暫的，新產(chǎn)品正在不斷涌現(xiàn)。1988年，美國國際遙控圖像系統(tǒng)公司研制成功世界上第一臺(tái)攝像式尿沉渣分析儀，由檢驗(yàn)人員在計(jì)算機(jī)顯示屏上鑒別細(xì)胞。8?流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀的測(cè)量原理是什么？答：這種尿沉渣分析儀應(yīng)用了流式細(xì)胞和電阻抗原理：當(dāng)尿標(biāo)本被稀釋并染色后，靠液壓作用通過鞘液流動(dòng)池，它被無粒子顆粒的鞘液包圍，使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形式通過流動(dòng)池的中心軸線，并被氬激光光束照射。儀器將每個(gè)細(xì)胞發(fā)出的熒光、散射光和電阻抗信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。根據(jù)每個(gè)尿液標(biāo)本的直方圖和散射圖來區(qū)分細(xì)胞及其形態(tài)。9?流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀有何優(yōu)缺點(diǎn)？答：流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀是目前自動(dòng)化程度最高、分析速度最快的尿沉渣儀（每個(gè)樣品約需72秒鐘）。然而，它也存在著明顯不足之處：-無法區(qū)分小圓上皮細(xì)胞的類別（如腎小管上皮細(xì)胞、中層和底層移行上皮細(xì)胞等），必須離心染色鏡檢才能區(qū)分；-只能檢測(cè)出透明管型和標(biāo)出有病理管型的存在可能，只有通過離心鏡檢，才能確認(rèn)是那一類管型；-儀器對(duì)酵母細(xì)胞、精子細(xì)胞和結(jié)晶有標(biāo)記時(shí)都應(yīng)離心鏡檢，才能真正區(qū)分；-不能提供尿沉渣的真實(shí)形態(tài)圖，而是散射圖和直方圖。所以，專家們的共識(shí)是：干化學(xué)尿液分析儀、流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀等均只能作為尿液分析的篩選手段，而只有顯微鏡檢查是最終的。用戶對(duì)選擇流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀持謹(jǐn)慎態(tài)度的另一些原因是：-儀器價(jià)格昂貴，而且日常使用成本也過高，試劑成本過高；-儀器的使用、維護(hù)較復(fù)雜；-容易發(fā)生交叉污染、阻塞等現(xiàn)象。流式細(xì)胞法尿沉渣分析儀適用于標(biāo)本量非常大的醫(yī)院，作為尿沉渣篩選檢查設(shè)備，對(duì)有疑問的標(biāo)本進(jìn)一步進(jìn)行顯微鏡檢查是不可避免的。流動(dòng)池式尿沉渣分析儀如何工作？答：流動(dòng)池式尿沉渣分析儀目前市場(chǎng)上有兩類：一類是定量的，流動(dòng)池內(nèi)有計(jì)數(shù)格；另一類為非定量，流動(dòng)池內(nèi)無計(jì)數(shù)格，故無法滿足尿沉渣定量檢查標(biāo)準(zhǔn)的要求。流動(dòng)池式定量尿沉渣分析儀一般由流動(dòng)計(jì)數(shù)池、定量加樣器、顯微鏡、計(jì)算機(jī)、干化學(xué)尿分析儀構(gòu)成。用蠕動(dòng)泵自動(dòng)吸入定量尿液，流動(dòng)計(jì)數(shù)池刻有4個(gè)大方格（容積為0.25但/大格），每個(gè)大方格又分成25小方格（容積為0.01pl/小格）。通過人工操作顯微鏡觀察標(biāo)本，計(jì)數(shù)分型完畢，自動(dòng)沖洗標(biāo)本。流動(dòng)池式尿沉渣分析儀有何特點(diǎn)？答：流動(dòng)池式尿沉渣分析儀的優(yōu)點(diǎn)是基于可靠的顯微鏡觀察和自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)沖洗。其缺點(diǎn)是：-測(cè)試速度太慢：進(jìn)樣時(shí)需吸入時(shí)間和穩(wěn)定時(shí)間，如果反復(fù)沖洗不凈的話還要長時(shí)間浸泡，而人工操作顯微鏡不僅緩慢而且工作強(qiáng)度大；-操作難以規(guī)范化，受人為因素影響，同一標(biāo)本往往因觀察者不同而結(jié)果不同，即使同一觀察者也會(huì)因兩次觀察路徑不同而結(jié)果不同；-存在不可避免的交叉污染，這是流動(dòng)池式儀器的通?。?容易發(fā)生阻塞，連接部的死區(qū)造成污垢的積累；-如果對(duì)標(biāo)本染色就會(huì)污染流動(dòng)池，導(dǎo)致無法沖洗干凈。選購流動(dòng)池式尿沉渣分析儀時(shí)應(yīng)注意什么？答：目前市場(chǎng)上流動(dòng)池式尿沉渣分析儀會(huì)出現(xiàn)以下一些問題：-非定量流動(dòng)池上沒有定量刻度，當(dāng)然也就無法以XX/』報(bào)告；-流動(dòng)池內(nèi)腔厚度未經(jīng)?；?jì)量，無法保證被測(cè)樣品的體積精度；-流動(dòng)池內(nèi)腔過厚，細(xì)胞無法在同一焦平面上觀察到，并且樣品漂移容易發(fā)生漏檢；-片面強(qiáng)調(diào)染色，造成流動(dòng)池污染。13?鏡檢時(shí)如何才能克服尿沉渣標(biāo)本的非均勻性？答：尿沉渣標(biāo)本的顯著特征就是非均勻性。為了克服標(biāo)本非均勻性對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，鏡檢時(shí)要做到兩條：-保證不少于最小觀察體積；-嚴(yán)格按規(guī)定路徑進(jìn)行觀察。14?什么叫自動(dòng)顯微平臺(tái)技術(shù)？答：所謂自動(dòng)顯微平臺(tái)技術(shù)是指顯微鏡的載物平臺(tái)（X、Y軸方向）的運(yùn)動(dòng)、聚焦（Z軸方向）、物鏡的切換、光源的強(qiáng)弱等等都受控于計(jì)算機(jī)。也就是說，只要通過鼠標(biāo)、控制器、甚至網(wǎng)上傳來的控制命令，顯微鏡就能按照人們的意愿動(dòng)作起來。普利生AMP2000型自動(dòng)顯微平臺(tái)的掃描精度達(dá)1微米。因此，該技術(shù)具有廣闊的應(yīng)用前景，目前已成功應(yīng)用于病理遠(yuǎn)程全景同步會(huì)診、尿沉渣自動(dòng)掃描等領(lǐng)域。15?用于離心尿液的離心管有何要求？答：《尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議（討論稿）》中規(guī)定：“應(yīng)具備以下條件：清潔、透明、帶刻度，刻度應(yīng)至少標(biāo)明10ml、1ml、0.2ml，容積應(yīng)12ml，試管底部呈錐形或縮窄形。試管口應(yīng)盡可能具有密封裝置，最好使用不易破碎一次性塑料或玻璃離心管?！?6?尿沉渣專用離心管有何特點(diǎn)？答：目前，定量尿沉渣檢查普遍采用的一種專用離心管，管壁有刻度，可盛放10ml尿液。管的底部有一個(gè)0.2ml的突出部分，在倒去離心后的上清液時(shí)，利用液面的表面張力將0.2ml的尿沉渣樣品留在這里面。也就是說很方便地獲得了濃縮50倍的標(biāo)本。17.是不是任何標(biāo)本都必須濃縮50倍？答：這是一種誤解。一般標(biāo)本濃縮50倍后，可提高檢測(cè)率，減少觀察體積。對(duì)于那些明顯混濁的標(biāo)本，可以不濃縮，以免濃縮后又要稀釋，稀釋過程很容易引入測(cè)量誤差。計(jì)算數(shù)據(jù)時(shí)要考慮到濃縮與不濃縮的區(qū)別。18?對(duì)于離心機(jī)有何要求？答：《尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議（討論稿）》中規(guī)定：“采用水平式離心機(jī)，離心時(shí)應(yīng)蓋上蓋，以保證安全。離心時(shí)，機(jī)內(nèi)溫度應(yīng)盡可能保持＜25°C，離心機(jī)相對(duì)離心力應(yīng)在400xg左右。離心機(jī)轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力的換算公式為：g=11.8x（rpm/1000）2xR或rpm=1000x（500/11.8xR）1/2注：rpm為每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)R為半徑，指從離心機(jī)軸中央到離心管底部的距離g為相對(duì)離心力例如：水平式離心機(jī)半徑為20cm時(shí)，采用1338r/min（或1350r/min）水平式離心機(jī)半徑為16cm時(shí)，采用1495r/min（或1500r/min）水平式離心機(jī)半徑為10cm時(shí)，采用1892r/min（或1900r/min）對(duì)顯微鏡有何要求？答：《尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議（討論稿）》中建議：“尿沉渣檢查盡可能使用具有內(nèi)置光源的顯微鏡，光線強(qiáng)度可調(diào)，應(yīng)具備40倍、10倍的物鏡和10倍的目鏡。同一實(shí)驗(yàn)室如有多臺(tái)顯微鏡，各顯微鏡的物鏡及目鏡的放大倍數(shù)應(yīng)一致?！蓖瑫r(shí)又建議：“有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)開展各種尿液有形成分的染色檢查，配置多種類型顯微鏡（如相差顯微鏡，偏振光顯微鏡等），以便于有形成分的進(jìn)一步鑒別。”FASTREAD10尿沉渣定量分析板有何特點(diǎn)？答:FASTREAD10板為NCCLS和中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)推薦的一次性尿沉渣定量分析板。每塊板上有10個(gè)大格，即可放10個(gè)樣品。每個(gè)大格的可觀察體積約7囚，其中劃有刻度的計(jì)數(shù)區(qū)的總體積為精確的1卩1。每個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)分為10個(gè)中格，每個(gè)中格又劃分為16個(gè)小格。也就是說，1卩1體積的樣品，在這里被精密地分成160個(gè)小格。由于采用一次性定量板，所以不再需要清洗，也不用擔(dān)心染色劑的玷污，省力省時(shí)無交叉污染。定量板的價(jià)格便宜，而且不需其它試劑。顧可梁教授通過對(duì)普通載玻片不加蓋玻片法、載玻片加蓋玻片法、改良 Neubauer計(jì)數(shù)池法、FASTREAD10定量板法四種方法進(jìn)行比較后指出，在實(shí)驗(yàn)室常用的尿沉渣檢查法中，以定量分析板法的變異系數(shù)最?。虺猎R檢，上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000；15（2）：68）。尿沉渣標(biāo)本染色的目的是什么？答：相當(dāng)多專家贊同尿沉渣非染色鏡檢，他們對(duì)尿沉渣染色的疑慮是：-某些染液的成分會(huì)導(dǎo)致溶血現(xiàn)象，在低比重尿中尤為明顯；-由于大量染液的加入而引起稀釋比的計(jì)算誤差。應(yīng)當(dāng)指出在大多數(shù)情況下尿沉渣非染色鏡檢足以勝任，然而有些情況下，染色的優(yōu)點(diǎn)將很有幫助。選擇合適的染色方法可減小發(fā)生溶血的幾率。至于染液稀釋標(biāo)本而引起的誤差可從技術(shù)上予以改進(jìn)。尿沉渣染色的目的主要是：-防止尿沉渣標(biāo)本中主要成分在鏡檢時(shí)遺漏和誤認(rèn)；-便于確定某些特殊成分（如脂肪球等）；-判斷難辨別的尿沉渣成分（如半透明的上皮細(xì)胞等）或異形細(xì)胞等；-制備臨床或科研所需永久性標(biāo)本。如何進(jìn)行尿沉渣標(biāo)本染色？答：建議尿沉渣臨床檢驗(yàn)采用以下步驟，以避免染液對(duì)尿沉渣標(biāo)本的稀釋作用：-在標(biāo)準(zhǔn)定量分析池中進(jìn)行非染色定量計(jì)數(shù)；-對(duì)于有疑問的標(biāo)本，可進(jìn)一步染色分型，可在玻片上觀察。如果要提高分辨率，采用位相差顯微鏡是一種明智的選擇。而偏振光顯微鏡對(duì)